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不动杆菌临床分离株耐药性及相关基因研究

作　者: 王秋实
导　师: 刘玉村；李彤
学　校: 北京大学
专　业: 外科学
关键词: 不动杆菌耐药性耐药相关基因水平基因转移
分类号: R450
类　型: 硕士论文
年　份: 2008年
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内容摘要

【目的】探索不动杆菌耐药性分子机制,为控制不动杆菌相关感染提供依据。【内容】研究北京大学第一医院不动杆菌临床分离株的耐药表型与耐药性相关基因及其相关性,并初步研究耐药相关基因的稳定性和水平基因转移。【方法】用琼脂稀释法和E-test法测定抗菌药物对不动杆菌的最低抑菌浓度(MIC),用聚合酶链反应(PCR)的方法检测耐药相关基因(aacC1、aacC2、aacA4、OXA-23、PER-1、AmpC、Int1和Int2),用序列分析的方法分析PCR扩增阳性的基因序列,对同一克隆株来源的不动杆菌进行多代传递培养,检测传代后的耐药相关基因的稳定性,通过全细胞接触HGT实验和转化实验检测HGT。【结果】我院不动杆菌临床分离株多重耐药性显著,检出5种耐药相关基因(aacC1、aacA4、PER-1、AmpC和Int1),其中aacC1、AmpC和Int1与耐药性密切相关,PCR阳性产物经测序证实与GenBank相应序列同源性均在98%以上,传代后菌株的部分耐药基因丢失,HGT初步实验获得转化接合子和转化子。【结论】不动杆菌多重耐药性严重,多重耐药菌株携带多重耐药基因,耐药相关基因同源性高,提示耐药相关基因有可能从其他菌株或菌种通过HGT而获得。不动杆菌对β内酰胺类及氨基糖苷类抗生素的耐药性分别与AmpC及aacC1基因的存在密切相关。整合酶基因Int1在多重耐药菌中高度流行,致使多重耐药性转移和耐药菌在临床迅速播散。耐药基因存在不稳定现象,整合酶基因Int1稳定性较高,对Int1基因的检测有可能评估及预测细菌多重耐药性的发展。HGT实验研究的初步结果显示不动杆菌可以发生HGT,控制耐药基因HGT的发生是筛选新型抗生素的一个新思路,有待深入研究。

全文目录

中文摘要  4-5
英文摘要  5-7
英文缩略语表  7-8
引言  8-9
第一部分不动杆菌临床分离株耐药表型研究  9-15
  材料与方法  9-10
  结果  10-13
  讨论  13-15
第二部分不动杆菌临床分离株耐药性相关基因研究  15-23
  材料与方法  15-17
  结果  17-20
  讨论  20-23
第三部分不动杆菌耐药性相关基因稳定性研究  23-30
  研究对象与方法  23
  结果  23-27
  讨论  27-30
第四部分不动杆菌水平基因转移研究  30-37
  实验材料与方法  30-33
  结果  33-35
  讨论  35-37
结论  37-38
参考文献  38-41
文献综述  41-50
致谢  50-52
个人简历  52

不动杆菌临床分离株耐药性及相关基因研究

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