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成纤维细胞分泌的细胞因子在口腔扁平苔藓中作用的初步探讨

作　者: 时伯红
导　师: 戚向敏
学　校: 山东大学
专　业: 口腔临床医学
关键词: 成纤维细胞结缔组织生长因子白介素-6 转化生长因子-β1 基质金属蛋白酶-9 趋化生长因子-10 酶联免疫吸附剂测定技术
分类号: R781.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 44次
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内容摘要

目的：口腔扁平苔藓(Oral Lichen Planus, OLP)是口腔黏膜中常见的、病因不明的慢性炎症性疾病,其发病率仅次于复发性阿弗他溃疡,可单独或同时累及皮肤发病。由于存在地区和种族的差异,很难精确计算人群中OLP的患病率,据统计其患病率约为0.51%,好发于中年女性。OLP的病损一般呈对称分布,可发生于口腔任何部位的黏膜表面,尤其好发于磨牙处的颊部黏膜,还常见于舌及牙龈等部位。部分病损可发生恶变,世界卫生组织(WHO)于1996年正式将OLP归为可能的癌前状态。OLP临床上具有明显及易辨认的特征：以小丘疹组成的白色花纹或白色斑块为主的持续性病损。虽然有学者建议将其总的分为两大类,即网纹型和糜烂/溃疡型,但临床上还存在其他的形式如斑块、萎缩或水疱等病损。其典型的病理学特征表现为：上皮过度不全角化,固有层密集的淋巴细胞浸润带,基底膜断裂以及基底细胞液化变性。1869年Wilson等首先报道口腔扁平苔藓,目前该病的病因和发病机制尚无明确定论。近年来免疫机制的紊乱引起了广大学者的重视和认可,认为抗原特异性和非特异性机制在口腔扁平苔藓发病中可能起了重要作用。该疾病具有迁延反复、病程冗长、久治不愈的特点,目前还没有一个积极有效的治疗策略。因此,深入探讨OLP的发病机理,并进而探索各种新的治疗方法己成为当前OLP研究备受关注的领域。目前口腔扁平苔藓的研究热点都集中于带状浸润的淋巴细胞、上皮细胞以及它们分泌的细胞因子。当前比较认同的观点是：OLP是由T细胞介导的自身免疫性疾病。其中细胞毒性T细胞(CD8+细胞)触发口腔上皮细胞凋亡造成局部损害,激活的上皮细胞和淋巴细胞的堆积成为特异性自身抗原从而启动炎症过程,具体表现为慢性炎症和/或自身免疫性疾病。在这过程中上皮细胞和淋巴细胞还通过自身分泌的细胞因子在慢性炎症反应过程及自身免疫性疾病等方面发挥重要作用。然而存在于人体大部分组织的成纤维细胞也参与了组织创伤、炎症后的修复过程,被认为在创面愈合过程中发挥重要的作用,如形成肉芽组织。成纤维细胞功能受损或代谢失调在许多疾病中起着重要致病作用,已被证实与多种疾病有关,如纤维化疾病,类风湿关节炎、慢性阻塞性肺疾病(COPD)等。但对于口腔扁平苔藓病损区黏膜结缔组织中成纤维细胞(fibroblast, FB)在该病所起作用的知之甚少。为探讨口腔扁平苔藓中成纤维细胞所起的作用,本实验对成纤维细胞分泌的部分细胞因子进行了研究。实验采用酶联免疫吸附剂测定技术(ELISA)对体外培养的人正常口腔黏膜与口腔扁平苔藓黏膜成纤维细胞分泌的结缔组织生长因子(CTGF)、白介素-6(IL-6)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、趋化因子-10(CXCL-10)蛋白水平的检测,以期为口腔扁平苔藓的病因研究提供理论依据,同时为临床治疗该疾病提供新的思路和方法。方法：1.收集临床及病理确诊的口腔扁平苔藓黏膜12例及正常口腔黏膜9例,进行体外成纤维细胞培养。选用生长状态良好的第3～7代细胞取其上清液,采用酶联免疫吸附剂测定技术(ELISA)检测其结缔组织中成纤维细胞分泌的细胞因子CTGF、IL-6、TGF-β1、MMP-9和CXCL-10。实验结果采用平均光密度(optical density, OD)值表示。2、应用SPSS16.0统计学分析软件分析所检测细胞因子蛋白OD值,以均数和标准差(X±s)描述。显著性检验采用单因素方差分析,组间比较采用t检验。P<0.05被认为有统计学意义。结果：1. ELISA检测发现口腔扁平苔藓黏膜成纤维细胞分泌的CTGF和IL-6蛋白的量高于正常口腔黏膜成纤维细胞分泌的量,且其两组OD值存在显著性差异(P<0.05)。2、ELISA检测发现TGF-β1、MMP-9和CXCL-10在口腔扁平苔藓黏膜成纤维细胞分泌蛋白的量较正常口腔黏膜成纤维细胞分泌的量略有升高趋势,但两组OD值差异无统计学意义(P>0.05)。结论：口腔扁平苔藓成纤维细胞中分泌的与组织修复密切相关的CTGF以及具有双重作用的IL-6表达量增多；而同样具有双向转化作用的TGF-β1以及被视为具有促进炎症发展的MMP-9、CXCL-10只具有升高的趋势。结果表明OLP中成纤维细胞促炎作用不明显,以促进病变组织修复为主。本结果提示我们成纤维细胞分泌部分细胞因子在OLP的发生发展及愈后方面发挥着重要的作用,为口腔扁平苔藓的病因研究提供了理论依据,同时也为临床上口腔扁平苔藓的治疗提供了新的思路。

成纤维细胞分泌的细胞因子在口腔扁平苔藓中作用的初步探讨

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