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天仙子炮制原理初步探讨

作　者: 王岩
导　师: 李军
学　校: 辽宁中医药大学
专　业: 中药学
关键词: 天仙子 醋制 高效液相色谱法 气相—质谱联用法 氢溴酸东莨菪碱 硫酸阿托品 多糖 急性毒性 镇痛 抗炎
分类号: R283
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
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内容摘要


目的:天仙子为茄科植物莨菪Hyoscyamus niger L.的干燥成熟种子,原称“莨菪子”,有大毒,具有解痉止痛,安神定痛的功能。主治胃痉挛疼痛、喘咳、癫狂、抗休克、改善微循环等。近几年来,在研究使用过程中,进一步发现了它多方面的药理作用和临床功能。《中国药典》2005年版收载了天仙子,并未收载其炮制品,为完善天仙子的质量标准,有必要对天仙子的炮制工艺进行深入的研究,找出一种减毒增效、稳定可控、易推广且适合大生产的炮制工艺。本课题在参考大量文献的基础上,对天仙子炮制工艺进行了研究,优选出最佳炮制工艺参数,为制定其质量标准奠定基础,并为临床用药更合理、更有效提供科学的理论依据。主要从以下三个方面对天仙子进行了研究。材料与方法:在化学成分研究中,采用GC-MS联用技术、HPLC法、紫外分光光度法测定天仙子中各化学成分在炮制前后的变化情况;药理实验研究中首先做急性毒性试验,采用小鼠热板法和小鼠扭体法观察其镇痛作用、二甲苯致小鼠耳廓肿胀法观察其抗炎作用;最后运用正交实验方法确定了天仙子最佳炮制工艺。结果:1.天仙子生品及炮制品化学成分比较研究采用GC-MS联用技术,对天仙子炮制前后挥发油成分进行分析,均分得29个化合物,清炒品与生品对比发现大多数成分含量均下降,棕榈酸降低了1.4486、油酸降低了1.2698、亚油酸明显下降了2.6799,而己醛含量增加了1.3414。醋制品与生品对比结果发现除了1-戊醇（降低了0.0083）、2-壬酮（降低了0.0038）、6-十一酮（降低了0.0296）、2-十一酮（降低了0.0305）、2-丁基2-庚烯醛（降低了0.0521）等少量成分含量降低外基本都是大幅度增加,明显的就是亚油酸增加了21.0523,有6倍之多。通过GC谱图比较,发现天仙子及炮制品中脂肪酸成分相同,采用内标法对含量进行计算发现生品与炮制品中脂肪酸化学成分含量无变化,利用GC-MS联用技术对天仙子脂肪酸进行了成分分析,结果分得十一种脂肪酸占总脂肪酸的99.2%,其中亚油酸含量高达到66.5%,其次是油酸为17.26%。采用HPLC法,通过对天仙子炮制前后氢溴酸东莨菪碱、硫酸阿托品、消旋山莨菪碱的含量进行比较,结果表明清炒后可使天仙子中氢溴酸东莨菪碱、硫酸阿托品、消旋山莨菪碱的含量分别降低(mg·g-1)0.0187、0.0202、0.000602,而醋制后天仙子中氢溴酸东莨菪碱、硫酸阿托品、消旋山莨菪碱的含量分别增加(mg·g-1)0.0386、0.0446、0.000748。通过比较水煎煮与水浸提取多糖方法,水煎方法提取的多糖率比热水浸泡的提取率低0.05%;由水浸法提取多糖的正交试验数据分析得出,天仙子粗多糖提取的最佳工艺为A283C3D1,即8倍量的水、100℃、提取3次、每次2小时。采用紫外分光光度法,测定天仙子生品、清炒品、醋制品多糖的含量分别为21.93mg·g-1、20.35mg·g-1、20.51mg·g-1,结果表明炮制前后对其多糖的影响不大。2.天仙子生品及其炮制品药理作用研究首先对天仙子生品及炮制品进行了急性毒性实验,采用最大耐受量法,天仙子生品及其炮制品的水煎液给小鼠最大剂量一次性灌胃,均未出现死亡现象。小鼠口服天仙子生品与炮制品水煎液最大耐受量分别是200g·kg-1、190g·kg-1和192g·kg-1,分别相当于临床用量的8333、7917和8000倍。其次,通过小鼠热板法、小鼠扭体法观察其镇痛作用,得出天仙子及炮制品均具有较强的镇痛作用,且生品与两种炮制品镇痛效果无显著性差异。二甲苯致小鼠耳廓肿胀法实验中,观察其抗炎作用,结果表明阳性对照组、天仙子生品组、天仙子炒品组、天仙子醋制品组对二甲苯致小鼠耳廓肿胀均具有显著的抑制作用,说明天仙子及炮制品具有抗炎作用。并且通过肿胀抑制率可以分析出天仙子醋制品抗炎作用强于炒制品强于生品。3炮制工艺研究清炒法实验结果表明,天仙子中氢溴酸东莨菪碱、硫酸阿托品的含量随着清炒温度的升高及清炒时间的延长不段下降,可见温度过高将破坏生物碱,使其减少。而醋制工艺在通过对干燥方法,加醋量,闷润时间,微波时间,微波强度的考察,确定因素水平,按正交试验表安排试验,以氢溴酸东莨菪碱、硫酸阿托品的含量为指标,对醋天仙子的最佳炮制工艺进行优选,确定了最佳工艺为每100kg天仙子加40kg米醋,闷润2h,于微波低火,干燥4min。结论:化学成分研究方面,天仙子炮制前后对其挥发油、生物碱有一定的影响,而对脂肪酸与多糖含量无变化;药理实验中,天仙子及炮制品水煎液灌胃对小鼠的毒性很小,并且都有一定的镇痛作用,但二者镇痛作用的效果并无显著性差异;然而在抗炎方面醋制品的抗炎效果优于生品与清炒品。最后通过化学成分与药理实验研究的结果作为基础,确立出最佳炮制工艺,并初步了解天仙子的炮制原理。

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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药炮制、制剂
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