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高内切葡聚糖酶活嗜热侧孢霉突变菌株的筛选

作　者: 许燕
导　师: 张木清
学　校: 福建农林大学
专　业: 生物化学与分子生物学
关键词: 嗜热侧孢霉 羧甲基纤维素钠-刚果红 内切葡聚糖酶 复合诱变
分类号: Q93
类　型: 硕士论文
年　份: 2008年
下　载: 21次
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内容摘要


作为一种新能源,燃料乙醇的开发、应用对缓解能源危机及改善环境污染状况都具有重大意义。从降低燃料乙醇的生产成本角度考虑,利用纤维素类物质作原料,无疑是最佳选择。因此,获得高效的纤维素降解菌株是该项技术应用的关键。嗜热侧孢霉（Sporotrichum thermophile）是一种嗜热丝状真菌,具有分解纤维素的特性。固体PDA培养条件下进行形态观察,表明,所采用的嗜热侧孢霉菌株,菌丝丛枝状、有隔,分生孢子浅褐色,顶生或侧生。利用ITS序列进行分子分类发现嗜热侧孢霉与嗜热革节孢（Scytalidiumthermophilium）及特异腐质霉（Humicola insolens）2种嗜热菌相距最近。以还原糖含量变化和蔗渣减少量为指标,以蔗渣为唯一碳源进行液体发酵,表明在蔗渣30g/L,NH4NO3 11.45 g/L,初始pH值4.0,接种量15%（孢子悬液浓度106个/mL）条件下,蔗渣降解效果好。以嗜热侧孢霉ATCC 36347菌株为出发菌株,经紫外、亚硝酸复合诱变后利用羧甲基纤维素钠-刚果红培养基进行筛选,得到12株透明圈较大的菌株。根据透明圈直径与菌落直径的比值代表酶活力的大小,经过方差分析,初步判定66-22号菌株的内切葡聚糖酶活力最高。66-22菌株的最优培养条件为:45℃,NH4NO3 1.5g/L,初始pH值6.0。且在上述条件下,其内切葡聚糖酶活力在2天和3天时达到最高,4天时开始降低,2天和3天时的酶活力差异不明显。分别在各自的最佳培养条件下培养,在2d和3d时,66-22号菌株的酶活力分别为嗜热侧孢霉ATCC 36347的1.19倍和1.29倍。

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中图分类: > 生物科学 > 微生物学
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