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大鼠急性脊髓损伤血红素氧合酶-1（HO-1）表达的研究

作　者: 葛哲超
导　师: 吕国华
学　校: 中南大学
专　业: 脊柱外科
关键词: 脊髓损伤 血红素氧化酶-1 免疫组织化学
分类号: R651.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 15次
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内容摘要


目的研究大鼠急性脊髓损伤后血红素氧合酶-1在脊髓组织中表达的变化。方法参照Allen法建SD大鼠脊髓损伤模型(使用10g的金属棒从2.5cm的高度垂直打击SD大鼠的T9-T10脊髓段),45只健康的SD大鼠随机分为三组：正常组(不做任何处理)、假手术组(仅做椎板切除术)、损伤组(SCI组)分为0.5h.4h.8h.16h.24h.48h及72h组。各组SD大鼠均为雌雄各半,为保证各实验大鼠具有可比性,均于术后动物麻醉清醒时给予Tarlov评分一次,SCI组Tarlov评分为5分者大鼠剔除实验(完全正常者没有评估的价值),Tarlov评分为4分及以下者大鼠继续实验,并及时补充相应组剔除的实验大鼠数量。每组在损伤后开始计时,到相应时间点处死动物,对损伤后早期不同时间点应用免疫组化、病理学及图像分析检测HO-1蛋白的表达。应用化学比色法检测不同时间点脊髓中HO活性的变化。结果本实验发现SCI组、假手术组及正常组中的脊髓组织均发现有HO-1的表达。棕黄色或棕褐色为HO-1免疫及原位杂交的阳性着色,这种着色位于细胞浆及突起的根部。在假手术组及正常对照组大鼠脊髓中,HO-1仅有少量的表达,其主要位于脊髓前角的运动神经元,呈散在的分布。SCI组在损伤后4h时HO-1的表达增加,在16h达到高峰,而48h时仍有表达,其主要的分布区域位于中央管周围的灰质和前角,也可见于白质的外侧索以及背侧柱的胶质细胞。而损伤段阳性的染色区域与其出血范围相似,并波及到损伤头侧段、损伤尾侧段背索。SCI组各时间点的HO-1的表达与假手术组及正常组相比较,除0.5h时间点大鼠脊髓组织中的HO-1的表达差别无统计学意义外,其余时间点的HO-1表达的比较均有统计学意义(P<0.05)。结论1.大鼠脊髓损伤后,损伤的脊髓组织中HO-1的表达增加,表明脊髓损伤能诱导HO-1的表达。2.HO-1在脊髓损伤后有明显的高表达,其参于了脊髓损伤的病理生理过程,对脊髓损伤后的脊髓组织具有一定的保护作用；大鼠正常的脊髓组织中只有少量HO-1的阳性表达。3.急性脊髓损伤后可以通过增加HO-1的表达来保护脊髓组织,减轻脊髓组织的损伤,保护神经细胞。

全文目录


中文摘要  4-6
ABSTRACT  6-10
英文缩略词表  10-11
前言  11-14
第一章 实验材料与实验方法  14-21
  1.1 主要试剂与药品  14
  1.2 主要仪器  14-15
  1.3 实验动物分组及模型制作  15-17
  1.4 实验动物的处置及标本制作  17
  1.5 HO-1定量检测—SABC免疫组织化学染色法  17-18
  1.6 HE染色  18-19
  1.7 HO活性测定  19
  1.8 凋亡细胞原位末端标记法(TUNEL)检测  19-20
  1.9 图像及数据的处理  20
  1.10 统计学分析与处理  20-21
第二章 结果  21-24
  2.1 动物SCI模型的成功性  21
  2.2 各组大鼠HO-1的免疫组化结果观察  21-22
  2.3 大鼠脊髓组织HE染色的炎性病灶数观察  22
  2.4 各组大鼠细胞凋亡情况  22-23
  2.5 HO活性的变化  23-24
第三章 讨论  24-30
第四章 结论  30-31
参考文献  31-34
附图  34-37
综述  37-47
  参考文献  43-47
致谢  47

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中图分类: > 医药、卫生 > 外科学 > 外科学各论 > 头部及神经外科学 > 脊髓
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