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无纺布菌剂中试生产工艺及应用虫生真菌防治天牛的研究

作　者: 夏成润
导　师: 李增智；樊美珍
学　校: 安徽农业大学
专　业: 森林保护学
关键词: 球孢白僵菌金龟子绿僵菌无纺布菌条短角幽天牛松褐天牛分子标记
分类号: S476.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2005年
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内容摘要

为了更好的应用昆虫病原真菌防治森林害虫,充分发挥其在森林害虫综合治理中的作用,本文研究了真菌杀虫剂的一种新剂型-无纺布菌条制剂的生产及其应用,设计了无纺布菌剂中试生产的流程,并进行了无纺布菌条防治森林蛀干害虫短角幽天牛和松褐天牛的林间应用试验,此外,还通过分子标记的方法对球孢白僵菌进行释放回收研究,以期为林间更合理地应用昆虫病原真菌提供理论依据。设计出工业化生产工艺,使用麸皮煮汁-蔗糖培养基,采用棉麻原料制成的可降解无纺布,在 25℃和 95-100%相对湿度下,球孢白僵菌(Beauveria bassiana)产孢量达3.99亿/cm2,金龟子绿僵菌(Metarhizium anisopliae)产孢量达2.77亿/cm2。通过不同方式应用金龟子绿僵菌无纺布菌剂与引诱剂结合防治短角幽天牛(Spondylis buprestoides)。在诱捕器中接触无纺布菌条的天牛(处理 3)感染率达70.0%;而罩笼试验表明,每 0.67hm260 条(处理 1)无纺布菌条和 90 条菌条(处理 2)的处理中,通过气传分生孢子的扩散所造成的感染率显著高于不处理的对照,均达 35%以上,但二者无显著差异。将各处理诱捕回收的天牛在室内饲养,感染率均显著高于未处理的对照;其中,接触过菌条的处理 3 侵染率达 63.3%,显著高于其它两处理,而处理 1 和处理 2 天牛的感染率分别为 48.7 和 53.1%,无显著差异,结果表明,应用绿僵菌无纺布菌条与引诱剂结合防治短角幽天牛以 0.67hm290条菌条的剂量,可造成天牛 50%以上的感染。应用白僵菌和绿僵菌无纺布菌条防治松褐天牛(Monochamus alternatus),绿僵菌菌条对天牛种群基本上没有影响,侵染率仅 1.9%。相比之下,不管在白僵菌处理区、绿僵菌处理区、两种菌混合处理区还是在对照区,白僵菌对罩笼天牛的侵染率均在 9.3-11.7%之间,差异均不显著。此外,白僵菌处理区与对照区在天牛的林间平均存活期、刻槽数等方面差异也不显著。这表明气体分生孢子对天牛种群影响不大,但影响范围却极大。然而室内试验中,诱自白僵菌处理区的松褐天牛感染率达到 38.1%,显著高于诱自对照的天牛,且天牛的平均存活期也显著降低。这表明,无纺布处理通过接触和气传对天牛种群有显著影响。在应用白僵菌和绿僵菌菌条防治松褐天牛的松林中前后共采集僵虫标本 158号。通过分离鉴定,涉及到的虫生真菌有 3 属 8 种,这些虫生真菌感染多种昆虫,大量僵虫的存在使林间保持一定的带菌量。从种类上看,白僵菌属(Beauveria)和拟青霉属(Paecilomyces)较多,各有 3 种和 4 种,蚧霉属(Lecanicillium)只有 1 种。从数量上来看,白僵菌的数量占绝对优势,为 128 株,占 81.01%,其中球孢白僵菌就有 117 株,占 74.05%;拟青霉次之,为 28 株,占 17.72%;复杂的虫生真菌群落对森林害虫的持续控制起着重要的作用。在 106 株球孢白僵菌中,以 rDNA I 型内含子组合(I1,I2,I3,I4)类型作为菌株的分子标记,共计有 10 种类型,其中与所释放菌株的类型相同的菌株占优势,

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中文摘要  5-7
英文摘要  7-9
综述  9-15
第一章引言  15-17
第二章材料与方法  17-29
第三章结果与分析  29-47
  1. 无纺布菌剂的中试生产  29-32
    1.1 可降解的无纺布的筛选结果  29-30
      1.1.1 水解试验  29
      1.1.2 灭菌处理  29
      1.1.3 产孢试验  29-30
    1.2 无纺布菌条的生产流程  30-31
    1.3 无纺布菌条的质量检验  31-32
      1.3.1 无纺布菌条含孢量及活孢率的测定  31
      1.3.2 绿僵菌无纺布菌条含孢量及活孢率的测定  31
      1.3.3 无纺布菌条含水率的测定  31-32
  2. 应用绿僵菌无纺布菌剂防治短角幽天牛  32-34
    2.1 林间天牛的引诱情况  32
    2.2 防治效果的评估  32-34
      2.2.1 短角幽天牛的林间罩笼放养  32-33
      2.2.2 诱捕回收的短角幽天牛在室内的饲养  33
      2.2.3 空气中绿僵菌动态监测  33-34
      2.2.4 绿僵菌对短角幽天牛的可持续防治效果检测  34
  3. 应用白僵菌和绿僵菌无纺布菌条防治松褐天牛的试验  34-41
    3.1 黄山白亭松褐天牛引诱情况  34-35
    3.2 林间各处理区罩笼饲养天牛的比较  35-37
      3.2.1 林间各处理松褐天牛的累积死亡率  35-36
      3.2.2 林间各处理对松褐天牛成感染率影响  36
      3.2.3 林间不同处理对松褐天牛产卵刻槽数及平均寿命的影响  36-37
    3.3 林间各处理区诱集松褐天牛成虫室内饲养观察试验  37-38
    3.4 空气中白僵菌动态监测  38
    3.5 土壤中白僵菌动态监测  38-39
    3.6 虫生真菌调查  39-41
      3.6.1 虫生真菌种类与数量  39-40
      3.6.2 不同虫生真菌的寄主多样性分析  40-41
  4. 球孢白僵菌的释放回收研究  41-47
    4.1 球孢白僵菌的分子标记  41-43
      4.1.1 分子标记的结果  41-42
      4.1.2 球孢白僵菌的释放回收分析  42-43
    4.2 林间僵虫上球孢白僵菌菌体的酯酶同工酶的确定  43-47
      4.2.1 不同菌株的酯酶同工酶图谱  43-44
      4.2.2 供试菌株酯酶型的划分  44-47
第四章结论  47-50
第五章讨论  50-51
参考文献  51-56
致谢  56-57
作者简介  57
在读期间发表的学术论文目录  57

无纺布菌剂中试生产工艺及应用虫生真菌防治天牛的研究

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