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金钗石斛水提物对糖尿病大鼠肾脏非酶糖基化和氧化应激的影响

作　者: 陶凤
导　师: 唐彦萍
学　校: 遵义医学院
专　业: 生物化学与分子生物学
关键词: 金钗石解糖尿病 AGEs RAGE 氧化应激
分类号: R285.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 71次
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内容摘要

目的：观察金钗石斛(Dendrobium Nobile Lindl,DNL)对糖尿病(Diabetcs Mellitus, DM)大鼠肾脏非酶糖基化和氧化应激的影响,探讨DNL对糖尿病大鼠肾脏的保护作用。方法：用链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)诱导DM大鼠模型。将DM大鼠随机分为DM模型组、DNL低、中、高剂量组和氨基胍(Aminoguanidine,AG)组,另设一正常对照组。DM模型组和正常组给予等量的蒸馏水,给药时间12周。分别检测：体重、尿量、饮水量、食物摄入量、肾脏指数、24h尿白蛋白、血糖、糖化血红蛋白,血清尿素、肌酐、糖基化终末产物(Advanced glycation end products,AGEs),尿肌酐,肾组织AGEs、总超氧化物歧化酶(Total superoxide dismutase,T-SOD)、丙二醛(Malondialdehyde,MDA)含量。用光学显微镜观察PAS染色情况和透射电镜观察肾组织超微结构变化。实时荧光定量PCR检测糖基化终末产物受体(Receptor for advanced glycation end products,RAGE) mRNA表达。用Western blot技术检测RAGE蛋白表达。结果：成功建立DM大鼠模型。DNL中高剂量明显降低血糖和糖化血红蛋白水平(p<0.05)。与正常大鼠相比,DM大鼠血尿素(p<0.001)、24h尿白蛋白水平明显增加(p<0.001)、肌酐清除率明显降低(p<0.001)；而DNL明显降低DM大鼠血尿素水平(p<0.05)、24h尿白蛋白水平(p<0.05)、增加DM大鼠肌酐清除率(p<0.05)。与正常大鼠相比,糖尿病大鼠血清及肾组织AGEs (p< 0.001)肾组织MDA含量明显增加(p<0.001),T-SOD活性明显降低(p<0.001)。DNL明显降低血清及肾组织AGEs水平,并呈剂量依赖关系；明显增强DM大鼠肾组织T-SOD活性(p<0.05)、降低MDA水平(p<0.001)。DM大鼠肾脏指数与正常大鼠相比明显增加(p<0.001),DNL明显降低DM大鼠肾脏指数(p<0.05)。光镜观察PAS染色和透射电镜扫描发现糖尿病大鼠系膜明显扩张、基底膜明显增厚,DNL和AG都减轻了系膜的扩张和基底膜的增厚。实时荧光定量PCR和Western blot结果显示DNL及AG都明显下调RAGE mRNA及蛋白的表达。结论：金钗石斛具有降低血糖、抑制AGEs的形成、下调RAGE mRNA及蛋白的表达、抑制氧化应激的作用,从而延缓糖尿病肾病的发生发展。

金钗石斛水提物对糖尿病大鼠肾脏非酶糖基化和氧化应激的影响

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