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红内期恶性疟原虫连续体外培养中污染细菌鉴定与实验室空气质量控制措施

作　者: 李玉刚
导　师: 董莹
学　校: 大理学院
专　业: 病原生物学
关键词: 恶性疟原虫体外培养细菌鉴定实验室空气质量控制
分类号: R378
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

目的1.观察鉴定体外培养疟原虫过程中容易污染的细菌种类、来源及药物敏感性,初步探寻控制污染的方法。2.探寻紫外线照射和甲醛熏蒸实验室内空气消毒效果。方法在采用CO2混合气体法人工培养恶性疟原虫过程中,对被污染的培养物进行细菌鉴定；对操作者手指部进行表面采样法培养鉴定。采用每天84消毒液拖地、新洁尔灭擦拭门和操作台,延长实验室紫外线辐射和操作前新洁尔灭洗手、操作中物体表面喷洒酒精等措施进行消毒控制。对实验室内空气采用自然沉降法采样培养鉴定；实验室内甲醛熏蒸前和之后每隔24h进行空气采样1次,连续进行1周,间隔一定时期后重复上述采样过程。结果培养过程中培养物污染的细菌为嗜麦芽寡养单胞菌Sernotrphomonas maltophilia、鲍曼氏/醋酸钙不动杆菌复合体A. baumannii / calcoaceticus complex和鲁氏不动杆菌Acinetobacter lwoffii (acilwo),均为革兰阴性杆菌(G-b),且属于多重耐药菌株；实验室不同时期空气中细菌构成不同,初期检测发现以杆菌为主,如假单胞菌Pseudomonas、鲍曼氏不动杆菌A. baumannii、阴沟肠杆菌E. cloacae等,后期检测发现主要为革兰阳性球菌(G+c),特别是藤黄微球菌M. luteus和解糖葡萄球菌S. saccharolyticus,均对庆大霉素敏感；手部携带菌株为常见的表皮葡萄球菌S. epidermidi和藤黄微球菌M. luteus。甲醛熏蒸和增加紫外线照射时间均能够减少空气中细菌数量。结论通过加强消毒措施同时应用庆大霉素可以很好地控制体外培养疟原虫时出现的细菌污染。影响紫外线照射效果因素极多,并且影响自然沉降法空气采样结果之因素亦较多,紫外线照射时间与空气中细菌数量之间的曲线不易准确绘出。甲醛熏蒸能够很好减少空气中细菌数量,但随着时间延长效果逐步减弱,且熏蒸后24～48h内气味较重,影响工作人员身体。

全文目录

中文摘要  5-6
Abstract  6-8
前言  8-10
Ⅰ. 恶性疟原虫复苏与培养  10-14
  1. 材料与方法  10-13
    1.1 仪器  10
    1.2 耗材  10
    1.3 试剂  10
    1.4 虫株  10
    1.5 溶液配制方法  10-11
    1.6 复苏步骤  11-12
    1.7 培养步骤  12-13
  2. 培养结果  13
  3.鲍曼氏/醋酸钙不动杆菌复合体污染的血膜  13-14
Ⅱ. 污染微生物采集与鉴定  14-16
  1. 仪器与试剂  14
  2. 方法  14
  3. 结果  14
  4. 污染细菌菌落图片  14-16
Ⅲ. 操作者手部洗手前后细菌采样  16-20
  1. 仪器与试剂  16
  2. 方法  16
  3. 结果  16
  4. 手部携带微生物图片  16-20
Ⅳ. 空气紫外线照射效果观测  20-33
  1. 仪器与试剂  20
  2. 采样与鉴定方法  20-21
  3. 结果  21-33
    3.1 紫外线照射1h前后空气采样结果  21-22
    3.2 紫外线照射2h前后空气采样结果  22-24
    3.3 紫外线照射3h前后空气采样结果  24-25
    3.4 紫外线照射4h前后空气采样结果  25-26
    3.5 随机抽查空气采样结果  26-27
    3.6 细胞培养室空气采样检测细菌汇总  27-28
    3.7 细胞培养室空气采样部分细菌图片  28-33
Ⅴ. 甲醛熏蒸效果观测  33-36
  1. 仪器与试剂  33
  2. 采样点与采样方法  33
  3. 结果  33-36
Ⅵ. 讨论  36-39
Ⅶ. 结论  39
参考文献  39-43
附录研究生期间发表的论文(题目)  43-44
文献综述  44-64
  参考文献  58-64
致谢  64

红内期恶性疟原虫连续体外培养中污染细菌鉴定与实验室空气质量控制措施

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