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1）边缘无浆体快速诊断试剂盒的研制 2）羊泰勒虫临床症状、血液学以及抗体变化的研究

作　者: 袁建丰
导　师: 姚宝安；吴鑑三；赵俊龙
学　校: 华中农业大学
专　业: 预防兽医学
关键词: 边缘无浆体病 羧化胶乳 化学交联 胶乳凝集 抗体检测 羊泰勒虫 临床症状 血液学 抗体水平
分类号: S858.26
类　型: 硕士论文
年　份: 2005年
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内容摘要


边缘无浆体病(Anaplasma Marginale Disease)是由边缘无浆体(A. marginle)经蜱传播而引起的一种传染性血液寄生虫病。本病主要引起牛、羊、鹿等家畜发病,严重的可以致死,牛死亡率可达80%。它是阻碍养牛业发展的几种主要蜱传播疾病中分布最广的一种。本病已被国际兽医局和我国农业部列为动物检疫的主要对象。 目前,国内外已经建立了许多检测边缘无浆体病的方法,如:补体结合试验(CF)、卡片凝集试验(CAT)、竞争ELISA(cELISA)、dot-ELISA、间接荧光抗体试验(IFAT)、核酸探针、PCR等。但上述方法操作繁琐、技术要求高、需要昂贵的仪器设备、花费高、耗时长等,不利于及时地对本病进行免疫监测和诊断,从而限制了它们在基层的推广使用。胶乳凝集试验(LAT)由于具有快速敏感、简单易行、特异性好等优点,已在许多疾病的诊断中广泛使用,但还未见用该方法检测边缘无浆体病的报道。 为了研究用LAT检测边缘无浆体病,作者将经液氮保存的边缘无浆体虫株复苏后人工接种试验牛,当该试验牛红细胞染虫率达到高峰时,采抗凝血,静脉接种另一头试验牛,当试验牛红细胞染虫率达到高峰时采抗凝血。然后用0.85%氯化铵破碎感染边缘无浆体的红细胞,离心,超声粉碎虫体,获得可用于胶乳凝集试验的无浆体可溶性抗原。将边缘无浆体可溶性抗原以化学交联的方式,致敏羧化胶乳,制成胶乳抗原。成功地建立了一种检测牛边缘无浆体病血清抗体的胶乳凝集试验(LAT)诊断方法。用此无浆体抗原致敏的胶乳,分别检测瑟氏泰勒虫病、双芽巴贝斯病、衣原体病、附红细胞体病的阳性血清,结果均为阴性;而与标准阳性血清、边缘无浆体免疫牛血清、该病流行区血清样品,均呈明显的凝集反应。结果表明,研制出的边缘无浆体病LAT方法,是一种特别适合基层现场检测边缘无浆体病血清抗体,具有操作简单、快速、敏感性高、特异性强、价格低廉的优点。

全文目录


第一部分 边缘无浆体快速诊断试剂盒的研制  5-38
  摘要  6-7
  ABSTRACT  7-8
  第一章 边缘无浆体病研究进展  8-22
    1.1 病原体  8-9
      1.1.1 分类学  8
      1.1.2 形态学  8-9
    1.2 地理分布  9
    1.3 传播媒介  9-11
    1.4 流行病学  11
    1.5 临床症状  11-12
    1.6 病理变化  12
    1.7 诊断技术  12-17
      1.7.1 病原学诊断  12-13
      1.7.2 血清学诊断  13-16
      1.7.3 分子生物学检测  16-17
    1.8 无浆体病的防治  17-22
      1.8.1 蜱的控制  18-19
      1.8.2 无浆体疫苗的研究进展  19-20
      1.8.3 药物治疗  20-22
  第二章 试验部分  22-30
    2.1 目的和意义  22
    2.2 材料与方法  22-25
      2.2.1 材料  22-23
      2.2.2 方法  23-25
    2.3 结果与分析  25-27
      2.3.1 抗原蛋白质浓度  25
      2.3.2 缓冲液最佳pH值的确定  25-26
      2.3.3 最佳抗原浓度的确定  26
      2.3.4 致敏胶乳自凝性检测  26
      2.3.5 致敏胶乳特异性的检测  26-27
      2.3.6 血清处理与否对结果的影响  27
      2.3.7 抗原保质期的测定  27
      2.2.8 血清调查结果  27
    2.4 讨论  27-29
    2.5 小结  29-30
  参考文献  30-38
第二部分 羊泰勒虫临床症状、血液学以及抗体变化的研究  38-65
  摘要  39-40
  Abstract  40-41
  第三章 羊泰勒虫病研究进展  41-50
    3.1 病原学  41-43
      3.1.1 病原的分类  41-42
      3.1.2 形态学  42-43
    3.2 地理分布  43
    3.3 传播媒介  43-44
    3.4 流行病学  44
    3.5 致病作用  44-45
    3.6 临床症状  45-46
    3.7 病理变化  46
    3.8 诊断技术  46-48
      3.8.1 病原鉴定  46-47
      3.8.2 血清学诊断  47
      3.8.3 分子生物学诊断  47-48
    3.9 防治  48-50
      3.9.1 蜱的控制  48
      3.9.2 药物预防  48
      3.9.3 药物治疗  48-50
  第四章 试验部分  50-61
    4.1 材料与方法  50-51
      4.1.1 材料  50
      4.1.2 方法  50-51
    4.2 结果与分析  51-58
      4.2.1 蜱感染情况  51-52
      4.2.2 体温变化  52-54
      4.2.3 裂殖体的检查  54-56
      4.2.4 虫体的检查  56-57
      4.2.5 血液学的检查  57-58
      4.2.6 羊抗体水平的检测  58
    4.3 讨论  58-60
    4.4 小结  60-61
  参考文献  61-65
致谢  65

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中图分类: > 农业科学 > 畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂 > 动物医学（兽医学） > 各种家畜、家禽、野生动物的疾 > 家畜 > 羊
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