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基于AFM原位检测的微纳生物传感器固定化技术的研究
作 者: 周涛
导 师: 叶学松;刘峰
学 校: 浙江大学
专 业: 生物医学工程
关键词: 生物传感器 原子力显微镜 固定化技术 蛋白吸附 纳米金膜
分类号: Q814
类 型: 硕士论文
年 份: 2010年
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内容摘要
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生物活性物质的固定化是生物传感器制作中的重要环节。蛋白质吸附是蛋白固定化过程的关键问题之一。本研究利用原子力显微镜(AFM)在纳米尺度下原位观察蛋白质在纳米材料表面的自组装吸附过程。本文的研究工作主要包括以下方面:1、综述了生物传感器及其固定化技术的发展历程,介绍了原子力显微镜的原理、相关技术及其在微纳生物传感器研究中的应用;2、通过物理气相沉积成膜、食人鱼(Piranha)洗液超声清洗和AFM探针擦刮,构造了“纳米金膜-二氧化硅”(NanoAu-SiO2)的混合表面基底;3、在液相环境中实时原位地观察牛血清蛋白(BSA)在“纳米金膜-二氧化硅”界面自组装吸附过程;4、在接触扫描模式下,设计了通过改变AFM探针作用力获得不同扫描形貌的AFM力敏实验方案,并建立了相关的解释模型。研究结果表明:1、纳米金膜对BSA具有很强的吸附力,而二氧化硅对BSA的吸附则很弱;2、BSA在纳米金膜-二氧化硅界面的纳米金颗粒上呈Side-on吸附取向,且呈单层膜。3、BSA在连续纳米金膜表面上吸附取向吻合力敏解释模型。本研究将有助于从微观上探究提升微纳米生物传感器性能的方法。
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全文目录
摘要 4-5 Abstract 5-10 第1章 绪论 10-15 1.1 课题背景 10-13 1.2 研究思路 13-14 1.3 论文框架 14-15 第2章 生物传感器固定化技术 15-28 2.1 概述 15-23 2.1.1 分类 15-17 2.1.2 发展过程 17-23 2.2 固定化工艺 23-28 2.2.1 直接吸附法 24 2.2.2 共价键合法 24-25 2.2.3 交联法 25 2.2.4 包埋法 25-26 2.2.5 自组装法 26-28 第3章 原子力显微镜 28-48 3.1 背景 28-34 3.1.1 光学显微镜瓶颈:衍射极限 28-29 3.1.2 照明源的延续:T/SEM 29-31 3.1.3 突破性进展:STM 31-33 3.1.4 质的飞跃:AFM 33-34 3.2 原理及现状 34-42 3.2.1 工作原理 34-38 3.2.2 优势与劣势 38-40 3.2.3 国内外发展 40-42 3.3 在生物传感器中的应用 42-48 第4章 AFM原位观察BSA吸附实验 48-67 4.1 引言 48-49 4.2 仪器设备 49-50 4.3 试剂材料 50-51 4.4 前期准备 51-52 4.4.1 铬酸洗液配制 51 4.4.2 Piranha洗液配制 51-52 4.5 NanoAu-SiO_2界面获取 52-55 4.5.1 SiO_2清洗 53 4.5.2 纳米金膜制备 53-54 4.5.3 Piranha超声清洗 54 4.5.4 AFM探针刮擦 54-55 4.6 接触角测试 55-56 4.7 AFM原位可行性测试 56-58 4.8 AFM原位观测BSA吸附 58 4.8.1 液体注入方案 58 4.9 纳米金膜概貌 58-61 4.9.1 大气中的纳米金膜 59 4.9.2 水中的纳米金膜 59-61 4.10 NanoAu-SiO_2吸附BSA原位对比试验 61-67 4.10.1 纵向观测 61-63 4.10.2 蛋白吸附取向 63-64 4.10.3 横向对比验证 64-65 4.10.4 吸附力敏试验 65-67 第5章 总结展望 67-68 参考文献 68-71 作者简历 71-72 致谢 72
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中图分类: > 生物科学 > 生物工程学(生物技术) > 酶工程
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