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青蒿琥酯对人胚肺成纤维细胞增殖、凋亡及胶原合成的影响
作 者: 张孝飞
导 师: 王昌明
学 校: 桂林医学院
专 业: 内科学
关键词: 青蒿琥酯 胚肺成纤维细胞 前胶原 凋亡 Bcl-2 mRNA BaxmRNA Survivin mRNA RT-PCR
分类号: R285
类 型: 硕士论文
年 份: 2010年
下 载: 27次
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内容摘要
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目的观察青蒿琥酯对体外培养的人胚肺成纤维细胞(HFL-I)增殖及凋亡影响及机制,观察青蒿琥酯对体外培养的人胚肺成纤维细胞胶原合成影响及机制。方法用0、1、10、100mg/L浓度的青蒿琥酯作用于体外培养的人胚肺成纤维细胞,定时用CCK-8法检测细胞增殖情况,用Hochst33258染色从形态学上观察细胞凋亡,流式细胞仪检测细胞周期及凋亡率;取对数生长期人胚肺成纤维细胞(HELF)系HFL-I细胞株,随机分为观察1~3组及对照组,前三组分别加入浓度为1、10、100mg/L的青蒿琥酯,对照组加入等体积培养液后继续培养24h后,收集细胞提取总RNA,RT-PCR法测定Bcl-2mRNA、Bax mRNA和Survivin mRNA的表达;用0、1、10、100mg·/L浓度的青蒿琥酯作用于体外培养的人胚肺成纤维细胞,用天狼猩红染色法检测胶原蛋白的合成,用RT-PCR法测定细胞I型和III型前胶原蛋白mRNA的表达。结果青蒿琥酯呈剂量和时间依赖性抑制HFL-I细胞的增殖(P<0. 05),流式细胞仪检测结果显示,HFL-I细胞G0/G1期细胞百分比逐渐上升,S期细胞百分比逐渐下降,说明细胞阻滞于G0/G1期,G2/M期百分比上升,细胞凋亡率增加;Bcl-2 mRNA及Survivin mRNA的表达显著低于对照组,Bax mRNA的表达显著高于对照组;青蒿琥酯呈剂量依赖性降低胶原的生成(P<0. 05),I型和III型前胶原蛋白mRNA的表达显著低于对照组。结论青蒿琥酯可抑制人胚肺成纤维细胞的增殖,促进其凋亡,可能机制为通过下调Bcl-2 mRNA和Survivin mRNA表达,上调Bax mRNA表达抑制HFL-I细胞增殖、促进HFL-I细胞凋亡。蒿琥酯可在一定程度上降低胶原的分泌,其机制可能通过下调I型和III型前胶原蛋白mRNA的表达从而降低胶原的生成;表明青蒿琥酯有可能用于肺纤维化的防治。
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全文目录
中文摘要 5-7 ABSTRACT 7-9 符号说明 9-10 前言 10-12 青蒿琥酯对人胚肺成纤维细胞增殖、凋亡及胶原合成的影响 12-29 1 青蒿琥酯对人胚肺成纤维细胞增殖及凋亡的影响 12-18 1.1 材料与方法 12-14 1.2 实验结果 14-17 1.3 讨论 17 1.4 结论 17-18 2 青蒿琥酯对人胚肺成纤维细胞凋亡机制的探讨 18-24 2.1 材料与方法 18-20 2.2 实验结果 20-21 2.3 讨论 21-23 2.4 结论 23-24 3 青蒿琥酯对人胚肺成纤维细胞胶原合成的影响 24-29 3.1 材料与方法 24-25 3.2 实验结果 25-27 3.3 讨论 27-28 3.4 结论 28-29 参考文献 29-32 附录 32-33 综述 青蒿素类药物在肺部疾病的研究现状及展望 33-47 综述参考文献 42-47 攻读学位期间发表的学术论文目录 47-48 致谢 48
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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药药理学
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