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植物灭螺剂有效成分的定量及其作用机理研究

作　者: 朱隽
导　师: 李文新
学　校: 华中师范大学
专　业: 植物学
关键词: 血吸虫病 钉螺 植物灭螺剂 SX果实粉 AC种粉 CuSO4 生物碱SX-Ⅰ 钉螺AchE 灭螺药物
分类号: R184
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
下　载: 43次
引　用: 2次
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内容摘要


血吸虫病是世界上仅次于疟疾的第二大寄生虫病。钉螺是血吸虫的唯一中间宿主,消灭钉螺能有效控制血吸虫病的传播。Nic是常用的化学灭螺药物,但显效慢、价格高、对鱼毒性大。植物灭螺剂因有低毒、易生物降解、价廉等技术经济优势而受到关注。本文研究了新型植物灭螺剂（产品）活性成分的定量及作用机理,主要结果如下:1.建立了HPLC法定量分析产品有效成分SX-Ⅰ的方法。方法:色谱柱,C185μm 4.6×150 mm;流动相,MeOH- ACN-NH4AC（V/V/V,30:60:10）;流速,1.0mL/min;检测,UV210 nm。结果:SX-Ⅰ线性范围为100～500μg/mL,平均回收率108.8%,变异系数（RSD）0.14%。结论:该方法简捷、准确,可用于该产品有效成分SX-Ⅰ的质量控制。2.研究了NM和SX-Ⅰ灭螺药物对钉螺酶活性及蛋白的诱导作用。方法:HPLC检测及PAGE和SDS-PAGE电泳分析。结果:钉螺AchE、GOT的活性随浸泡时间延长,先增强后减弱;而钉螺的总的酶带数也出现先增加后减少的现象。结论:NM和SX-Ⅰ溶液灭杀钉螺,使其正常的物质代谢平衡被破坏,蛋白合成受阻,导致钉螺中毒死亡。3.测定了不同浓度SX果实粉、AC种粉及CHSO4复配对钉螺AchE活性的影响。方法:改进的Ellman法测定AchE对药物的灵敏度,采用L25（53）正交试验和极差分析等方法,试验确定3因素及其5水平,测定酶活性抑制率最高的条件组合。结果:灭螺药物复配对钉螺AchE活性抑制率的最佳组合为:SX果实粉25mg/L、AC种粉16 mg/L、CUSO42 mg/L。结论:该方法简单、有效,可用于研发对钉螺高毒、鱼低毒的新型灭螺剂提供参考。

全文目录


摘要  4-5
Abstract  5-9
第1章 绪论  9-16
  1 控制钉螺的技术需求  9
  2 植物灭螺剂的炮制研究  9-11
    2.1 植物灭螺的研发优势  9-10
    2.2 植物灭螺剂的研发难点  10-11
  3 植物灭螺剂的机制研究  11-13
  4 HL植物灭螺剂的研制  13-15
    4.1 产品的灭螺活性及对非靶标毒性  13-14
    4.2 产品的灭螺机制  14-15
  5 课题研究的内容和意义  15-16
第2章 5%植物灭螺剂有效成分的HPLC定量分析研究  16-22
  1 试验材料、试剂和仪器  16
    1.1 材料试剂  16
    1.2 仪器设备  16
  2 试验方法  16-18
    2.1 标样与试样的制备(配制)  16-17
    2.2 HPLC法定量分析  17-18
  3 试验结果  18-21
    3.1 标样HPLC的线性相关测定  18-19
    3.2 试样HPLC精密度试验  19-20
    3.3 试样HPLC准确度试验  20-21
  4 讨论  21-22
第3章 灭螺药物对钉螺蛋白质的诱导作用  22-34
  1 试验材料、试剂及设备  22-23
    1.1 材料  22
    1.2 试剂  22-23
    1.3 仪器设备  23
  2 试验方法  23-27
    2.1 灭螺药物溶液的配制  23
    2.2 钉螺的选取及处理  23
    2.3 钉螺处理蛋白的制备  23-24
    2.4 蛋白含量测定  24
    2.5 药物处理后钉螺AchE、GOT、GPT的活力测定  24
    2.6 钉螺处理蛋白的HPLC法定量分析条件  24-25
    2.7 钉螺处理蛋白的电泳分析  25-27
  3 试验结果  27-33
    3.1 灭螺药物对钉螺蛋白的影响  27
    3.2 药物处理钉螺蛋白的HPLC分析  27-30
    3.3 药物处理钉螺酶及蛋白的电泳分析  30-32
    3.4 药物处理对钉螺AchE、GOT、GPT酶活力的影响  32-33
  4 讨论  33-34
第4章 钉螺AchE对灭螺药物的敏感性研究  34-41
  1 试验材料、试剂及设备  34
    1.1 材料  34
    1.2 试剂  34
    1.3 仪器设备  34
  2 试验方法  34-36
    2.1 灭螺药物的原粉制备和溶液配制  34-35
    2.2 钉螺AchE酶液的制备  35
    2.3 AchE酶液的蛋白含量和活力测定  35
    2.4 单剂药物对AchE活力影响的测定  35
    2.5 复剂药物对AchE活力影响的测定  35-36
  3 试验结果  36-40
    3.1 单剂药物对钉螺AchE活性影响  36-37
    3.2 影响钉螺AchE活性的药物最佳配比  37-39
    3.3 试验因素各水平间的多重比较  39-40
  4 讨论  40-41
参考文献  41-45
在校期间撰写和发表的论文  45-46
缩略词  46-47
致谢  47

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中图分类: > 医药、卫生 > 预防医学、卫生学 > 流行病学与防疫 > 防疫措施和管理
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