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鸡痢疾志贺氏菌灭活苗免疫抗体微量凝集试验方法的建立及应用

作　者: 刘纪成
导　师: 许兰菊；赵聘
学　校: 河南农业大学
专　业: 预防兽医学
关键词: 鸡痢疾志贺氏菌灭活疫苗免疫抗体水平微量凝集试验方法建立应用
分类号: S858.31
类　型: 硕士论文
年　份: 2007年
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内容摘要

鸡志贺氏菌病是由鸡志贺氏菌引起的一种新的急性传染病。该病主要特征为腹泻和明显的肠道病变。同一个养鸡场发病率可高达100%,死亡率达3.84%～33.5%。耐过鸡表现消瘦,生长发育缓慢。目前国内外报道,志贺氏菌除感染鸡外,还可感染多种动物导致腹泻,其中有家兔、幼犬、犊牛、仔猪、猴等,引起动物大批发病和死亡,经济损失惨重。此外,该菌还可感染人,引起人的痢疾和死亡。由此可见,志贺氏菌对人和动物健康造成很大威胁,且严重影响了畜牧业的健康发展。因此,有效控制鸡志贺氏菌病不但对发展畜牧养殖业具有重要价值,而且在兽医和医学公共卫生方面具有重要意义。目前鸡群虽有鸡痢疾志贺氏菌灭活苗进行免疫,但仍缺少正确评价疫苗免疫效果和免疫抗体监测的可靠手段和方法。虽有报道微量凝集试验用于动物大肠杆菌疫苗免疫抗体水平的测定,并显示较好效果,但该方法用于鸡痢疾志贺氏菌疫苗免疫抗体的监测,目前尚未见报道。故本研究具有显著的创新性和应用价值。为了对鸡痢疾志贺氏菌灭活苗免疫抗体水平进行准确的监测,并建立一种准确可靠的微量凝集试验检测方法,本研究利用鸡痢疾志贺氏菌菌株制备凝集抗原及其血清,在各种不同的反应条件下,按照一定的反应操作术式及结果判定标准进行试验,从而优化选择各种最佳反应条件。结果显示:抗原最适浓度为40亿/ml,最佳温度为35℃,最佳反应时间为1h,最佳pH及稀释液为pH7.0的PBS,从而确立了鸡痢疾志贺氏菌灭活苗免疫抗体微量凝集试验方法的最佳反应条件,并确定了试验的反应操作术式和结果判定标准。试验结果还表明:本方法具有特异性强、敏感性高、重复性好,方法简便易行等特点。本方法的建立为鸡痢疾志贺氏菌灭活苗的免疫抗体监测提供了可靠条件,并为正确评价疫苗免疫效果和有效预防该病提供了重要依据。用上述所建立的微量凝集试验方法检测试验鸡群中痢疾志贺氏菌免疫抗体水平,使该方法得以初步的应用。从200只正常饲养管理和免疫的雏鸡中挑选100只健雏进行分组试验,免疫组和未免疫组各50只。免疫组首次免疫用鸡痢疾志贺氏菌灭活铝胶苗,每只胸肌注射1ml,首免后第4周分为两组,每组各25只,其中一组首免后第四周用鸡痢疾志贺氏菌灭活油乳苗进行二免,另一组首免后第六周用同种油乳苗进行二免,每只均胸肌注射2ml。未免疫组未接种鸡痢疾志贺氏菌疫苗。免疫组和未免疫组鸡群在免疫前及免疫后每周均采血1次,并分离血清进行抗体测定。结果表明:免疫组无论是首免和二免鸡群抗体水平均明显高于同期的未免疫组,由此说明鸡痢疾志贺氏菌灭活铝胶苗和油乳苗均可显著提高机体的体液免疫功能,同时进一步表明本研究所建立的微量凝集试验方法用于鸡痢疾志贺氏菌疫苗免疫抗体的测定是切实可行的。

全文目录

致谢词  4-6
摘要  6-7
1 文献综述  7-22
  1.1 国内外医学界对志贺氏菌病的研究进展  7
  1.2 国内外兽医界对志贺氏菌病的研究进展  7-8
  1.3 志贺氏菌的致病机理  8-9
  1.4 志贺氏菌侵染过程的分子机制  9-10
  1.5 志贺氏菌的毒力相关基因  10-12
  1.6 志贺氏菌分子流行病学  12-13
  1.7 志贺氏菌的耐药性研究进展  13
  1.8 志贺氏菌菌苗研究进展  13-18
  1.9 动物被疫苗接种后体内抗体产生的规律  18-19
  1.10 病原微生物检测方法研究进展  19-22
2 引言  22-23
3 试验一:鸡痢疾志贺氏菌灭活苗免疫抗体微量凝集试验检测方法的建立  23-29
  3.1 材料与方法  23-25
  3.2 结果  25-27
  3.3 小结和讨论  27-29
4 试验二:鸡痢疾志贺氏菌灭活苗免疫抗体微量凝集试验检测方法的应用  29-34
  4.1 材料与方法  29-30
  4.2 结果  30-32
  4.3 讨论与小结  32-34
5 主要参考文献  34-41
6 英文摘要  41-42

鸡痢疾志贺氏菌灭活苗免疫抗体微量凝集试验方法的建立及应用

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