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六味地黄丸含药血清对体外培养兔椎间盘Ⅰ型Ⅱ型胶原表达的影响

作　者: 谭亲民
导　师: 田心义
学　校: 湖南中医药大学
专　业: 中医骨伤科学
关键词: 推间盘源性腰痛六味地黄丸 Ⅰ型胶原 Ⅱ型胶原椎间盘体外培养
分类号: R285.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

目的：观察六味地黄丸含药血清对TNF-α致伤兔椎间盘Ⅰ型、Ⅱ型胶原的影响,探讨六味地黄丸是否对椎间盘细胞外基质具有保护作用。方法：15只实验兔随机分为空白第1天组(A组)、空白第14天组(B组)、TNF-α组(C组)、含六味地黄丸血清组(D组),TNF-α+含六味地黄丸血清组(E组),手术切取T12-L5椎间盘,其中T12-L2髓核和纤维环行光镜观察,L2-L5髓核和纤维环行Ⅰ型、Ⅱ型胶原RT-PCR检测及Western blot测定。空白第1天组于分组后即行髓核和纤维环光镜观察、胶原测量。建立椎间盘体外培养体系,其中TNF-α组培养液中另含5ng/ml TNF-α；含六味地黄丸血清组另含六味地黄丸血清10%；TNF-α+含六味地黄丸血清组含5ng/mL TNF-α及六味地黄丸血清10%。于实验的第14天收集其余四组椎间盘,分别行光镜观察和胶原测量。结果：1、光镜观察：A、B、E、C组细胞数及胶原含量依次减少2、RT-PCR及Western blot检测：B组与A组比较,Ⅰ型胶原增加,Ⅱ型胶原减少(p<0.01)；C组与B组比较,Ⅰ型胶原增加,Ⅱ型胶原减少趋势更明显(p<0.01)；E组与C组比较,Ⅰ型胶原增加,Ⅱ型胶原减少趋势减缓(p<0.01)结论：六味地黄丸可通过对抗TNF-α对Ⅱ型胶原的抑制作用,延缓椎间盘的退变,对椎间盘细胞外基质具有保护作用,为补肾法治疗椎间盘源性腰痛提供实验依据。

全文目录

摘要  7-9
Abstract  9-11
引言  11-13
动物实验  13-23
  1. 实验材料  13-15
    1.1 实验动物  13
    1.2 实验药物  13
    1.3 主要仪器和设备  13-14
    1.4 主要试剂  14-15
  2. 实验方法  15-19
    2.1 血清制备  15
    2.2 动物分组  15
    2.3 建立整体椎间盘体外培养体系  15-16
    2.4 染色、光镜观察  16-17
    2.5 RT-PCR检测  17-18
    2.6 Western blot检测  18-19
    2.7 统计学分析  19
  3. 实验结果与分析  19-23
讨论  23-40
  1. 现代医学对盘源性腰痛的认识  23-32
    1.1 发病机制  23-24
    1.2 肿瘤坏死因子对椎间盘退变的影响  24-26
    1.3 椎间盘胶原概述  26-29
    1.4 椎间盘退变与Ⅰ型、Ⅱ型胶原的关系  29-31
    1.5 现代医学对椎间盘源性腰痛的治疗  31-32
  2. 椎间盘体外培养系统  32-33
  3. 中医学对腰痛的认识  33-37
    3.1 中医学的认识  33-35
    3.2 中医学对椎间盘源性腰痛的治疗  35-36
    3.3 六味地黄丸药理研究  36-37
  4. 中药对胶原纤维的影响  37-38
  5. 结论  38
  6. 展望  38-40
致谢  40-41
参考文献  41-49
附录  49-52
综述  52-66
  参考文献  61-66

六味地黄丸含药血清对体外培养兔椎间盘Ⅰ型Ⅱ型胶原表达的影响

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