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马铃薯种质资源对晚疫病菌的抗性评价及致病疫霉SSR引物的开发
作 者: 韩彦卿
导 师: 朱杰华
学 校: 河北农业大学
专 业: 植物病理学
关键词: 马铃薯晚疫病菌 生理小种 种质资源 抗性评价 SSR引物
分类号: S435.32
类 型: 硕士论文
年 份: 2010年
下 载: 119次
引 用: 3次
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内容摘要
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马铃薯是世界上继水稻、小麦和玉米之后的第四大粮食作物。2008年被联合国宣布为“国际马铃薯年”(IYP)更突显出马铃薯在全球粮食系统中的重要地位。马铃薯晚疫病一直以来都是马铃薯生产上最重要的病害,在多种防治晚疫病的方法中,培育抗病品种是防治该病最经济、最有效的方法。本研究围绕病原致病疫霉和寄主马铃薯开展了如下工作,旨在为抗晚疫病育种策略制定和抗病品种的合理布局提供理论依据。1.利用11个含有单显性抗性基因的一套鉴别寄主R1-R11对采自我国黑龙江、河北、福建、内蒙古、云南和四川的6个省份的57株马铃薯晚疫病菌菌株进行了生理小种测定,共发现30个生理小种。这30个生理小种均为含多个毒力基因的复合小种,其中含5个以上的毒力基因的小种有25个,约占83%。还发现有3个菌株可以克服所有已知的R1-R11等11个抗病基因的“超级毒力小种”,其中2株来自四川省,1株来自云南省。2.采用离体叶片法对生产上栽培的22个马铃薯品种进行了抗晚疫病评价。结果表明,被测的22个马铃薯品种中,仅克新18号和克新19号2个品种对马铃薯晚疫病菌表现为高度抗病,其余18个品种发病程度不同,表现轻感、中感和高感的品种分别占总数的27%、55%和9%。3.通过接种10个毒力不同的晚疫病菌菌株,对引自美国的338份马铃薯野生种质材料进行室内鉴定,共筛选出58份抗性优良的材料。其中54份材料表现免疫,4份材料表现为高度抗病,其余280份材料均表现感病,其中轻感、中感和高感材料分别为14、48和218份,分别占被测总数的4.1%、14.2%和64.5%。4.测定了马铃薯组9个系的12个马铃薯野生种材料,获得53条ETS基因序列构建系统发育树。结果表明,马铃薯ETS序列不同种的克隆序列之间存在明显的异质性,还发现其聚类结果与马铃薯的抗病性无明显相关性。5.对在整个致病疫霉基因组上设计的10个SSR引物进行了筛选,筛选出1对引物。
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全文目录
摘要 4-5 Abstract 5-9 1 引言 9-16 1.1 晚疫病菌(P. infestans)简介 9-10 1.2 马铃薯种质资源 10 1.3 抗晚疫病育种种质资源的研究与利用 10-12 1.4 分子标记技术在马铃薯遗传多样性研究中的应用 12-13 1.4.1 RFLP 标记和RAPD 标记 12 1.4.2 ISSR 标记和SSR 标记 12 1.4.3 AFLP 标记 12-13 1.5 植物核基因组核糖体基因间隔区序列在系统发育中的应用 13-15 1.5.1 5SrDNA 基因间隔区在系统发育研究的应用 13-14 1.5.2 18S、5.8S、26S rDNA 基因重复拷贝的间隔区(IGS) 14-15 1.6 本研究的目的与意义 15-16 2 材料与方法 16-27 2.1 试验材料及仪器 16-19 2.1.1 供试菌株 16 2.1.2 马铃薯材料 16-18 2.1.3 供试培养基 18 2.1.4 供试主要试剂 18-19 2.1.5 主要仪器设备 19 2.1.6 用于扩增rDNA-ETS 序列的引物 19 2.2 试验方法 19-27 2.2.1 马铃薯晚疫病菌生理小种测定 19-20 2.2.2 马铃薯品种及马铃薯种质材料的抗晚疫病鉴定 20-21 2.2.3 马铃薯rDNA-ETS 序列系统发育分析 21-23 2.2.4 马铃薯晚疫病菌SSR 引物的开发 23-25 2.2.5 DNA 纯度与浓度的检测 25-27 3 结果与分析 27-39 3.1 马铃薯晚疫病菌生理小种测定 27-29 3.2 马铃薯种质资源抗晚疫病鉴定 29-34 3.2.1 马铃薯不同品种抗性鉴定 29-30 3.2.2 马铃薯野生种质材料的抗性鉴定 30-34 3.3 马铃薯rDNA-ETS 序列系统发育分析 34-38 3.3.1 马铃薯基因组DNA 提取 34 3.3.2 rDNA-ETS 序列的PCR 扩增 34-35 3.3.3 特异片段克隆与的鉴定 35 3.3.4 序列分析、系统发育树的构建 35-38 3.4 马铃薯晚疫病菌SSR 引物的筛选 38-39 3.4.1 马铃薯晚疫病菌基因组DNA 提取 38 3.4.2 马铃薯晚疫病菌SSR 引物筛选 38-39 4 讨论 39-42 4.1 生理小种的组成日趋复杂 39 4.2 马铃薯种质资源抗晚疫病鉴定 39-40 4.2.1 对部分马铃薯品种的逐渐感病的讨论 39-40 4.2.2 马铃薯野生种质材料在抗病育种中的利用 40 4.3 马铃薯种质资源的系统发育分析 40-41 4.3.1 ETS 基因序列系统发育树上对组III 的探讨 40-41 4.3.2 马铃薯的演化 41 4.4 致病疫霉SSR 引物的开发 41-42 5 结论 42-43 参考文献 43-50 附录1 DNA 提取所用试剂的配制 50-51 附录2 SSR 试验所用试剂的配制 51-52 附录3 SSR 引物的配制 52-53 附录4 琼脂糖凝胶的配制 53-54 附录5 缩写词表 54-55 在读期间发表的学术论文 55-57 致谢 57-58
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中图分类: > 农业科学 > 植物保护 > 病虫害及其防治 > 农作物病虫害及其防治 > 薯类作物病虫害 > 马铃薯(土豆)病虫害
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