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酶催化法生产腺苷蛋氨酸中试工艺研究
作 者: 谭华征
导 师: 高波;郑芳晔
学 校: 吉林大学
专 业: 制药工程
关键词: 腺苷蛋氨酸 中试 发酵 纯化 纳滤 冻干
分类号: TQ464.7
类 型: 硕士论文
年 份: 2010年
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内容摘要
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腺苷蛋氨酸(SAM)是人体内重要的代谢中间体,参与数十种代谢反应。自从20世纪70年代末在欧洲上市以来,SAM的药理作用不断被证实,适应症也不断扩大,现已包括抗炎镇痛、抗抑郁和对肝病的预防和治疗。其中抗抑郁和保肝护肝两个适应症对于改善目前我国在精神抑郁和肝病防治领域的现状有重要的意义。虽然SAM的应用已经有几十年,但其生产方法一直都是以发酵法为主。近年来随着酶工程技术的发展,使大规模应用酶促合成法生产SAM的设想成为可能。利用酶促反应效率高,专一性强的特点,可以克服传统发酵工艺中生产周期长,产物含量低且易消旋,环保压力大等缺点,实现高效率、低成本生产SAM的目的。本次实验将重点研究小试工艺放大后,在工程菌发酵、破碎以及酶促催化合成SAM等步骤中应进行的调整,并针对大规模的生产,选用更为高效的生产方法,在放大处理量的同时,也保证产品的质量,探索了一条低成本,高效率的SAM生产工艺路线。
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全文目录
内容提要 5-8 第一章 前言 8-22 1.1 腺苷蛋氨酸简介 8-12 1.1.1 SAM 在体内的代谢途径 9-10 1.1.2 SAM 的稳定性和成盐形式 10-12 1.2 SAM 的药理作用 12-15 1.2.1 抗抑郁症作用机理 12-13 1.2.2 治疗肝脏疾病及肝内胆汁郁积作用机理 13-15 1.3 SAM 的临床应用 15-16 1.3.1 SAM 治疗抑郁症 15 1.3.2 SAM 治疗各种胆汁淤积和急慢性肝炎 15-16 1.4 本品国内外的研究和生产情况 16-19 1.5 本课题的立题依据 19-20 1.6 实验思路与方案 20-22 第二章 实验材料与方法 22-31 2.1 材料、仪器和试剂 22-24 2.1.1 材料 22 2.1.2 主要仪器 22-23 2.1.3 主要试剂 23-24 2.2 SAM 生产及检验的方法 24-31 2.2.1 小试试验中SAM 的生产方法 24-25 2.2.2 SAM 含量的检测方法 25-27 2.2.3 SAM 原料中有关物质的检测方法 27-29 2.2.4 (S,S)异构体的测定方法 29-30 2.2.5 对甲苯磺酸根和硫酸根的检测方法 30-31 第三章 结果与讨论 31-49 3.1 发酵条件的研究 31-35 3.1.1 金属离子对SAM 合成酶表达量的影响 31-32 3.1.2 补料时间的研究 32-33 3.1.3 补料培养基配方的研究 33-34 3.1.4 发酵时间的确定 34-35 3.2 SAM 合成酶的释放和纯化 35-37 3.2.1 SAM 合成酶的释放 35-36 3.2.2 SAM 合成酶的纯化 36-37 3.3 反应条件的研究 37-40 3.3.1 pH 值对反应的影响 37-38 3.3.2 反应时间对酶活的影响 38 3.3.3 缓冲系统的选择 38-39 3.3.4 最适酶加入比例的研究 39-40 3.3.5 镁盐和钾盐的选择 40 3.4 洗脱液的浓缩 40-42 3.5 冻干工艺的研究 42-45 小节 45-49 结论 49-50 参考文献 50-53 致谢 53-54 中文摘要 54-55 Abstract 55-56
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中图分类: > 工业技术 > 化学工业 > 制药化学工业 > 生物制品药物的生产 > 氨基酸、肽、蛋白质
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