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青蒿素联合琥珀酸亚铁对小鼠肝细胞癌选择性抑制作用的实验研究

作　者: 潘雷
导　师: 邓小荣
学　校: 南昌大学
专　业: 外科学
关键词: 青蒿素琥珀酸亚铁人肝癌细胞SMMC-7721 抑制凋亡转铁蛋白转铁蛋白受体
分类号: R735.7
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
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内容摘要

目的:本试验研究青蒿素联合琥珀酸亚铁对人肝癌细胞SMMC-7721的选择性抑制作用,并检测肝癌组织中转铁蛋白及其受体的表达,初步探讨联合用药的作用机制。方法:1.动物模型的建立。将人肝癌细胞株SMMC-7721培养、传代,接种于小鼠腰背部皮下,制成小鼠荷瘤动物模型。2.实验分组及干预。将荷瘤小鼠随机分成4组,分别用青蒿素、琥珀酸亚铁、青蒿素加琥珀酸亚铁、生理盐水(对照组)对荷瘤小鼠进行干预,观察小鼠肿瘤体积的变化。3.抑瘤率的计算。记录肿瘤的最大直径、横径,计算肿瘤体积;称取肿瘤的质量,计算抑瘤率。4. TUNEL法检测肿瘤细胞的凋亡。组织石蜡切片使用原位末端终止法(TUNEL)检测细胞凋亡,计算凋亡指数(AI)。5.免疫组化SP法检测各治疗组肿瘤组织中转铁蛋白及其受体的表达。组织石蜡切片分别用免疫组化SP法检测各治疗组肿瘤组织中转铁蛋白及其受体的表达,显微镜下观察并记录结果。结果:1.采用皮下移植造模法,荷瘤小鼠动物模型造模成功率为72.5%。2.青蒿素和青蒿素联合琥珀酸亚铁与生理盐水相比,明显抑制荷瘤小鼠的肿瘤生长(P<0.05),其抑瘤率分别为33.21%和55.04%,两组间存在明显差异(P<0.05)。3.青蒿素和青蒿素联合琥珀酸亚铁与生理盐水相比,表现出明显的促凋亡作用,凋亡指数分别为13.13%和31.35%,差异有统计学意义(P<0.05)。4.对照组与琥珀酸亚铁组肿瘤组织中转铁蛋白及其受体与后两组相比呈高表达,差异有统计学意义(P<0.05)。前后两组组间相比差别无统计学意义(P>0.05)。结论:皮下移植造模法可以成功造模,基本满足实验要求。青蒿素和青蒿素联合琥珀酸亚铁对人肝癌细胞SMMC7721均有肿瘤抑制作用和促进肿瘤细胞凋亡的作用,但是联合用药作用更强。

全文目录

摘要  3-5
ABSTRACT  5-10
第1章引言  10-13
第2章材料与方法  13-20
  2.1 实验材料  13-15
    2.1.1 细胞株和实验动物  13
    2.1.2 主要仪器和设备  13-14
    2.1.3 主要试剂和药物  14-15
  2.2 方法与步骤  15-19
    2.2.1 动物模型的建立  15-16
      2.2.1.1 人肝癌SMMC-7721 细胞的培养及传代  15
      2.2.1.2 接种、建立动物模型  15-16
    2.2.2 实验分组  16
    2.2.3 药物干预  16
    2.2.4 观察与检测  16-19
      2.2.4.1 各处理组肿瘤体积及抑瘤率的计算  16
      2.2.4.2 TUNEL 法检测各处理组肿瘤细胞的调亡  16-17
      2.2.4.3 免疫组化 SP 法测定各处理组肿瘤组织中转铁蛋白受体的表达  17-18
      2.2.4.4 免疫组化 SP 法测定各处理组肿瘤组织中转铁蛋白受体的表达  18-19
  2.3 统计学处理  19-20
第3章结果  20-23
  3.1 建立小鼠移植瘤动物模型的情况  20
  3.2 各治疗组对荷瘤小鼠肿瘤生长的影响  20-21
  3.3 肿瘤细胞凋亡及凋亡指数（AI）  21-22
  3.4 肿瘤组织中转铁蛋白受体的表达  22
  3.5 肿瘤组织中转铁蛋白的表达  22-23
第4章讨论  23-26
  4.1 肝细胞癌动物模型的选择  23-24
  4.2 青蒿素联合琥珀酸亚铁对移植瘤的抑瘤作用和对肿瘤细胞凋亡的影响  24-25
  4.3 肿瘤组织中转铁蛋白及其受体的表达对青蒿素联合琥珀酸亚铁抑瘤作用和促凋亡作用的影响  25-26
第5章结论和展望  26-27
致谢  27-28
参考文献  28-30
附图  30-33
综述  33-45
攻读学位期间的研究成果  45

青蒿素联合琥珀酸亚铁对小鼠肝细胞癌选择性抑制作用的实验研究

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