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慢性重型乙肝患者外周血单个核细胞Toll样受体2和9的表达研究

作　者: 李艳明
导　师: 刘文恩
学　校: 中南大学
专　业: 临床检验诊断学
关键词: TLR2 TLR9 TNF-α 荧光定量PCR 流式细胞学
分类号: R512.62
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

目的通过对慢性重型乙肝患者外周血单个核细胞TLR2和TLR9的表达研究,探讨TLR2和TLR9在慢性重型乙肝发病机制中的作用及与病情严重程度的关系。方法采集湘雅医院2010年3月至2011年2月慢性重型乙肝住院患者45例(实验组)和健康志愿者23例(对照组)的肝素抗凝血和促凝血。肝素抗凝血分离外周血单个核细胞,用流式细胞仪检测TLR2和TLR9蛋白在淋巴细胞和单核细胞上的表达水平,用荧光定量PCR方法检测外周血单个核细胞TLR2和TLR9 mRNA的相对表达水平。促凝血分离血清,用ELISA方法检测血清TNF-α的浓度。结果1.流式检测结果：(1)实验组和对照组单核细胞TLR2蛋白表达阳性率(%)分别为92.11±16.43和81.84±29.80,差异无统计学意义(P>0.05)；实验组和对照组淋巴细胞TLR2蛋白表达阳性率(%)分别为9.73+5.37和2.18±2.46,差异无统计学意义(P>0.05)；实验组和对照组单核细胞TLR2蛋白荧光强度分别为149.82+43.93和170.25±76.43,差异无统计学意义(P>0.05)；实验组和对照组淋巴细胞TLR2蛋白荧光强度分别为6.04±5.21和4.26+2.46,差异无统计学意义(P>0.05)。(2)实验组和对照组单核细胞TLR9蛋白表达阳性率(%)分别为81.65±32.31和55.03±21.60,差异无统计学意义(P>0.05)；实验组和对照组淋巴细胞TLR9蛋白表达阳性率(%)分别为75.64+37.15和23.29±18.87,差异有统计学意义(P<0.05)；实验组和对照组单核细胞TLR9蛋白荧光强度分别为140.614±48.35和225.85±90.11,差异有统计学意义(P<0.05)；实验组和对照组淋巴细胞TLR9蛋白荧光强度分别为37.39±18.36和19.51±11.13,差异有统计学意义(P<0.05)。2.外周血单个核细胞TLR2和TLR9 mRNA的检测结果：实验组和对照组TLR2 mRNA的相对表达量分别为0.209±0.226和0.356+0.310,差异无统计学意义(P>0.05)；实验组和对照组TLR9 mRNA的相对表达量分别为0.014+0.028和0.253±0.159,差异有统计学意义(P<0.05)。3.实验组和对照组血清TNF-α水平(pg/m1)分别为260.15+71.35和158.66±99.23,差异有统计学意义(P<0.05)。4.与临床资料的相关性分析：单核细胞TLR9蛋白荧光强度和HBeAg呈正相关(r=0.382,P<0.05)；TLR9 mRNA的相对表达量和PTA呈正相关(r=0.313,P<0.05)；TNF-α和PTA呈负相关(r=-0.372, P<0.05); TLR9 mRNA的相对表达量和单核细胞TLR9蛋白荧光强度呈正相关(r=0.459,P<0.01)。结论(1)TLR2主要表达在单核细胞上,淋巴细胞上表达很弱。TLR9在单核细胞和淋巴细胞上均有一定比例的表达。(2)TLR9表达降低与慢性重型乙肝的发病机理有关。(3)TLR9与慢性重型乙肝的病情严重程度呈负相关。TNF-α与慢性重型乙肝的病情严重程度呈正相关。

全文目录

摘要  4-6
ABSTRACT  6-9
目录  9-10
缩略词表  10-11
第一章前言  11-14
第二章材料与方法  14-24
  2.1 材料  14-17
  2.2 方法  17-24
第三章结果  24-31
  3.1 PBMC TLR2和TLR9流式检测结果  24-27
  3.2 RT-PCR检测PBMC TLR2和TLR9 mRNA的结果  27-29
  3.3 血清TNF-α结果  29
  3.4 淋巴细胞TLR9蛋白、单核细胞TLR9蛋白、TLR9 mRNA的相对表达量、TNF-α与临床资料的相关性分析  29-31
第四章讨论  31-35
第五章结论  35-36
参考文献  36-40
综述 Toll样受体在乙型病毒性肝炎的作用  40-50
  参考文献  46-50
致谢  50-51
攻读学位期间研究成果  51

慢性重型乙肝患者外周血单个核细胞Toll样受体2和9的表达研究

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