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石菖蒲活性成分β-细辛醚抗老年痴呆模型大鼠海马细胞凋亡作用及机制

作　者: 李成冲
导　师: 牛英才
学　校: 佳木斯大学
专　业: 药剂学
关键词: 老年性痴呆石菖蒲 β-细辛醚细胞凋亡 PT-PCR
分类号: R285.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
下　载: 288次
引　用: 2次
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内容摘要

目的探讨石菖蒲的活性成分β-细辛醚抗Aβ1-42双侧海马注射诱导的AD模型大鼠海马神经细胞凋亡的作用及其分子机制。方法成年雄性SD大鼠140只,随机分为空白对照组、假手术对照组、模型对照组、盐酸多奈哌齐对照组、β-细辛醚低剂量组(12.5 mg/kg·d)、β-细辛醚中剂量组(25 mg/kg·d)和β-细辛醚高剂量组(50 mg/kg·d)。采用双侧海马注射Aβ1-42诱导老年痴呆大鼠海马神经细胞凋亡模型。造模后7 d给药,灌胃给药28 d。通过TUNEL检测海马细胞凋亡,采用免疫组化检测Bax、Bcl-2和Caspase-3蛋白的表达;实时定量RT-PCR检测Bax、Bcl-2和Caspase-3 mRNA表达;采用免疫蛋白印迹法检测Bax、Bcl-2和Caspase-3蛋白的表达。结果TUNEL法检测大鼠海马细胞凋亡结果表明:β-细辛醚低剂量组[(32.0±5.0)凋亡细胞/mm2]、中剂量组[(24.4±5.5)凋亡细胞/mm2]、高剂量组[(18.0±5.2)凋亡细胞/mm2]与模型对照组[(50.2±5.1)凋亡细胞/mm2]比较均具有显著性差异,表明β-细辛醚对AD大鼠海马神经细胞凋亡有明显的抑制作用。免疫组化定性检测结果表明:正常对照组和假手术组海马组织中cleaved Caspase-3,Bax表达较少,Bcl-2表达较多;模型对照组和盐酸多奈哌齐海马组织中cleaved Caspase-3,Bax表达明显增多,Bcl-2表达明显减少;β-细辛醚各剂量海马组织中cleaved Caspase-3,Bax表达明显减少,Bcl-2表达明显增多;蛋白免疫印迹定量检测结果表明:海马组织cleaved Caspase-3蛋白β-细辛醚低中高剂量组分别为[(146.2±22.8)%],[(130.6±24.5)%],[(122.3±28.8)%]较模型对照组[(233.8±21.6)%]具有显著行差异;β-细辛醚低中高剂量组Bcl-2蛋白表达分别为[(56.74±3.35)%],[(51.92±3.22)%],[(83.24±4.45)%]较模型对照组[(35.38±2.58)%]具有显著差异;β-细辛醚中高剂量组Bax蛋白表达分别为[(114.0±11.4)%],[(108.6±12.4)%]较模型对照组[(165.9±23.2)%]具有显著差异;实时定量RT-PCR实验结果显示:β-细辛醚各剂量组对Bcl-2 mRNA的表达降低具有明显的抑制作用,对Bax和Caspase-3 mRNA的表达升高具有明显的抑制作用。结论本实验证明β-细辛醚对Aβ1-42双侧海马注射诱导的AD模型大鼠海马神经细胞凋亡有一定保护作用,其作用机理可能是通过抑制神经细胞中Bax、Caspase-3的表达和促进Bcl-2的表达来实现的,并且具有一定的量效关系。

全文目录

中文摘要  5-7
英文摘要  7-9
前言  9-11
文献综述  11-24
材料与方法  24-34
结果  34-45
讨论  45-50
结论  50-51
参考文献  51-55
致谢  55-56
英文缩写  56-58
附图  58-59
攻读学位期间发表的学术论文  59

石菖蒲活性成分β-细辛醚抗老年痴呆模型大鼠海马细胞凋亡作用及机制

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