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梨树花枯病病原及其相关病原细菌研究

作　者: 邱文
导　师: 谢关林
学　校: 浙江大学
专　业: 植物病理学
关键词: 梨花枯芽枯嫩枝枯黑锈水症状鉴别表型鉴定 16S rDNA FAMEs
分类号: S436.612
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
下　载: 75次
引　用: 1次
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内容摘要

我国是世界第一产梨大国,中国梨在世界梨产业发展中有举足轻重的位置。2006年浙江省两个梨园的梨树上出现花枯和芽枯,但没有梨火疫病的“牧羊鞭”症状。为明确从浙江梨树花枯芽枯病样中分离的细菌属于哪种病原,以便开展有效的病害治理。分离16份梨树花枯芽枯样本,其中6株代表性致病细菌经菌落形态、主要细菌学特征、致病性、电镜观察、Biolog鉴定、脂肪酸分析(FAMEs)、16S rDNA和ITS序列分析并与3株丁香假单胞丁香致病变种标准菌株和1株番茄青枯病标准菌株比较,证实了浙江省梨树花枯芽枯病由Pseudomonas syringae pv. syringae引起。为明确同时伴随梨花枯和芽枯的叶片、嫩枝黑色枯萎症状是由哪种病原引起。从病部分离到4株阳性细菌,综合致病性、生理生化、碳源利用、FAMEs、16S rRNA序列比较等方法的鉴定结果,证实梨树叶片、嫩枝枯黑由Bacillus spp.引起。为探索梨树锈水病的病原,从病部分离到3株阴性细菌,经形态学观察、Koch氏法则、Biolog、FAMEs、16S rDNA序列分析并与2个菊欧文氏菌标准菌株、2个标准油菜黄单胞一品红致病变种菌株、2个丁香假单胞丁香致病变种标准菌株比较,认为Dickeya chrysanthemi是浙江梨锈水病的潜在病原。

全文目录

致谢  5-6
摘要  6-7
Abstract  7-11
第一章文献综述  11-24
  1 梨的研究概况  11-16
    1.1 梨的分布  11
    1.2 梨的经济意义&药用价值  11
    1.3 砂梨  11-12
    1.4 梨树细菌病害的发生与分布  12-13
    1.5 梨树嫩枝枯黑病  13-14
    1.6 梨树锈水病  14-16
  2 植物病原细菌鉴定技术的研究进展  16-22
    2.1 过敏性反应的测定  16
    2.2 寄主致病性测定  16-17
    2.3 形态学观察等初步鉴定  17
    2.4 生理生化实验  17-19
    2.5 Biolog微生物自动分析系统  19
    2.6 脂肪酸甲酯(Fatty Acid Methyl Ester,FAMEs)谱图分析法  19-20
    2.7 序列分析法  20-21
    2.8 防治措施  21-22
  3 本论文的研究目的和意义  22-24
第二章梨树花枯和芽枯病及相关病原细菌的鉴定  24-34
  1 实验材料  24-26
    1.1 标准菌株  24
    1.2 梨树品种  24
    1.3 主要培养基  24-25
    1.4 主要试剂、酶和缓冲液  25-26
    1.5 主要仪器  26
  2 实验方法  26-34
    2.1 样本采集与病原细菌分离  26
    2.2 病原菌的常规鉴定及Kock氏病原假说测定  26-28
    2.3 生理生化实验  28-30
    2.4 病原菌的电镜观察  30-31
    2.5 病原菌的Biolog鉴定  31
    2.6 病原菌的FAMEs鉴定  31-32
    2.7 病原菌的16S rDNA序列测定及分析  32-33
    2.8 病原菌的ITS序列测定及分析  33-34
第三章实验结果与讨论  34-50
  3 梨树花枯、芽枯病原菌的鉴定  34-40
    3.1 烟草过敏反应  34
    3.2 病原菌的致病性  34
    3.3 病原的形态与培养性状  34-35
    3.4 Biolog鉴定结果  35-36
    3.5 病原菌的FAMEs鉴定结果  36-37
    3.6 病原菌的序列鉴定  37-38
    3.7 讨论  38-40
  4 梨树嫩枝枯黑病原鉴定  40-45
    4.1 致病性测定  41
    4.2 常规细菌学鉴定  41-42
    4.3 Biolog鉴定  42
    4.4 FAMEs测定  42-43
    4.5 16S rDNA序列测定  43-44
    4.6 讨论  44-45
  5 梨锈水病病原菌鉴定结果  45-49
    5.1 过敏性反应及致病性测定  45
    5.2 常规细菌学鉴定  45-46
    5.3 梨树锈水病潜在病原菌的Biolog鉴定结果  46-47
    5.4 梨树锈水病潜在病原菌的FAMEs结果  47
    5.5 16S rDNA序列测定  47-48
    5.6 讨论  48-49
  结束语  49-50
第四章参考文献  50-55
作者简历及在研期间所取得的主要科研成果  55-57
  教育经历  55
  硕士期间(2007.9-2010.3)论文发表情况  55-57
附录一  57-59
  药剂对梨花枯病菌的抑菌活性测定  57-59
附录二  59-62
  壳聚糖抑菌活性的测定  59-62
附录三  62-67
  西兰花褐腐致病菌的鉴定  62
  鉴定结果  62-67
    3.1 病原菌的致病性  62-63
    3.2 病原菌的细菌学鉴定  63-64
    3.3 Biolog鉴定结果  64
    3.4 病原菌的FAMEs鉴定结果  64
    3.5 16SrDNA序列分析  64-65
    3.6 ITS序列分析  65-67
结论  67

梨树花枯病病原及其相关病原细菌研究

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