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Pro-BDNF及其受体在大鼠急性心肌梗死的表达

作　者: 郭斌
导　师: 徐军美
学　校: 中南大学
专　业: 麻醉学
关键词: Pro-BDNF P75NTR Sortilin 心肌梗死
分类号: R542.22
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要


Pro-BDNF及其受体在大鼠急性心肌梗死的表达目的：检测脑源性神经营养因子前体(Pro-BDNF)及其受体P75NTR、Sortilin在大鼠急性心肌梗死后心肌的表达及变化过程。探讨Pro-BDNF及其受体在大鼠急性心肌梗死中的作用。方法：采用结扎左冠状动脉前降之建立大鼠急性心肌(AMI)模型,SD(Sprague-Dawley)大鼠随机分为Sham组(只穿线不结扎)6只,BSA组(术前30分钟给予10ml/kg BSA)36只,分别于术后1h、6h、1 d、3d、7d、14d处死大鼠(每个时间点6只大鼠),取心肌标本行免疫组化观察Pro-BDNF及其受体P75NTR、Sortilin在急性心肌梗死后梗死区、非梗死区表达的变化,应用Western Blot分析Pro-BDNF及其受体P75NTR、Sortilin在急性心肌梗死后分别在梗死区、边缘区、遥远区的蛋白表达变化。统计学处理：采用SPSS18.0统计软件,计量资料的实验数据以均数±标准差(x±s)表示,多组资料之间的比较采用重复测量资料的方差分析,组间比较采用(SNK),以P<0.05差异有统计学意义。结果：1.免疫组化显示Sham组心肌细胞和内皮细胞在梗死区、非梗死区均有微弱Pro-BDNF及其受体P75NTR、Sortilin阳性表达。梗死区BSA组Pro-BDNF及Sortilin、P75NTR术后显著阳性表达。非梗死区BSA组Pro-BDNF及Sortilin在术后6h、1d可见显著阳性表达,术后1h、3d、7d、14d均未见显著阳性表达。BSA组P75NTR在非梗死区各个时间点均未见显著阳性表达。2.应用Western Blot分析,以Tubulin作为内参,均与Sham组相比,BSA组Pro-BDNF及Sortilin在心肌梗死区术后1h时表达开始上调,术后6h显著上调,术后1d稍下降后继续上调,术后7d、14d稳定在高表达。在边缘区和遥远区BSA组Pro-BDNF及Sortilin术后1h微量表达,术后6h开始表达上调,术后1d表达显著上调,其后表达下降,术后3d、7d、14d均仅见微量表达。BSA组P75NTR在梗死区术后1h、6h表达开始上调,术后1d、3d显著上调,其后表达稍有所下降,术后7d、14仍可见明显上调。但BSA组P75NTR在边缘区和遥远区各个时间点均未见表达上调。结论：1.Pro-BDNF及其受体P75NTR、Sortilin在正常心肌细胞及血管内皮细胞中亦有分布。2.Pro-BDNF、Sortilin在心肌梗死区及非梗死区表达均增高,提示Pro-BDNF在大鼠急性心肌梗死中的表达变化,可能与诱导心肌细胞凋亡、降低血管新生和心肌重塑有关。3.下一步的研究重点在于探讨Pro-BDNF在急性心肌梗死发展及随后的心肌重塑中的角色作用。

全文目录


中文摘要  4-6
英文摘要  6-12
1. 前言  12-14
2. 大鼠急性心肌梗死模型的建立  14-22
  2.1 动物模型制备材料  14-15
    2.1.1 动物及分组  14
    2.1.2 主要仪器  14-15
    2.1.3 药物与试剂  15
  2.2 大鼠急性心肌梗死模型的建立方法  15-16
  2.3 心肌组织切片制备  16-17
  2.4. 免疫组化检测大鼠心肌梗死后Pro-BDNF、P75NTR、Sortilin蛋白  17-18
    2.4.1 主要仪器  17
    2.4.2 药物与试剂  17
    2.4.3 免疫组化检测实验方法  17-18
  2.5 Western Blot方法检测AMI后Pro-BDNF及其受体P75NTR、Sortilin蛋白表达变化  18-22
    2.5.1 主要仪器及设备  18
    2.5.2 药物与试剂  18-19
      2.5.2.1 主要试剂的配制  18-19
    2.5.3 蛋白质的测定  19-20
    2.5.4 Western Blot具体操作过程  20-22
3. 统计学处理  22
4. 结果  22-37
  4.1 免疫组化Pro-BDNF、P75NTR、Sortilin蛋白结果  22
  4.2 Western Blot方法检测心肌梗死后梗死区Pro-BDNF、P75NTR、Sortilin蛋白结果  22-37
5.讨论  37-39
6.结论  39-40
参考文献  40-44
综述  44-52
  参考文献  48-52
致谢  52

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中图分类: > 医药、卫生 > 内科学 > 心脏、血管（循环系）疾病 > 心脏疾病 > 心肌疾病 > 心肌梗塞
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