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降解胺苯磺隆的土壤真菌的分离与鉴定

作　者: 邹坤
导　师: 柏连阳
学　校: 湖南农业大学
专　业: 植物保护
关键词: 胺苯磺隆微生物降解特性真菌菌株青霉菌霉
分类号: S154.3
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

本文针对易对水稻产生药害的磺酰脲类除草剂胺苯磺隆,在自然条件下难于降解的问题,从农药厂分离筛选出了一株对胺苯磺隆降解效果很好的真菌,并研究其降解特性以及生物学特性,研究结果如下：(1)23株有较好降解效果的菌株是从胺苯磺隆污染的土壤中富集筛选出的,通过高效液相色谱法挑选出了对胺苯磺隆降解效果最好的、能以胺苯磺隆为唯一碳源生长的菌株,命名为L5。通过形态学、典型培养基培养、rDNA-ITS序列片段分析和同源性比较,鉴定其为青霉菌霉(Penicillium sp.)菌。(2)L5的生物学特性试验结果表明25℃是L5菌丝生长的最适温度,6.0是其生长最适pH值；20℃是其孢子萌发最适温度,5.0是其生长最适pH值,高湿环境有利于孢子的萌发；PDA培养基是最适合L5生长的培养基；L5更适合在全暗的条件下生长。(3)通过胺苯磺隆作为唯一碳源培养基试验确定了L5降解胺苯磺隆的的最优条件：20mg/L的初始胺苯磺隆浓度、8%(体积分数)的接种量、6.5的pH值以及28℃的温度。用动力学一级方程Ct=25.112·e-0·0219t拟合最优条件下的降解曲线,R2=0.9642。在最优条件下连续培养120h,可降解92.87%的胺苯磺隆。L5的细胞可溶性酶可在72h降解86.32%的胺苯磺隆,和菌株降解效果相当,证明L5降解胺苯磺隆中起主要作用是由于其细胞可溶性酶的存在。将L5接种于在校园中采集的自然风干土和灭菌土,L5在25d可分别降解90.87%和88.33%的两种土壤中的胺苯磺隆,两种土壤中胺苯磺隆的自然降解率分别只有13.92%和7.95%,由此说明L5具有应用于解决大自然土壤中胺苯磺隆残留问题的前景。

全文目录

摘要  4-5
Abstract  5-10
第一章文献综述  10-22
  1 磺酰脲类除草剂简介  10-15
    1.1 磺酰脲类除草剂的应用概况  10-11
    1.2 磺酰脲类除草剂的除草方式和作用机理  11
    1.3 磺酰脲类除草剂在自然条件下的降解途经  11-12
      1.3.1 微生物降解途经  11-12
      1.3.2 化学水解途经  12
      1.3.3 光降解途经  12
    1.4 磺酰脲类除草剂残留检测方法  12-15
      1.4.1 磺酰脲类除草剂提取净化方法  13-14
      1.4.2 磺酰脲类除草剂仪器检测方法  14
      1.4.3 磺酰脲类除草剂生物测定法  14-15
    1.5 磺酰脲类除草剂在使用中存在的不足及发展前景  15
  2 胺苯磺隆的性质、特点及应用前景  15-16
    2.1 胺苯磺隆的结构及理化性质  15-16
    2.2 胺苯磺隆国内应用范围及特点  16
    2.3 胺苯磺隆应用中存在的不足及发展前景  16
  3 微生物降解农药的研究概述  16-20
    3.1 降解农药的微生物种类  17-18
    3.2 磺酰脲类除草剂的微生物降解研究进展  18-19
      3.2.1 国内外研究进展  18
      3.2.2 降解环境的研究进展  18-19
    3.3 降解胺苯磺隆的微生物研究进展  19
    3.4 研究农药微生物降解的基本方法  19-20
      3.4.1 农药微生物降解菌的分离与筛选  19-20
      3.4.2 微生物降解农药的方式  20
  4 研究目的与意义  20-22
第二章土壤中胺苯磺隆降解菌的分离筛选及鉴定  22-39
  1 试验材料  22-24
    1.1 土样采集  22-23
    1.2 培养基  23
    1.3 供试农药与标样  23
    1.4 仪器设备  23-24
  2 试验方法  24-28
    2.1 土壤微生物的富集与分离纯化  24
    2.2 胺苯磺隆降解菌的筛选  24-25
    2.3 降解菌L5的鉴定  25-26
      2.3.1 降解菌L5的形态学分类鉴定  25
      2.3.2 降解菌L5的特定培养基的鉴定  25
      2.3.3 降解菌L5的rDNA-ITS分子标记法鉴定  25-26
    2.4 降解菌L5的生物学特性研究  26-28
      2.4.1 培养基种类对降解菌L5的菌丝生长及产孢量的影响  26-27
      2.4.2 不同碳源对降解菌L5的菌丝生长及产孢量的影响  27
      2.4.3 不同氮源对降解菌L5的菌丝生长及产孢量的影响  27
      2.4.4 光照对降解菌L5的菌丝生长及产孢量的影响  27-28
      2.4.5 温度对降解菌L5的菌丝生长及产孢量的影响  28
      2.4.6 不同pH值对降解菌L5的菌丝生长及产孢量的影响  28
      2.4.7 不同湿度对降解菌L5的菌丝生长及产孢量的影响  28
  3 结果与分析  28-37
    3.1 菌株的分离纯化  28-29
    3.2 胺苯磺隆降解菌的筛选  29-31
      3.2.1 胺苯磺隆的高效液相色谱测定  29-30
      3.2.2 土壤微生物筛选结果  30-31
    3.3 降解菌L5的鉴定  31-33
      3.3.1 降解菌L5的形态学分类鉴定  31-32
      3.3.2 降解菌L5的培养基鉴定  32
      3.3.3 降解菌的L5的rDNA-ITS分子标记法鉴定  32-33
    3.4 降解菌L5的生物学特性研究  33-37
      3.4.1 培养基种类对降解菌L5的菌丝生长速率及产孢量的影响  33-34
      3.4.2 不同碳源对降解菌L5的菌丝生长及产孢量的影响  34-35
      3.4.3 不同氮源对降解菌L5的菌丝生长及产孢量的影响  35
      3.4.4 光照对降解菌L5的菌丝生长及产孢量的影响  35-36
      3.4.5 温度对降解菌L5的菌丝生长及产孢量的影响  36
      3.4.6 不同pH值对降解菌L5的菌丝生长及产孢量的影响  36-37
      3.4.7 不同湿度对降解菌L5的孢子萌发的影响  37
  4 小结与讨论  37-39
第三章降解菌L5的降解特性的研究  39-49
  1 试验材料  39-40
    1.1 胺苯磺隆原药  39
    1.2 土壤来源  39
    1.3 培养基与试剂  39
    1.4 仪器设备  39-40
  2 试验方法  40-42
    2.1 胺苯磺隆降解菌L5的降解特性  40-41
      2.1.1 接种量对L5降解效果的影响  40
      2.1.2 胺苯磺隆浓度对L5降解效果的影响  40
      2.1.3 pH值对L5降解效果的影响  40
      2.1.4 温度对L5降解效果的影响  40-41
      2.1.5 最优条件下L5对胺苯磺隆的降解动力学  41
    2.2 L5可溶性酶液对胺苯磺隆的降解效果  41-42
    2.3 L5对土壤残留胺苯磺隆的降解效果  42
  3 结果与分析  42-47
    3.1 胺苯磺隆降解菌L5的降解特性  42-46
      3.1.1 接种量对L5降解效果的影响  42-43
      3.1.2 胺苯磺隆浓度对L5降解效果的影响  43-44
      3.1.3 pH值对L5降解效果的影响  44
      3.1.4 温度对L5降解效果的影响  44-45
      3.1.5 最优条件下L5对胺苯磺隆的降解动力学  45
      3.1.6 L5降解胺苯磺隆的曲线  45-46
    3.2 L5可溶性酶液对胺苯磺隆的降解效果  46-47
    3.3 L5对土壤残留胺苯磺隆的降解效果  47
  4 小结  47-49
第四章总结  49-51
参考文献  51-55
致谢  55-56
作者简介  56-57
攻读硕士学位期间科研学术成果  57-58

降解胺苯磺隆的土壤真菌的分离与鉴定

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