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紫杉醇化疗后神经病理痛大鼠脊髓和背根神经节Fractalkine mRNA的表达变化

作　者: 罗婷
导　师: 田玉科
学　校: 华中科技大学
专　业: 麻醉学
关键词: 神经病理性疼痛 Fractalkine 紫杉醇
分类号: R73-3
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

研究背景紫杉醇化疗后常引起难治性神经病理性疼痛,其确切机制不详。研究发现脊髓小胶质细胞的激活参与紫杉醇化疗后神经病理性疼痛。Fractalkine(Fkn,CX3CL1)主要表达在神经元,受体CX3CR1主要表达在小胶质细胞,此种互补式分布提示Fractalkine/CX3CR1在调节小胶质细胞激活中发挥作用。研究表明Fractalkine/CX3CR1参与多种神经损伤和炎症所致的神经病理性疼痛,然而亦有研究提示Fractalkine/CX3CR具有抗痛觉超敏及神经保护的作用。但Fractalkine是否参与紫杉醇化疗后神经病理性疼痛目前尚不清楚。目的本实验通过建立大鼠紫杉醇化疗后神经病理性疼痛模型,用实时定量PCR技术检测腰段脊髓和背根神经节Fractalkine mRNA的表达变化,探讨Fractalkine是否参与大鼠紫杉醇化疗后神经病理性疼痛以及根据研究结果探讨Fkn在大鼠紫杉醇化疗后神经病理性疼痛中的作用。方法1.大鼠紫杉醇化疗后神经病理性疼痛模型的建立20只240~260g SD雄性大鼠,随机分为2组:模型组(paclitaxel-induced painful peripheral neuropathy,PN组,n=10),对照组(CON组,n=10)。本实验参照2001年Polomano Rosemary C.报道的方法,在1,3,5,7天时重复腹腔注射大鼠1mg/kg紫杉醇溶液(0.9%生理盐水稀释),建立大鼠紫杉醇化疗后神经病理性疼痛模型。CON组给予相同体积溶剂聚氧乙基蓖麻油(0.9%生理盐水稀释)。在第1,2,4,6,8,9,10,12,14天采用up-down和Hargreaves方法分别测定机械性疼痛和热痛阈值,观察神经病理性疼痛发展过程。2.检测趋化因子Fractalkine mRNA在紫杉醇化疗后神经病理性疼痛大鼠脊髓和背根神经节的表达模型成功后于第14天处死大鼠,收集脊髓腰膨大和腰段背根神经节标本,分别提取组织总RNA,用实时定量PCR技术检测腰段脊髓和背根神经节Fractalkine mRNA的表达变化。结果1.成功建立大鼠紫杉醇化疗后神经病理性疼痛模型。模型在给药后逐渐开始产生机械性痛觉超敏和热痛觉过敏,第14天阈值均降至最低。所测数据分析第4,8,9天50%缩爪阈值PN组与CON组相比差异有统计学意义(P<0.05),第6,10,12,14天PN组与CON组相比,差异有显著统计学意义(P<0.01)。热缩足潜伏期第6,9,10天PN组与CON组相比,差异有统计学意义(P<0.05);第4,8,12,14天PN组和CON组相比,差异有显著统计学意义(P<0.01)。2.实时定量PCR技术检测结果,与CON组相比,PN组腰段脊髓Fractalkine mRNA表达下调,差异有统计学意义(P<0.05);腰段背根神经节中Fractalkine mRNA表达下调,差异有显著统计学意义(P<0.01)。结论成功建立大鼠紫杉醇化疗后神经病理性疼痛模型;通过实时定量PCR技术检测发现大鼠腰段脊髓和背根神经节Fractalkine表达均下调,提示Fractalkine参与大鼠紫杉醇化疗后神经病理性疼痛的病理过程,推测Fractalkine的神经保护作用可能减弱,从而间接促进大鼠紫杉醇化疗后神经病理性疼痛发生。

全文目录

主要缩略词表  5-6
中文摘要  6-8
ABSTRACT  8-11
前言  11-13
材料与方法  13-19
结果  19-24
讨论  24-29
参考文献  29-34
综述  34-46
  参考文献  42-46
致谢  46-47

紫杉醇化疗后神经病理痛大鼠脊髓和背根神经节Fractalkine mRNA的表达变化

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