学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

几丁质酶和β-1，3-葡聚糖酶基因遗传转化柱花草的研究

作　者: 吴瑞
导　师: 张树珍
学　校: 华南热带农业大学
专　业: 生物化学与分子生物学
关键词: 柱花草几丁质酶基因 β-1、3-葡聚糖酶基因遗传转化
分类号: S541.9
类　型: 硕士论文
年　份: 2005年
下　载: 135次
引　用: 5次
阅　读: 论文下载

内容摘要

柱花草(Stylosanthes spp.)是全球热带地区栽培面积最大、应用最广泛的优良豆科牧草。炭疽病(stylo anthracnose)是严重危害柱花草生产的主要病害。利用植物基因工程技术把外源抗病基因导人优良柱花草品种中使其得到有效的表达,而使柱花草表现出抗病性,对培育柱花草抗病品种具有重要意义。本研究以柱花草为试验材料,通过不同的激素浓度配比对柱花草子叶外植体愈伤组织形成、不定芽分化、芽的伸长和根诱导等的影响进行了研究,建立和优化了柱花草高效再生体系。在此基础上,采用农杆菌介导的遗传转化体系将几丁质酶基因(Chi)和β-1,3-葡聚糖酶基因(Glu)导入柱花草中,通过抗性筛选,获得了30株抗性植株,对其中的8株抗性植株进行PCR检测及Southern blot鉴定,有3株呈阳性反应,结果证明目的基因Chi及Glu已成功整合到柱花草的基因组中。

全文目录

1 前言  7-19
  1.1 植物抗真菌基因工程研究进展  8-16
    1.1.1 几丁质酶基因和β-1，3-葡聚糖酶基因的研究进展  8-14
    1.1.2 植物抗真菌基因工程常用的其他基因的研究进展  14-15
    1.1.3 抗真菌基因工程中存在的问题、解决途径及展望  15-16
  1.2.柱花草研究进展  16-17
    1.2.1 柱花草组织培养研究进展  16-17
    1.2.2 柱花草遗传转化研究进展  17
  1.3 本论文研究的目的、意义  17-18
  1.4 技术路线  18-19
2 材料与方法  19-27
  2.1 材料和试剂  19
    2.1.1 植物材料  19
    2.1.2 菌种  19
    2.1.3 试剂和药品  19
  2.2 植物基因转化  19-27
    2.2.1 柱花草离体再生体系的优化  19-21
    2.2.2 农杆菌遗传转化柱花草  21-22
    2.2.3 转化植株检测  22-27
3 结果与分析  27-34
  3.1 柱花草高效再生体系的优化  27-29
    3.1.1 愈伤组织的诱导  27
    3.1.2 不同激素对不定芽的诱导及芽的伸长的影响  27-28
    3.1.3 生根培养与移栽  28
    3.1.4 柱花草外植体对Kan的抗性试验  28
    3.1.5 影响柱花草再生体系主要因素  28-29
  3.2 农杆菌遗传转化柱花草  29-32
    3.2.1 外植体的预培养  29-30
    3.2.2 共培养时间对转化的影响  30
    3.2.3 农杆菌菌液浓度和侵染时间对转化的影响  30-31
    3.2.4 乙酰丁香酮对根癌农杆菌转化柱花草的影响  31
    3.2.5 Car对农杆菌的抑制效应  31-32
    3.2.6 柱花草转化植株的筛选  32
  3.3 转基因植株的分子检测  32-34
    3.3.1 PCR检测  32-33
    3.3.2 Southern Blot检测  33-34
4 讨论  34-36
  4.1 转基因柱花草发展前景  34-35
  4.2 关于转化体的选择培养  35
  4.3 关于双价表达载体的使用  35-36
  4.4 关于转基因植株的检测  36
5 结论  36-37
参考文献  37-42
缩写词  42-43
附录图版  43-47
致谢  47

几丁质酶和β-1，3-葡聚糖酶基因遗传转化柱花草的研究

内容摘要

全文目录

相似论文