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人KCTD10基因启动子及其调控研究

作　者: 周爱冬
导　师: 张健；周建林
学　校: 湖南师范大学
专　业: 生物化学及分子生物学
关键词: KCTD10基因启动子转录调控 Sp1 AP-2
分类号: Q987
类　型: 硕士论文
年　份: 2006年
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内容摘要

KCTD10(potassium channel tetramerisation domain-containing 10)基因是PDIP1(polymerase delta-interacting protein 1)基因家族的一员。近来的研究表明，小鼠KCTD10基因受肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导，并能与DNA聚合酶δ小亚基p50以及PCNA(proliferation cell nuclear antigen)相互作用，因此很可能参与DNA复制、DNA修复、细胞凋亡以及细胞周期的控制过程等。本实验中，我们克隆了人KCTD10基因启动子区段639 bp的DNA序列，并对启动子和其调控机制进行了研究。引物延伸实验表明人KCTD10基因的转录起始位点为A，位于翻译起始位点上游63 bp处。通过计算机辅助分析，我们发现人KCTD10基因的启动子区段缺乏TATA框或CAAT框，相反，在转录起始位点(TSS)周围贯穿整个639 bp片段有一CpG岛存在。为了证明基本启动子所在的DNA区域，我们分别构建了一系列缺失突变体，荧光素酶报告基因的活性分析表明从-108到+30区域对基本启动子活性是必需的。此外，我们在人KCTD10基因的基本启动子区发现许多潜在的转录因子结合位点，并通过实验证明Sp1和AP-2能特异地结合人KCTD10基因启动子，且在启动子的调控中发挥了重要的作用，其中Sp1能激活KCTD10启动子活性，而AP-2则压制KCTD10基因的表达。

人KCTD10基因启动子及其调控研究

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