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药用植物新疆紫草离体繁育研究

作 者: 江波
导 师: 陈永喆
学 校: 山东大学
专 业: 植物学
关键词: 新疆紫草 药用植物 愈伤组织 不定芽 植株再生 器官发生
分类号: S567.239
类 型: 硕士论文
年 份: 2005年
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内容摘要


本文以药用植物新疆紫草为实验材料,通过间接器官发生与直接器官发生两条途径,建立了新疆紫草高效的离体再生系统。 在间接器官发生再生途径的实验中,按照外植体——愈伤组织的诱导——愈伤组织继代——愈伤组织再分化——不定芽的扶壮与快繁——根的诱导与移栽的过程进行一系列的优化试验。 在愈伤组织诱导过程中,比较了不同基本培养基、不同浓度的激素组合、不同外植体的影响。结果表明愈伤组织的最佳诱导条件为:以茎段为外植体,在改良LS基本培养基上添加1.0mg/L2,4-D和1.0mg/L KT。 愈伤组织在继代筛选过程中,形态上呈现出两种不同类型:一种为白色紧密的块状结构,可实现再分化;另一种为半透明的松散型愈伤组织,没有能诱导其再分化,却是进行细胞培养生产次生代谢产物的优良材料。 对于紧密型愈伤组织进行再分化实验,比较了不同细胞分裂素(KT,BA,TDZ)、不同浓度的ABA、不同种类与浓度的渗透调节剂(PEG4000与甘露醇)、乙烯抑制剂AgNO3、不同愈伤组织继代次数,对于再分化的影响。结果表明,KT的诱导效果比BA和TDZ好,其中1.5mg/L KT具有最大的分化率,分化频率达到87%,平均每块愈伤组织可以产生7.4棵苗;低浓度的ABA对于愈伤组织分化有一定的促进作用;渗透剂PEG4000要比甘露醇更利于再生苗的后期发育;2.0mg/L AgNO3可以使愈伤组织的分化频率达到87%,每块愈伤组织可以诱导产生9.2棵苗;继代次数对愈伤组织的分化影响较大,继代次数越高,分化频率越低。 在不定芽扶壮过程中,100mg/L PVP能够很好的抑制芽基部的褐化现象,并且促进不定芽的生长发育。KT对于不定芽的快繁效果要比BA好,1.0mg/L KT可以诱导平均每棵不定芽产生6.5棵新的不定芽。在根的诱导过程中,不同量的基本培养基和不同种类与浓度的生长素都有一定的影响,在1/2的改良LS培养基上添加1.0 mg/L的IBA具有最佳的诱导效果,诱导频率为65%。 在直接器官发生途经中,主要研究了TDZ的作用效果。1.0mg/L TDZ具有最佳的诱导效果,单独使用TDZ比与其它激素结合使用效果更好。此外,TDZ对子叶外植体的诱导效果比胚轴外植体好,不同的TDZ处理时间对诱导频率也有影

全文目录


中文摘要  6-8
ABSTRACT  8-10
符号说明  10-11
文献综述  11-25
  摘要  11
  1. 植物组织培养技术在药用植物开发中的应用  11-16
    1.1 植物组织培养的基本概念  11
    1.2 植物组织培养的优点  11-12
    1.3 我国药用植物资源的现状  12-13
    1.4 植物组培技术在药用植物开发中的应用途径  13-15
      1.4.1 种苗的快速繁殖  13-14
      1.4.2 直接生产次生代谢物  14-15
    1.5 植物组培技术在药用植物开发中的问题  15-16
  2. 新疆紫草组织培养的研究进展  16-23
    2.1 紫草概述  16-17
    2.2 新疆紫草的形态及药用成分  17
    2.3 新疆紫草的药理研究  17-18
      2.3.1 抗生育作用  18
      2.3.2 抗艾滋病作用  18
      2.3.3 抗肿瘤作用  18
      2.3.4 对循环系统作用  18
      2.3.5 抗炎作用  18
    2.4 新疆紫草愈伤组织的诱导及再分化  18-19
    2.5 新疆紫草培养生产紫草素及其衍生物  19-23
      2.5.1 愈伤组织的固体培养  19-20
      2.5.2 细胞悬浮培养  20-22
        2.5.2.1 理化及营养因子对细胞悬浮培养的影响  20-21
        2.5.2.2 真菌诱导子对细胞悬浮培养影响  21-22
      2.5.3 反应器的发酵培养  22-23
  3. 实验背景、目的及意义  23-25
实验部分  25-52
  一 材料和方法  25-29
    (一) 新疆紫草离体间接器官发生  25-26
      1.1 实验材料  25
      1.2 愈伤组织的诱导和继代  25
      1.3 不同影响因子对于愈伤组织再分化的影响  25-26
    (二) TDZ诱导新疆紫草直接器官发生  26-27
      2.1 实验材料  26-27
      2.2 实验设计  27
    (三) 不定芽的扶壮与快速繁殖  27-28
    (四) 根的诱导与再生植株的移栽  28
    (五) 组织学观察(石蜡切片)  28-29
  二、结果与分析  29-42
    (一) 新疆紫草离体间接器官发生  29-36
      1.1 愈伤组织的诱导  29-31
        1.1.1 基本培养基  29-30
        1.1.2 基本激素  30-31
        1.1.3 外植体  31
      1.2 愈伤组织的继代  31-32
      1.3 愈伤组织的分化  32-36
        1.3.1 两种愈伤组织分化能力的比较  32
        1.3.2 不同细胞分裂素对于愈伤组织分化的影响  32-33
        1.3.3 不同浓度 ABA对于愈伤组织分化能力的影响  33-34
        1.3.4 不同渗透剂对于愈伤组织分化能力的影响  34-35
        1.3.5 乙烯抑制剂对于愈伤组织分化能力的影响  35
        1.3.6 不同继代次数对于愈伤组织分化能力的影响  35-36
    (二) TDZ诱导新疆紫草直接器官发生  36-39
      2.1 胚的萌发与无菌苗的生长  36
      2.2 不同TDZ浓度与外植体类型对再生频率的影响  36-37
      2.3 不同TDZ处理时间对诱导频率的影响  37-38
      2.4 TDZ与其它植物生长调节剂诱导效率的比较  38-39
    (三) 不定芽的扶壮与快速繁殖  39-40
    (四) 根的诱导与再生植株的移栽  40-42
    (五) 组织学观察  42
  三、讨论  42-52
    1. 愈伤组织的诱导与继代  42-44
    2. 愈伤组织的分化  44-46
    3. TDZ诱导新疆紫草直接器官发生  46-49
    4. 不定芽的扶壮与快繁  49-50
    5. 根的诱导与移栽  50-52
图版及说明  52-58
参考文献  58-68
致谢  68-69
攻读学位期间发表的论文  69-70
学位论文评阅及答辩情况表  70

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