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目的探讨促红素对脑缺血大鼠脑组织是否有保护作用,探讨脑缺血急性期最佳的促红素给药频次,从而更有效地保护脑缺血急性期大鼠海马神经元,改善大鼠行为学缺损。方法将80只雄性SD(sprague-dawley,SD)大鼠随机分为3组:正常组、模型组、治疗组。除正常组外,其余2组均制成脑缺血再灌注模型;治疗组又分为3个亚组,各亚组之间促红素给药方法相同(腹腔注射)、剂量也相同(3000 IU/kg),仅给药频次不同,3次给药组为缺血即刻给1次,缺血后6h给1次,以及缺血后12h给1次;2次给药组为缺血即刻给1次、缺血后6h给1次;1次给药组仅为缺血即刻给1次。在脑缺血后24h对各组大鼠进行行为学评分,均在缺血24h后取材,分别用于HE染色观察病理形态变化、免疫组化染色分析海马区神经元B细胞淋巴瘤/白血病-2基因(b-cell lymphoma gene 2,Bcl-2)、B细胞淋巴瘤/白血病-2基因相关x蛋白(b-cell lymphoma gene 2 associated x protein,Bax)表达;另外用Western Blot测定海马组织半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(cysteine-containing aspartatespecific proteases,Caspase-3)的表达。结果神经行为学评分结果,2次给药组与3次给药组比模型组有显著的改善,P<0.05,差异有统计学意义,一次给药组与模型组相比改善不明显,P>0.05,差异无统计学意义;促凋亡蛋白Bax的表达量,治疗组3个亚组均远远低于模型组,P<0.05,差异有统计学意义;凋亡抑制蛋白Bcl-2的表达量,2次给药组与模型组相比明显增高,P<0.05,差异有统计学意义;1次给药组与3次给药组比较模型组,明显降低,P<0.05,差异有统计学意义;凋亡终末蛋白Caspase-3的表达量,治疗组中2次给药组和3次给药组明显低于模型组,P<0.05,差异有统计学意义;2次给药组Caspase-3的表达量又明显低于3次给药组,P<0.05,差异有统计学意义;1次给药组明显高于模型组,P<0.05,差异有统计学意义。结论促红素对脑缺血大鼠脑组织有保护作用;促红素对脑缺血大鼠神经行为学有改善作用;促红素能够通过抑制凋亡来保护海马神经元,促红素通过上调Bcl-2蛋白的表达,同时下调Bax蛋白的表达来抑制细胞凋亡。促红素可以抑制凋亡终末蛋白Caspase-3的表达;2次给药组具有明显的优势,大鼠脑缺血急性期内2次给药接近最佳的给药方法。
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