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广西扁柑及部分地方柑橘种质资源调查和亲缘关系分析

作　者: 郭丽英
导　师: 黄桂香
学　校: 广西大学
专　业: 果树学
关键词: 扁柑种质资源 ISSR SCoT 亲缘关系染色体核型
分类号: S666
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

扁柑(C. reticulata Blanco cv. Biangan)属芸香科(Rutaceae)、柑橘亚科(Aurantioideae)、柑橘属(Citrus)植物,是广西特有的柑橘品种,丰产稳产,果型美观,色泽鲜艳,耐贮藏。目前,扁柑资源仍未得到很好的开发利用,且该资源存在着同名异物或同物异名的现象,在分类上属于宽皮柑橘类的“柑”还是“桔”未得到证实,为了充分利用和保护扁柑优良种质资源,了解扁柑种质资源的现状、分类地位及亲缘关系,本研究对扁柑种质资源进行调查收集,同时进行了形态描述和染色体核型分析,并利用ISSR和SCoT分子标记分别对26份种质资源进行了遗传多样性分析。主要结果如下：1.通过实地调查,共收集了26份扁柑及其它柑橘资源,分别采自广西那陈镇、浦北县、大新县、金城江区、凭祥市、龙州市、上思县、百色及越南等地。2.调查发现一些扁柑单株表现无核率高、有脐、丰产、风味佳等优良性状。3.扁柑树冠扁圆形,叶卵状披针形,两性花,果实扁圆形,果色橙红,单果重65.66g～183g,可溶性固形物11%～14%,可食率70%,果肉色泽橙红色,中等化渣,有香气,平均瓤囊数11,桔络较多,白色,种子0～15粒,多胚,子叶绿色。4.进行了ISSR-PCR和SCoT-PCR反应体系及程序优化,建立了适合于扁柑资源的ISSR-PCR和SCoT-PCR的反应体系。5.扁柑亲缘关系ISSR和SCoT分析表明：在遗传系数为0.76水平处均能将27份资源分成了两大类,第1组包括：腊月柑1-4、腊月柑珠心苗、龙州本地柑、凭祥本地柑1-3、广柑、越南柑橘1-2、浦北扁柑无核、那陈扁柑1-2、那陈扁柑珠心苗、百色乌拉扁柑、百色六鸡扁柑、金城江扁柑、上思扁柑1-3、栟柑和南丰蜜桔；第2组包括：宫川早温和兴津早温。由以上亲缘关系分析,扁柑分类上应属于宽皮柑橘中的“桔”6.染色体观察及核型分析结果表明：扁柑为二倍体,2n=2x=18；核型为2B类型。

全文目录

摘要  4-5
Abstract  5-9
1 前言  9-16
  1.1 概述  9
  1.2 相橘遗传多样性研究进展  9-10
  1.3 分子标记研究进展  10-13
  1.4 ISSR和SCoT分子标记概述  13-14
    1.4.1 ISSR分子标记概述  13-14
    1.4.2 SCoT分子标记概述  14
  1.5 研究目的、意义及内容  14-16
    1.5.1 研究目的、意义  14-15
    1.5.2 研究内容  15-16
2 材料与方法  16-27
  2.1 扁柑种质资源的调查与收集  16-18
    2.1.1 调查地区的自然状况  16
    2.1.2 方法  16-18
  2.2 ISSR标记和SCoT标记研究  18-24
    2.2.1 材料  18-19
    2.2.2 主要生化试剂  19
    2.2.3 主要仪器设备  19-20
    2.2.4 实验设计  20
    2.2.5 模板DNA的制备  20-21
    2.2.6 DNA的浓度调整和质量检测  21
    2.2.7 ISSR-PCR反应程序及体系的初始建立  21-23
    2.2.8 SCoT-PCR反应程序及体系的初始建立  23-24
  2.3 广西那陈扁柑种质资源的染色体观察  24-25
    2.3.1 材料  24
    2.3.2 方法  24-25
  2.4 核型分析  25-27
3 结果与分析  27-52
  3.1 扁柑种质资源的调查与收集  27-34
    3.1.1 分布状况  27
    3.1.2 植物学部分性状调查  27-33
    3.1.3 形态学性状多样性研究  33-34
  3.2 ISSR分子标记研究  34-41
    3.2.1 基因组DNA的提取与检测  34-35
    3.2.2 ISSR扩增体系的建立  35-36
    3.2.3 ISSR引物的筛选及退火温度的确定  36-37
    3.2.4 ISSR扩增结果  37-38
    3.2.5 聚类分析  38-41
  3.3 SCoT分子标记研究  41-47
    3.3.1 SCoT扩增体系的建立  41-44
    3.3.2 SCoT多态性分析  44-47
  3.4 ISSR和SCoT实验数据的综合聚类分析  47-49
  3.5 染色体分析  49-50
    3.5.1 取材时间  49
    3.5.2 根尖培养方式的对比  49
    3.5.3 预处理的影响  49
    3.5.4 酸解时间的对比  49-50
    3.5.5 染色体数目的确定  50
  3.6 核型分析  50-52
4 讨论与展望  52-58
  4.1 讨论  52-56
    4.1.1 影响DNA提取的因素  52
    4.1.2 ISSR-PCR和SCoT-PCR反应体系的探索  52-53
    4.1.3 引物筛选策略  53
    4.1.4 形态学性状、ISSR分子标记、SCoT分子标记三种方法分析  53-54
    4.1.5 ISSR标记和SCoT标记的应用前景  54-55
    4.1.6 影响根尖染色体的因素  55-56
    4.1.7 广西扁柑种质资源的开发、保护和利用  56
  4.2 展望  56-58
5 结论  58-60
致谢  60-61
参考文献  61-66
附录A  66-67
附录B  67

广西扁柑及部分地方柑橘种质资源调查和亲缘关系分析

内容摘要

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