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吲哚美辛对COPD营养不良模型大鼠骨骼肌蛋白质分解代谢的影响

作　者: 高健
导　师: 孙圣华
学　校: 中南大学
专　业: 呼吸内科
关键词: 吲哚美辛 慢性阻塞性肺疾病 骨骼肌 蛋白质分解 肿瘤坏死因子-α
分类号: R563.9
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
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内容摘要


目的:观察吲哚美辛(IND)对COPD营养不良模型大鼠骨骼肌蛋白质分解代谢的影响以及大鼠体内TNF-α的变化。方法:100只健康Wistar大鼠随机分为模型组80只,对照组20只。采用气道内滴猪胰弹性蛋白酶加烟熏方法建立COPD大鼠模型。造模第68天以低于正常对照组大鼠平均体重的90%作为判断营养不良的标准,把模型大鼠分为营养不良组(n=40)和营养正常组(n=37)。营养不良组按随机区组设计分为A、B、C、D四组。A组、对照组和COPD营养正常组每天予等量生理盐水灌胃,B、C、D组每天予不同剂量IND灌胃(B组:IND 0.5mg/kg.d,C组:IND 1mg/kg.d,D组:IND 2mg/kg.d),干预14天后,饲养14天。称大鼠体重,采用双抗体夹心ABC-ELISA法测定血清、膈肌和伸趾长肌匀浆中肿瘤坏死因子-α的浓度;采用高效液相色谱技术检测膈肌、伸趾长肌匀浆中3-甲基组氨酸和酪氨酸的含量。结果:(1)干预C组大鼠体重增长速度显著高于干预B、D组和干预A组(P=0.001,P=0.002,P=0.00),与正常对照组、COPD营养正常组相比均无显著性差异(P均＞0.05)。干预B组与D组之间无明显差异(P＞0.05)。干预B、D组大鼠体重增长速度比干预A组稍有增高,无统计学差异(P＞0.05),低于COPD营养正常组和对照组,有统计学差异(P＜0.05,P＜0.01)。(2)干预前,干预A、B、C、D组大鼠血清、骨骼肌匀浆中TNF-α浓度均明显高于COPD营养正常组(P＜0.01)及对照组(P＜0.01),COPD营养正常组明显高于对照组(P＜0.01)。干预后,干预B、C、D组大鼠血清TNF-α浓度较干预前均明显降低(P＜0.01),并明显低于干预A组(P＜0.01),其中以干预C组最明显。(3)模型组大鼠血清TNF-α浓度与体重呈显著负相关(R=-0.846,P＜0.01);与膈肌、伸趾长肌重量均呈显著负相关(R=-0.778,P＜0.01:R=-0.772,P＜0.01)。(4)干预A组膈肌、伸趾长肌3-甲基组氨酸、酪氨酸含量均明显高于对照组(P＜0.01)、COPD营养正常组(P＜0.01)、干预B、C、D组(P＜0.01),干预C组明显低于COPD营养正常组(P＜0.01),低于干预B、D组(P＜0.05),干预B、D组之间无显著性差异(P＞0.05)。结论:(1)TNF-α参与了COPD营养不良、骨骼肌萎缩的发生。(2)1mg/kg剂量的吲哚美辛可以降低COPD营养不良大鼠血清、骨骼肌匀浆中TNF-α的水平,同时也可降低COPD营养不良大鼠骨骼肌蛋白分解代谢率,可部分改善COPD营养不良大鼠骨骼肌萎缩。(3)0.5mg/kg、2mg/kg剂量的吲哚美辛并不具有更显著的作用。

全文目录


摘要  4-6
ABSTRACT  6-10
本文主要的英汉缩略语词名对照表  10-11
目录  11-13
前言  13-15
第一章 材料与方法  15-22
  1.1 主要仪器和试剂  15-16
    1.1.1 主要仪器  15
    1.1.2 主要试剂  15-16
  1.2 实验动物、分组及饲养  16
    1.2.1 实验动物  16
    1.2.2 实验动物分组  16
    1.2.3 实验动物编号  16
    1.2.4 实验动物饲养  16
  1.3 主要实验溶液的配制及保存  16-17
    1.3.1 猪胰弹性蛋白酶生理盐水溶液配制及保存  16
    1.3.2 4%多聚甲醛的配制及保存  16
    1.3.3 高效液相色谱试剂及溶液  16-17
  1.4 COPD大鼠模型的建立  17
    1.4.1 气管内滴药方法  17
    1.4.2 被动吸烟方法  17
  1.5 判断COPD大鼠模型是否成功的方法  17-18
  1.6 COPD大鼠营养不良的判断  18
  1.7 模型组成模后分组、采血及干预  18
  1.8 处死动物的时间、方式、肺功能的测定及标本的处理  18-19
    1.8.1 处死动物的时间  18
    1.8.2 处死动物的方式  18
    1.8.3 肺功能的测定  18
    1.8.4 血液标本的处理  18-19
    1.8.5 肌肉组织的处理  19
    1.8.6 肺组织的处理  19
    1.8.7 肺组织石蜡切片的制作  19
  1.9 肺组织病理学检查  19
  1.10 血清、骨骼肌肿瘤坏死因子-a的检测  19-20
    1.10.1 标本处理  20
    1.10.2 检测程序  20
    1.10.3 结果和判断  20
  1.11 骨骼肌蛋白质分解代谢率测定  20-22
    1.11.1 标本处理  20
    1.11.2 柱前衍生  20-21
    1.11.3 色谱条件  21
    1.11.4 标准曲线和最低检测浓度  21
    1.11.5 衍生回收率及重复性  21
    1.11.6 结果计算  21-22
第二章 结果  22-33
  2.1 模型评价  22-23
    2.1.1 大鼠一般情况  22
    2.1.2 大鼠肺组织、气道病理改变(见本章附图1)  22
    2.1.3 大鼠的肺功能  22-23
  2.2 大鼠的体重变化  23-24
  2.3 大鼠膈肌、伸趾长肌重量测定结果  24-26
  2.4 大鼠血清肿瘤坏死因子-a的标准曲线  26
  2.5 大鼠血清肿瘤坏死因子-a的结果  26-28
  2.6 大鼠血清肿瘤坏死因子-a与体重、骨骼肌的相关性(见附图2)  28
  2.7 大鼠骨骼肌匀浆中肿瘤坏死因子-a的标准曲线  28
  2.8 大鼠骨骼肌匀浆中肿瘤坏死因子-a的结果  28-29
  2.9 高效液相色谱法测定骨骼肌3-甲基组氨酸、酪氨酸的标准曲线  29-30
  2.10 大鼠骨骼肌蛋白质分解代谢率的测定(色谱图见本章附图3)  30-33
    2.10.1 大鼠隔肌、伸趾长肌3-甲基组氨酸(3-MH)的结果  31
    2.10.2 大鼠膈肌、伸趾长肌酪氨酸(Tyr)的结果  31-33
附图  33-44
  附图1  33-34
  附图2  34-44
第三章 讨论  44-49
  3.1 COPD模型的制备及评价  44-45
  3.2 肿瘤坏死因子-a对COPD模型大鼠骨骼肌萎缩的影响  45-46
  3.3 肿瘤坏死因子-a对COPD模型大鼠骨骼肌蛋白分解代谢的影响  46-47
  3.4 吲哚美辛对COPD模型大鼠骨骼肌消耗的影响  47-49
第四章 结沦  49-50
参考文献  50-54
附录 综述  54-76
  参考文献:  66-76
致谢  76

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中图分类: > 医药、卫生 > 内科学 > 呼吸系及胸部疾病 > 肺疾病 > 其他
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