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施用中度嗜盐菌盐碱地棉田细菌群落结构研究

作　者: 张桂玲
导　师: 胡文革
学　校: 石河子大学
专　业: 生物化学与分子生物学
关键词: Bacillus sp.XJ1-05 培养条件微生物群落结构棉田土壤 SSCP
分类号: S154.3
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
下　载: 53次
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内容摘要

本试验以一株从新疆艾比湖分离的中度嗜盐菌Bacillus sp.XJ1-05为材料,采用摇瓶培养方式,利用单因素和正交试验相结合的方法,研究了该菌株的生长特点和最佳培养条件。在此基础上,首次将该菌株施用于轻度盐碱化棉花地中,研究棉花生长不同时期及同一时期内各个垂直土层间土壤中可培养细菌、放线菌、真菌数量及区系变化。并利用PCR-SSCP方法研究土壤中不可培养细菌的群落结构变化。以期为盐碱土的改良寻找一种新的有效方式,也为新疆盐碱地棉田微生物群落多样性研究奠定基础。试验结果表明：1)Bacillus sp.XJ1-05菌在生长36h后进入稳定期。当培养基中添加的酵母粉为12g/L,(NH4)2SO4为5g/L, NaCl为7%时,菌体生长状况最好。适用于该菌株大量培养的最佳摇瓶培养条件是pH9.0、41℃、转速220rpm、接种量1%。∞施用Bacillus sp.XJ1-05在短时间内可以增加土壤中细菌和真菌数量,而随着时间的延长,这种趋势就不再明显。放线菌的变化趋势与之相反,在施菌相当长的一段时间以后,土壤放线菌数量才开始增加。本试验棉田为中性偏碱土壤,施用Bacillus sp.XJ1-05稀释菌液,土壤真菌、细菌数量增加,预示着土壤碱性状况得到一定程度的缓解。3)SSCP结果表明,施用嗜盐菌可以增加5-25cm土层中细菌群落多样性,对25-35cm的深层土壤中细菌群落基本的没有影响。总体来看,施用嗜盐菌后棉田土壤主要细菌类群变化不大,群落结构稳定。

全文目录

摘要  5-6
Abstract  6-7
目录  7-9
英文缩略词表  9-10
引言  10-11
第一章文献综述  11-20
  1.1 新疆地区土壤盐渍化现状及改良措施  11-13
    1.1.1 新疆地区土壤盐渍化现状  11
    1.1.2 盐渍化土壤的改良措施及改良技术的发展  11-13
  1.2 微生物菌剂在环境修复和土壤改良中的应用  13-15
    1.2.1 常用微生物菌剂的特点和种类  13
    1.2.2 常用微生物菌剂在环境修复和农业生产中的应用研究现状  13-14
    1.2.3 嗜盐菌在环境修复和农业生产中的应用  14-15
  1.3 土壤微生物群落结构与多样性  15-17
    1.3.1 土壤微生物群落结构与多样性研究方法  15-16
    1.3.2 SSCP方法在土壤微生物多样性中的研究进展  16-17
  1.4 棉田土壤生态系统特征及土壤微生物研究现状  17-18
  1.5 本课题研究的目的与意义  18-20
第二章中度嗜盐菌最佳培养条件的优化  20-31
  前言  20
  2.1 材料与方法  20-23
    2.1.1 材料  20-21
    2.1.2 方法  21-23
  2.2 结果与分析  23-29
    2.2.1 菌体生长曲线的测定  23-25
    2.2.2 最佳碳源和氮源的初步筛选  25-26
    2.2.3 最优培养配方组合试验  26-27
    2.2.4 最佳培养条件确定  27-29
  2.3 讨论  29-31
    2.3.1 Bacillus sp.XJ1-05菌体生长繁殖规律  29
    2.3.2 最佳碳源和最佳氮源的优化  29
    2.3.3 最适生长条件的确定  29-31
第三章施用中度嗜盐菌后棉花不同生长时期土壤微生物的区系变化  31-52
  前言  31
  3.1 材料与方法  31-34
    3.1.1 材料  31-33
    3.1.2 方法  33-34
    3.1.3 数据统计分析  34
  3.2 结果与分析  34-50
    3.2.1 棉花不同生长期土壤理化性质分析  34-38
    3.2.2 施用Bacillus sp.XJ1-05菌棉花各生长时期不同土层微生物数量分析  38-49
    3.2.3 三类微生物数量与土壤基本理化性质的相关性分析  49-50
  3.3 讨论  50-52
    3.3.1 施用Bacillus sp.XJ1-05菌对棉田细菌区系分布的影响  50
    3.3.2 施用Bacillus sp.XJ1-05菌对棉田放线菌区系分布的影响  50
    3.3.3 施用Bacillus sp.XJ1-05菌对棉田真菌区系分布的影响  50
    3.3.4 土壤微生物数量与土壤理化性质的相关性  50-52
第四章:施用中度嗜盐菌后棉花不同生长时期土壤细菌16SrDNA的SSCP分析  52-64
  前言  52
  4.1 材料与方法  52-56
    4.1.1 材料  52-53
    4.1.2 方法  53-56
  4.2 结果与分析  56-62
    4.2.1 土壤样品DNA的提取结果  56
    4.2.2 细菌16SrDNA的PCR扩增  56-57
    4.2.3 V3区的PCR扩增  57-58
    4.2.4 未施菌处理棉花不同生长期土壤细菌SSCP分析  58-60
    4.2.5 施用Bacillus sp.XJ1-05菌棉花苗期不同土层细菌SSCP图谱分析  60-62
  4.3 讨论  62-64
全文总结  64-65
参考文献  65-71
附录一:主要试剂的配置  71-73
附录二:试验中所用主要仪器  73-74
致谢  74-75
作者简介  75-76
导师评阅表  76

施用中度嗜盐菌盐碱地棉田细菌群落结构研究

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