学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

rAAV2介导的靶向HIF-2α的siRNA增强胰腺癌细胞对健择敏感性的实验研究

作　者: 李军
导　师: 李德春
学　校: 苏州大学
专　业: 普通外科学
关键词: 胰腺癌 PANC-1细胞 HIF-2α RNA干扰 小干扰RNA 腺相关病毒 基因治疗 肿瘤缺氧 化疗 健择
分类号: R735.9
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
下　载: 29次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载
 

内容摘要


目的观察携带靶向HIF-2α基因的shRNA的2型重组腺相关病毒对体外培养的人胰腺癌细胞增殖、凋亡作用及其对化疗药物健择的增敏作用。方法将rAAV2-EGFP-U6- HIF-2α-siRNA转染入人胰腺癌细胞株PANC-1中,以绿色荧光蛋白(GFP)基因为报告基因,用荧光显微镜和流式细胞仪观察病毒转染效率。分别在常氧和缺氧条件下培养细胞,用逆转录聚合酶连反应、免疫细胞化学法检测PANC-1细胞HIF-2αmRNA和蛋白表达,MTT法检测不同浓度的化疗药物健择对PANC-1细胞的增殖抑制作用,MTT法检测缺氧条件下rAAV2-EGFP- U6-HIF-2α-siRNA联合化疗药物健择对PANC-1细胞增殖能力的影响, Annexin V-FITC/PI双染检测细胞凋亡。结果rAAV2-EGFP-U6-HIF-2α-siRNA被成功地转染入PANC-1细胞中,FCM测定转染效率在40%左右。与阴性对照组和空白对照组比较,实验组PANC-1细胞的HIF-2αmRNA和蛋白的表达明显受到抑制。不同浓度的健择(0.25μg/mL -4μg/mL)作用48小时后均对细胞增殖有抑制作用,并随剂量的增加抑制率逐渐增大(F=859.054,P<0.05),相同药物浓度下,常氧下的细胞抑制率大于缺氧条件下的细胞抑制率(F=219.471,P<0.05)。在缺氧状态下,联合组对PANC-1细胞的生长抑制率显著高于单纯转染组和单用健择组,差异均有统计学意义(F=39.279,P<0.05),且联合组PANC-1细胞凋亡率最高(P<0.05)。结论rAAV2-EGFP-U6-HIF-2α-siRNA转染PANC-1细胞后能降低PANC-1细胞株HIF-2αmRNA及蛋白的表达,抑制PANC-1细胞株增殖,促进细胞凋亡并能提高PANC-1细胞株对化疗药物健择的敏感性。

全文目录


中文摘要  3-4
Abstract  4-7
前言  7-9
材料  9-10
方法  10-16
结果  16-22
讨论  22-27
结论  27-28
参考文献  28-33
综述：RNAI 技术在胰腺癌研究中的应用  33-42
缩略词表  42-43
攻读学位期间公开发表的论文  43-44
致谢  44-46
详细摘要  46-48

相似论文

  1. 乌贼墨—黄芪合剂缓解化疗副作用研究,R285.5
  2. 聚乙烯亚胺修饰糖脂共聚物介导基因治疗研究,R450
  3. 恩替卡韦联合TACE治疗伴乙肝病毒复制的原发性肝癌效果分析,R735.7
  4. 甜菜夜蛾信息素结合蛋白的表达动态及其受交配和钟基因沉默的影响,S433.4
  5. 棉铃虫NADPH-细胞色素P450还原酶基因的克隆、时空表达及RNA干扰,S435.622.3
  6. 马铃薯甲虫脯氨酸脱氢酶基因的克隆、表达分析及其dsRNA的发酵生产,S435.32
  7. 几种新型杀虫剂对马铃薯甲虫的毒力及两类靶标的分子克隆,S435.32
  8. 慢病毒载体介导的RNAi特异性沉默猪Myostatin基因的研究,S828
  9. 郁仁存教授学术思想和临床经验总结与益气活血解毒方联合化疗治疗晚期胃癌的临床观察,R249
  10. 新型非病毒基因转染体系的构建及其在骨髓间充质干细胞基因重组中的应用,R346
  11. MCFP对肝癌细胞生物行为学影响初步研究,R735.7
  12. 灰飞虱功能基因的克隆及其RNAi致死效应,S435.112.3
  13. 常规化疗联合节拍化疗对乳腺癌裸鼠移植瘤的实验研究,R737.9
  14. CIF与CEF方案用于Ⅱ期乳腺癌辅助化疗的临床观察,R737.9
  15. 化疗对卵巢上皮性癌端粒长度的影响,R737.31
  16. RNAi技术抗呼吸道合胞病毒的实验研究,R725.6
  17. RNA干扰抑制ERCC1对非小细胞肺癌化疗敏感性的影响（体外实验）,R734.2
  18. 复发性卵巢癌的再次手术治疗与生存期的相关因素分析,R737.31
  19. 明胶海绵微粒化疗栓塞肝癌疗效的双源CT灌注成像评估,R735.7
  20. pIRES2-EGFP-hIL-12-HSP70真核表达载体的构建及对7402肝癌细胞生长的影响,R346
  21. 短发夹RNA表达载体对2型单纯疱疹病毒UL54干扰效应的研究,R346

中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 消化系肿瘤 > 胰腺肿瘤
© 2012 www.xueweilunwen.com