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γ-氨基丁酸和头孢曲松钠脂质体制备技术的研究

作　者: 刘永坤
导　师: 张永忠
学　校: 东北农业大学
专　业: 农产品加工及贮藏工程
关键词: 脂质体包封率 γ-氨基丁酸头孢曲松钠稳定性
分类号: TQ463.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

γ-氨基丁酸是广泛分布于动植物中的一种非蛋白质氨基酸,也是哺乳动物脑、脊髓中的抑制性神经传递物质。在人或动物体内,它参与脑循环生理活动,具有抑制血压上升,改善脑机能,保护脑神经等诸多作用。头孢曲松钠为第三代头孢菌素,对绝大多数革兰氏阳性菌、阴性菌十分敏感。它具有耐酶低毒、组织穿透力强及消除半衰期长等特点,是目前半衰期最长的头孢菌素之一,在治疗下呼吸道、皮肤组织等感染及细菌性败血症方面并取得显著的疗效。本课题主要研究了γ-氨基丁酸脂质体和头孢曲松钠脂质体的制备工艺。在确立出脂质体制备方法和包封率测定方法的基础上,采用单因素试验和四因素三水平正交试验设计对各因素的水平进行筛选,通过极差分析,最终确定脂质体的最佳制备条件。采用醋酸钙梯度法制备γ-氨基丁酸脂质体,单因素试验和正交试验的结合,确定的最佳制备条件为:药脂比为1:20,卵磷脂与胆固醇的质量比为4:1,醋酸钙浓度为0.12mol/L,孵育温度为50℃。此条件下制得的脂质体平均包封率为91.4%;采用逆相蒸发法制备头孢曲松钠脂质体的最佳制备条件为:头孢曲松钠和卵磷脂的质量比为1:10,头孢曲松钠和胆固醇的质量比为1:4,孵育温度为55℃,水化介质(Tris-HCl缓冲液)加入量为20mL,此条件下制得的脂质体平均包封率为31.26%。通过透射电镜对脂质体进行显微形态观察,得到脂质体均为完整圆球形或椭圆形的球粒,粒子分散较均匀。γ-氨基丁酸脂质体平均粒径为55nm,而头孢曲松钠脂质体平均粒径为45nm。在4℃和25℃下,通过对脂质体外观形态观察和粒径、泄漏率、MDA值的测定研究了脂质体的物理、化学短期稳定性。经研究表明,在25℃时,随着时间的增长,脂质体粒子会聚集、融合,粒径增大,泄漏率增加,膜材磷脂有一定程度氧化,MDA值增加;而在4℃时,则可明显抑制了脂质体的聚集、融合,减缓了所载物质的泄漏和MDA值的增加,提高脂质体的稳定性。

全文目录

中文摘要  10-11
英文摘要  11-13
1 前言  13-22
  1.1 概述脂质体  13-19
    1.1.1 脂质体的定义  13
    1.1.2 脂质体的组成与结构  13-14
    1.1.3 脂质体的分类  14
    1.1.4 脂质体的特点  14-15
    1.1.5 国内外脂质体制备方法的研究进展  15-17
    1.1.6 脂质体的应用  17-19
  1.2 预载的生物活性物质  19-21
    1.2.1 γ-氨基丁酸  19-20
    1.2.2 头孢曲松钠  20-21
  1.3 本研究的目的与意义  21-22
2 材料与方法  22-31
  2.1 仪器  22
  2.2 材料  22-23
  2.3 γ-氨基丁酸脂质体制备及稳定性研究的试验方法  23-27
    2.3.1 γ-氨基丁酸检测方法的确立  23
    2.3.2 γ-氨基丁酸标准曲线的绘制  23
    2.3.3 γ-氨基丁酸标准液精密度  23
    2.3.4 γ-氨基丁酸脂质体包封率测定方法的回收率试验  23
    2.3.5 γ-氨基丁酸脂质体包封率的测定  23-24
    2.3.6 γ-氨基丁酸脂质体制备方法的筛选  24
    2.3.7 醋酸钙梯度法制备γ-氨基丁酸脂质体的单因素试验  24-25
    2.3.8 正交设计确定γ-氨基丁酸脂质体的最佳制备方法  25
    2.3.9 γ-氨基丁酸脂质体的形态观察  25-26
    2.3.10 γ-氨基丁酸脂质体稳定性的研究  26-27
  2.4 头孢曲松钠脂质体制备及稳定性研究的试验方法  27-31
    2.4.1 头孢曲松钠检测波长的确立  27
    2.4.2 头孢曲松钠标准曲线的绘制  27
    2.4.3 头孢曲松钠标准液的精密度  27
    2.4.4 头孢曲松钠脂质体包封率测定方法的选择  27-28
    2.4.5 头孢曲松钠脂质体包封率测定方法回收率的试验  28
    2.4.6 头孢曲松钠脂质体包封率的测定  28
    2.4.7 头孢曲松钠脂质体制备方法的选择  28-29
    2.4.8 逆相蒸发法制备头孢曲松钠脂质体的单因素试验  29
    2.4.9 正交试验设计优化头孢曲松钠脂质体制备条件  29-30
    2.4.10 头孢曲松钠脂质体的外观  30
    2.4.11 头孢曲松钠脂质体的形态观察  30
    2.4.12 头孢曲松钠脂质体的泄漏率  30
    2.4.13 头孢曲松钠脂质体磷脂的氧化程度  30-31
3 结果与分析  31-45
  3.1 γ-氨基丁酸脂质体制备及稳定性研究的试验结果  31-38
    3.1.1 γ-氨基丁酸检测方法的确立  31
    3.1.2 γ-氨基丁酸的标准曲线  31-32
    3.1.3 γ-氨基丁酸标准液精密度试验结果  32
    3.1.4 γ-氨基丁酸脂质体包封率测定方法的回收率试验结果  32
    3.1.5 γ-氨基丁酸脂质体制备方法的筛选结果  32-33
    3.1.6 醋酸钙梯度法制备γ-氨基丁酸脂质体的单因素试验  33-35
    3.1.7 正交设计试验优化γ-氨基丁酸脂质体的制备条件  35-36
    3.1.8 γ-氨基丁酸脂质体的形态观察  36
    3.1.9 γ-氨基丁酸脂质体稳定性的研究  36-38
  3.2 头孢曲松钠脂质体制备及稳定性研究的试验结果  38-45
    3.2.1 头孢曲松钠检测波长的确立  38
    3.2.2 头孢曲松钠的标准曲线  38-39
    3.2.3 头孢曲松钠标准液的精密度试验  39
    3.2.4 头孢曲松钠包封率测定方法的选择  39
    3.2.5 头孢曲松钠包封率测定方法回收率的试验  39
    3.2.6 头孢曲松钠脂质体制备方法的选择结果  39-40
    3.2.7 逆相蒸发法制备头孢曲松钠脂质体的单因素试验  40-42
    3.2.8 正交试验设计优化头孢曲松钠脂质体制备条件  42
    3.2.9 头孢曲松钠脂质体脂质体外观  42-43
    3.2.10 头孢曲松钠的形态观察  43
    3.2.11 脂质体的泄漏率  43-44
    3.2.12 脂质体磷脂的氧化程度  44-45
4 讨论  45-48
  4.1 γ-氨基丁酸脂质体脂质体制备方法的筛选  45
  4.2 醋酸钙法制备脂质体的机制  45
  4.3 制备γ-氨基丁酸脂质体的单因素试验  45-48
    4.3.1 醋酸钙浓度  45-46
    4.3.2 药脂比  46
    4.3.3 卵磷脂与胆固醇的质量比  46
    4.3.4 孵育温度  46-47
    4.3.5 孵育时间  47-48
5 结论  48-49
致谢  49-50
参考文献  50-56
攻读学位期间发表的学术论文  56

γ-氨基丁酸和头孢曲松钠脂质体制备技术的研究

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