学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

黄连素对CA诱导的tau蛋白过度磷酸化的保护作用及其机制

作　者: 余光
导　师: 王小川
学　校: 华中科技大学
专　业: 病理学与病理生理学
关键词: 黄连素 tau蛋白过度磷酸化阿尔茨海默病 GSK-3β PP-2Ac
分类号: R285
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
下　载: 61次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载

内容摘要

黄连素,又称小檗碱(Berberine,BR),是从中草药黄连等植物中提取分离得到的一类异喹啉类生物碱,属季铵类化合物。近年来,有研究表明,盐酸小檗碱1.在增加IL-1β和诱生型一氧化氮合酶的表达的同时能改善阿尔茨海默病(Alzheimer disease, AD)模型大鼠的空间记忆损伤;2.通过改变阿尔茨海默病淀粉样前蛋白的加工过程减少Aβ的分泌;3.通过减少海马神经元细胞内游离的钙离子来保护Aβ诱导的神经元凋亡;4.具有抗乙酰胆碱酯酶的活性而成为治疗阿尔茨海默病的一种潜力药物。由异常过度磷酸化tau蛋白构成的神经原纤维缠结(neurofibrillary tangles, NFTs)含量与AD患者的临床痴呆程度呈正相关,提示tau蛋白过度磷酸化促NFT形成在AD发病中起关键作用。而受累神经元内蛋白激酶/蛋白磷酸酯酶动态平衡失调是导致tau异常过度磷酸化的主要生化机制。同时亦有报道:小檗碱可影响人类结直肠癌细胞(HCT-116 cells) GSK-3β的活性,而后者是AD发病中起重要作用的一种蛋白激酶。但迄今为止,尚无直接证据表明小檗碱影响AD动物模型亦或是AD患者脑内蛋白激酶/蛋白磷酸酯酶的活性,进而影响tau的磷酸化程度。为此,本文的探讨了小檗碱对花萼海绵诱癌素(Calyculin A,CA)在人胚肾转tau细胞(HEK293/tau)诱导的神经细丝过度磷酸化中的影响及其相关酶活性的变化。采用CCK-8测定细胞活力来确定药物作用浓度;并用显微镜成像和hoechst观察给药前后的细胞状态及凋亡情况。通过免疫印迹技术和细胞免疫化学测定tau蛋白的磷酸化程度及相关酶的活性。结果显示:2.5nM CA作用12小时可以使tau蛋白在ser198/199/202、ser396/404位点的磷酸化程度明显增高,并且GSK-3β活性明显增加, PP-2A活性明显下降。经过24小时浓度为20mg/ml的黄连素治疗,这些位点的过度磷酸化有明显降低,研究其作用机制发现GSK-3β在Tyr216位点磷酸化程度明显下降,表明GSK-3β活性下降;同时PP-2Ac在Y307位点磷酸化下降,表明PP-2A活性上升。结论:黄连素(小檗碱)可能通过降低GSK-3β的活性,升高PP-2A的活性来降低tau蛋白过度磷酸化程度,提示其成可能成为治疗阿尔茨海默病的一种潜在药物。

全文目录

中文摘要  5-7
英文摘要  7-9
前言  9-12
材料和方法  12-20
结果  20-29
讨论  29-31
结论  31-32
参考文献  32-37
综述  37-51
  参考文献  44-51
致谢  51

黄连素对CA诱导的tau蛋白过度磷酸化的保护作用及其机制

内容摘要

全文目录

相似论文