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被动吸烟致畸的实验研究

作　者: 张建民
导　师: 于向民；王文青
学　校: 青岛大学
专　业: 人体解剖与组织胚胎学
关键词: Tobacco smoking pollution apoptosis Bcl-2 Bax
分类号: R363
类　型: 硕士论文
年　份: 2002年
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内容摘要

吸烟对人类健康的危害已尽人皆知。我国妇女有吸烟习惯者虽远较欧美妇女为少，但我国男子吸烟者多，孕妇被动吸烟者居多。由此引起的对胎儿危害也就越来越引起人们的关注。大量的临床观察和动物实验证明吸烟可引起胎儿神经系统、泌尿系统等缺陷，同时易发生自然流产、死胎和围产期死亡率等不良影响。目前被动吸烟可导致畸胎的研究多数局限于临床的流行病学调查研究，而被动吸烟对神经管发育的影响研究的文献报道很少。为此，我们设计了金黄地鼠被动吸烟的实验模型来研究被动吸烟对金黄地鼠胚胎神经管发育过程中细胞凋亡，凋亡相关基因Bcl-2和Bax表达的影响，为被动吸烟致畸机理的研究和抗致畸研究提供重要的理论基础和实验依据。我们以金黄地鼠为致畸动物，以青岛颐中烟草公司所生产的海滨牌香烟进行烟熏，对多个不同剂量(每天4小时，自8am至12am，连续3天；每天6小时，分别自9am至11am，2pm至4pm，8pm至10pm，连续3天)，不同给予时间(孕3-5天；孕6-8天；9-11天)的组合进行了致畸效果的观察和统计学处理，以期最终筛选出一个致畸率最高，致死率最低，致畸效果最稳定的剂量、时间组合，建立被动吸烟致畸的动物模型。在此动物模型基础上，将被动吸烟处理过孕9天、孕10天、孕11天的金黄地鼠剖腹取材，用核固红-结晶紫染色和原位末端标记法(TUNEL)观察了胚胎神经上皮发生过程中的细胞中文摘要凋亡现象，并用形态计量方法定量分析了相关神经上皮细胞凋亡的时空变化。在上述研究的基础上，我们又用免疫组化方法和图象分析技术对各期实验组和对照组金黄地鼠胚胎神经管上皮细胞中的凋亡相关基因BclZ和Bax进行了定性、定量分析。结果显示：1．被动吸烟具有明显的胚胎毒性且与被动吸烟的量明显相关，每天吸烟量为6 小时，连续3天，较每天吸烟量为4小时、连续3天的畸胎率明显增高，活胎的平均体重降低。二．被动吸烟的胚胎毒性与给予时间明显相关。中期（孕6． 8 天）被动吸烟的鼠胎畸胎率最高。即中期吸烟（每天吸烟时间6 小时，连续3天）是我们的被动吸烟致畸的动物实验模型。 3．被动吸烟可使鼠胎神经管上皮细胞过度凋亡，实验组均较对照组有明显增多的细胞凋亡。4．BclZ 和 Bax 蛋白广泛分布于金黄地鼠胚胎神经上皮和周围间充质中，定位于核膜和胞浆中。被动吸烟处理后，各实验组神经管上皮细胞的BC12 免疫组化染邑强度均不同程度的低于对照组，Bax 的表达实验各组均不同程度的高于对照组。结沦：1．被动吸烟作为一种致畸原对金黄地鼠有明显的胚胎毒性和致畸作用，且与被动吸烟量和给予时间明显相关。 2．被动吸烟致畸金黄地鼠模型，致畸率高，操作简便，可重复性强，有很强的实验价值。 3．被动吸烟致神经管畸形的作用途径之一是神经管上皮的过度凋亡。 4．被动吸烟可抑制胚胎神经管上皮中的B。12的生物合成，促进 B ax 的表达，这两种凋亡相关基因的协同作用可能是导致神经管畸形的一条重要途径

全文目录

中文摘要  4-6
英文摘要  6-9
正文  9-48
  第一部分被动吸烟致畸作用的研究和致畸动物模型的建立  9-18
    摘要  9-10
    材料和方法  10-11
    结果  11-12
    讨论  12-15
    图版说明  15-17
    参考文献  17-18
  第二部分被动吸烟致神经管畸形的细胞凋亡的研究  18-33
    摘要  18-19
    材料和方法  19-22
    结果  22
    讨论  22-26
    图版说明  26-32
    参考文献  32-33
  第三部分被动吸烟对神经管上皮中凋亡相关基因Bcl-2和Bax表达的影响  33-48
    摘要  33-34
    材料和方法  34-36
    结果  36
    讨论  36-40
    图版说明  40-46
    参考文献  46-48
综述  48-71
  吸烟的危害及其机理的研究  48-62
  参考文献  62-71
致谢  71-72
附录  72
  英文缩略语  72

被动吸烟致畸的实验研究

内容摘要

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