学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

角毛壳菌抗药性基因转化子的研究

作　者: 蒋倩倩
导　师: 杨谦
学　校: 哈尔滨工业大学
专　业: 遗传学
关键词: 转化子多菌灵拮抗作用细胞壁降解酶
分类号: S476
类　型: 硕士论文
年　份: 2007年
下　载: 28次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载

内容摘要

本实验以角毛壳菌(Chaetomium cupreum)及其抗药性基因转化子C1、C2为实验材料,对角毛壳菌(C. cupreum)抗药性基因转化子从生理特性、培养特性、生物防治特性、产细胞壁降解酶特性四方面进行研究,为转化子的发酵生产与田间应用提供了科学的理论依据。对角毛壳菌(C. cupreum)转化子生物学特性的研究表明:转化子C1、C2对多菌灵的抗性可达到40~50μg/mL,这比野生型菌株提高了70~80倍。而转化子在菌落形态、生长速度、菌丝形态上与野生型菌株发生了较大的改变,主要表现在菌落颜色变深、生长速度减慢、菌丝间隔变大、子囊壳颜色变深等方面。通过改变不同的培养条件观察转化子的生长状态可知:PSA培养基和基本培养基对转化子的菌落生长和产子囊孢子最为有利,其次为PDA培养基,而查氏培养基最不利于转化子的生长;转化子的最适生长pH值为pH 5.5~7,温度为25℃;转化子可以很好的利用半乳糖、蔗糖、果糖为碳源,利用蛋白胨、牛肉浸膏为氮源,而麦芽糖、乳糖、脲素对转化子的生长不利。对转化子室内拮抗作用的研究表明:转化子C1、C2对立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)、杨树叶枯病菌(Aftrnaria alternata)、核盘菌( Sclerotinia sclrotiorum)的拮抗作用没有发生改变,对尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)的拮抗作用与野生型菌株相比有所下降,而角毛壳菌(C. cupreum)及其转化子对大豆疫霉菌(Phytophthora sojae)的拮抗效果都不是很理想。对转化子产细胞壁降解酶的研究发现:角毛壳菌(C. cupreum)及其转化子在5种病原菌细胞壁的诱导下都可以产生β-1,3-葡聚糖酶和几丁质酶,其中以杨树叶枯病菌(A. alternata)和立枯丝核菌(R. solani)细胞壁为诱导物产酶的效果最好。C1、C2与野生型角毛壳菌(C. cupreum)的产酶特性基本相同,只是在产酶时间上比野生型延迟2~3 d。通过与室内拮抗作用结果相联系发现角毛壳菌(C. cupreum)和转化子产细胞壁降解酶的活性的高低与它们对病原菌的拮抗作用有关,说明细胞壁降解酶在对病原菌的拮抗作用中起关键作用。综合四方面的研究可以看出:转化子C1、C2是优良的生物防治菌,不仅自身对植物病原菌显示出良好的拮抗作用,更重要的是它们可以和低剂量的化学农药共同使用,建立起化学防治和生物防治共同作用的综合防治体系,以提高对植物病害的防治效率。

全文目录

摘要  4-6
Abstract  6-11
第1章绪论  11-27
  1.1 课题背景  11-12
  1.2 国内外研究进展  12-25
    1.2.1 微生物农药的研究现状及分析  12-13
    1.2.2 抗药性菌株的研究进展  13-16
    1.2.3 生物防治菌的防治机理研究进展  16-19
    1.2.4 β-1,3-葡聚糖酶的研究进展  19-20
    1.2.5 几丁质酶的研究进展  20-22
    1.2.6 毛壳菌的研究进展  22-25
  1.3 本课题的研究内容  25-27
    1.3.1 实验的主要内容  25
    1.3.2 研究的目的意义  25-26
    1.3.3 实验的基本技术路线  26-27
第2章实验材料和方法  27-33
  2.1 实验材料  27-29
    2.1.1 菌株  27
    2.1.2 培养基  27-28
    2.1.3 实验试剂  28
    2.1.4 主要仪器  28-29
  2.2 实验方法  29-33
    2.2.1 角毛壳菌多菌灵敏感性的测定  29
    2.2.2 角毛壳菌转化子多菌灵敏感性的测定  29
    2.2.3 角毛壳菌转化子抗性稳定性测定  29
    2.2.4 角毛壳菌转化子生长特性的研究  29-30
    2.2.5 角毛壳菌转化子培养特性的研究  30
    2.2.6 角毛壳菌转化子对病原菌室内拮抗效果的研究  30-31
    2.2.7 角毛壳菌转化子产细胞壁降解酶的研究  31-33
第3章角毛壳菌转化子生物学特性研究  33-43
  3.1 实验结果  33-41
    3.1.1 角毛壳菌对多菌灵的敏感性测定  33-34
    3.1.2 角毛壳菌转化子对多菌灵敏感性测定  34-35
    3.1.3 角毛壳菌转化子生理特性的研究  35-36
    3.1.4 培养基对转化子生长的影响  36-37
    3.1.5 温度对转化子生长的影响  37-38
    3.1.6 pH值对转化子生长的影响  38-39
    3.1.7 碳源对转化子生长的影响  39-40
    3.1.8 氮源对转化子生长的影响  40-41
  3.2 本章小结  41-43
第4章角毛壳菌及转化子对病原菌的室内拮抗实验  43-57
  4.1 角毛壳菌及转化子对立枯丝核菌的室内拮抗实验  43-46
    4.1.1 角毛壳菌对立枯丝核菌的室内拮抗实验  43-44
    4.1.2 转化子C1 对立枯丝核菌的室内拮抗实验  44
    4.1.3 转化子C2 对立枯丝核菌的室内拮抗实验  44-45
    4.1.4 角毛壳菌及转化子对立枯丝核菌的拮抗效果比较  45-46
  4.2 角毛壳菌及转化子对杨树叶枯病菌的室内拮抗实验  46-48
    4.2.1 角毛壳菌对杨树叶枯病菌的室内拮抗实验  46
    4.2.2 转化子C1 对杨树叶枯病菌的室内拮抗实验  46-47
    4.2.3 转化子C2 对杨树叶枯病菌的室内拮抗实验  47-48
    4.2.4 角毛壳菌及转化子对杨树叶枯病菌的拮抗效果比较  48
  4.3 角毛壳菌及转化子对尖孢镰刀菌的室内拮抗实验  48-51
    4.3.1 角毛壳菌对尖孢镰刀菌的室内拮抗实验  48-49
    4.3.2 转化子C1 对尖孢镰刀菌的室内拮抗实验  49-50
    4.3.3 转化子C2 对尖孢镰刀菌的室内拮抗实验  50
    4.3.4 角毛壳菌及转化子对尖孢镰刀菌的拮抗效果比较  50-51
  4.4 角毛壳菌及转化子对核盘菌的室内拮抗实验  51-53
    4.4.1 角毛壳菌对核盘菌的室内拮抗实验  51
    4.4.2 转化子C1 对核盘菌的室内拮抗实验  51-52
    4.4.3 转化子C2 对核盘菌的室内拮抗实验  52-53
    4.4.4 角毛壳菌及转化子对核盘菌的拮抗效果比较  53
  4.5 角毛壳菌及转化子对大豆疫霉菌室内拮抗实验  53-56
    4.5.1 角毛壳菌对大豆疫霉菌的室内拮抗实验  53-54
    4.5.2 转化子C1 对大豆疫霉菌的室内拮抗实验  54-55
    4.5.3 转化子C2 对大豆疫霉菌的室内拮抗实验  55
    4.5.4 角毛壳菌及转化子对大豆疫霉菌的拮抗效果比较  55-56
  4.6 本章小结  56-57
第5章角毛壳菌及转化子产细胞壁降解酶的研究  57-67
  5.1 病原菌细胞壁对转化子产β-1,3-葡聚糖酶的影响  57-61
    5.1.1 立枯丝核菌细胞壁诱导产β-1,3-葡聚糖酶  57-58
    5.1.2 杨树叶枯病菌细胞壁诱导产β-1,3-葡聚糖酶  58-59
    5.1.3 尖孢镰刀菌细胞壁诱导产β-1,3-葡聚糖酶  59
    5.1.4 核盘菌细胞壁诱导产β-1,3-葡聚糖酶  59-60
    5.1.5 大豆疫霉菌细胞壁诱导产β-1,3-葡聚糖酶  60-61
  5.2 病原菌细胞壁对转化子产几丁质酶的影响  61-65
    5.2.1 立枯丝核菌细胞壁诱导产几丁质酶  61-62
    5.2.2 杨树叶枯病菌细胞壁诱导产几丁质酶  62-63
    5.2.3 尖孢镰刀菌细胞壁诱导产几丁质酶  63-64
    5.2.4 核盘菌细胞壁诱导产几丁质酶  64
    5.2.5 大豆疫霉菌细胞壁诱导产几丁质酶  64-65
  5.3 本章小结  65-67
结论  67-68
参考文献  68-74
附录  74-79
致谢  79

角毛壳菌抗药性基因转化子的研究

内容摘要

全文目录

相似论文