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蛇床子素对LPS诱导的小胶质细胞活化的影响

作　者: 邓华明
导　师: 黄丰
学　校: 暨南大学
专　业: 中药学
关键词: 蛇床子素神经退行性疾病小胶质细胞脂多糖炎症
分类号: R285
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

目的：本实验采用脂多糖(LPS)刺激小胶质细胞株BV-2建立神经性炎症模型,研究蛇床子素对LPS诱导小胶质细胞活化所分泌的炎症因子的抑制作用,并探讨其抑制小胶质细胞活化作用的分子机制。方法：用LPS刺激小胶质细胞株BV-2造成神经性炎症模型,使用硝酸还原酶法和一氧化氮合酶分型法检测蛇床子素对炎症介质NO、iNOS酶活性的抑制作用；采用ELISA检测蛇床子素对IL-1、PGE2的影响；采用Western blotting检测蛇床子素对iNOS、COX-2、TLR4蛋白质水平的影响；采用qPCR检测蛇床子素对miR-155的影响。结果：1、与正常组相比,0.02-2.5μg/mL的LPS分别作用于BV-2细胞24h后,细胞活性无显著性变化；0.1μg/mL LPS刺激BV-2细胞,炎症介质NO、IL-1β、PGE2的表达,iNOS、COX-2、TLR4的蛋白表达以及miR-155的基因表达呈时间依赖性增加。2、与正常组相比,0.3-27μg/mL (1.7-135μM)蛇床子素分别作用于BV-2细胞24h后,细胞活性无显著性变化。3、1-9μg/mL (5-45μM)蛇床子素能显著抑制LPS诱导BV-2细胞所产生的NO、iNOS酶活性及其蛋白水平,并呈浓度依赖性。4、1-9μg/mL(5-45μM)蛇床子素能显著抑制LPS诱导BV-2细胞所产生的PGE2和COX-2蛋白质的表达,并呈浓度依赖性。5、1-9μg/mL(5-45μM)蛇床子素能显著抑制LPS诱导BV-2细胞所产生的IL-1β,并呈浓度依赖性。6、1-9μg/mL(5-45μM)蛇床子素能显著抑制LPS诱导BV-2细胞所产生的TLR4蛋白表达,并呈浓度依赖性。7、1-9μg/mL(5-45μM)蛇床子素能显著抑制LPS诱导BV-2细胞所产生的miR-155基因表达,并呈浓度依赖性。结论：1-9μg/mL(5-45μM)的蛇床子素能抑制LPS诱导的BV-2细胞活化后NO、PGE2及IL-1β等炎性因子的生成,并呈浓度依赖性,其作用的分子机制可能与其调控小胶质细胞中TLR4、iNOS、COX-2蛋白和miR-155基因表达有关。

全文目录

摘要  4-6
Abstract  6-10
前言  10-23
  1 神经退行性疾病与小胶质细胞概述  10-13
  2 Toll样受体4介导的信号通路  13-15
  3 微小RNA  15-17
  4 神经退行性疾病抗炎类药物的研究现状和进展  17-18
  5 中药的研究概况  18-19
  6 蛇床子素  19-21
  7 本论文研究内容  21-22
  8 创新点  22-23
第一章 LPS诱导小胶质细胞神经性炎症模型的建立  23-40
  1 实验材料  23-24
  2 主要实验试剂与溶液的配制  24-26
  3 实验方法  26-32
  4 实验结果  32-40
第二章蛇床子素抑制LPS诱导BV-2细胞活化  40-55
  1 实验材料  40
  2 主要实验试剂与溶液的配制  40
  3 实验方法  40-43
  4 实验结果  43-55
讨论  55-63
  1 LPS诱导小胶质细胞神经性炎症模型的建立  55-57
  2 蛇床子素对LPS诱导的BV-2细胞活化的抑制作用  57-63
结论  63-64
参考文献  64-73
硕士期间发表文章  73-74
致谢  74

蛇床子素对LPS诱导的小胶质细胞活化的影响

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