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儿童轮状病毒和星状病毒的感染情况及其型别分析

作　者: 马慧
导　师: 彭林
学　校: 天津医科大学
专　业: 临床检验诊断学
关键词: 轮状病毒 星状病毒 MA-104细胞 CaCo-2细胞 逆转录聚合酶链反应 基因型
分类号: R725.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要


目的：本研究将逆转录聚合酶链反应技术(reverse transcription-polymerase chain reaction, RT-PCR)与细胞培养(cell culture)相结合,进一步了解天津地区5岁以下住院腹泻患儿A组轮状病毒和星状病毒的感染情况及其型别特点。方法：收集天津市儿童医院2008年5月到2009年4月5岁以下住院腹泻患儿的粪便标本,用胶体金免疫层析法快速检测A组轮状病毒抗原,用酶联免疫吸附试验方法(ELISA)进行星状病毒抗原检测,将抗原检测阳性的标本经过胰酶(10μg/ml)处理分别接种于MA-104细胞株和CaCo-2细胞株,产生细胞病变(CPE)后,提取病毒RNA, RT-PCR扩增并经测序确证。测序结果利用DNASTAR和BlAST软件进行比对。同时收集其临床相关资料。结果：863例粪便标本轮状病毒抗原阳性率为28.39%(245/863)；89.39%的轮状病毒腹泻发生在24月龄以下患儿；发病高峰主要集中在2008年10月份到2009年4月份；245例轮状病毒抗原阳性标本中,男166例,女79例,男女阳性检出率之比为2.10：1；轮状病毒感染的主要临床表现为腹泻、发热、呕吐,并伴有不同程度的脱水；此外,接种的208例轮状病毒抗原阳性标本中,病毒分离后用PCR鉴定阳性95例,对其中35例PCR产物阳性标本作序列分析显示除1例为轮状病毒G9型、2例为轮状病毒G3型外,其余均为轮状病毒G1型。863例粪便标本星状病毒抗原阳性检出率为2.90%(25/863),与轮状病毒共同感染的有6例,占星状病毒抗原阳性标本的24.00%(6/25)；96.00%的星状病毒腹泻发生在2岁以下患儿,其中小于6月龄的患儿占星状阳性标本的44.00%(11/25)；星状病毒感染主要集中在2008年8月份至次年4月份,与轮状病毒流行季节相似；25例星状病毒抗原阳性标本中,男15例,女10例,男女阳性检出率之比为1.74：1,差异无显著性统计学意义(χ2=0.717,P=0.132)；星状病毒感染的主要临床表现为腹泻、发热、呕吐,仅有一例伴有轻度脱水；此外,接种的21例星状病毒抗原阳性的标本中,病毒分离后用PCR鉴定阳性11例并经测序确证均为HAstV-1型。结论：轮状病毒是天津地区婴幼儿腹泻的重要病原,流行的基因型以G1为主。星状病毒也是天津地区2008年-2009年婴幼儿病毒性腹泻的重要病原之一,流行型别以HAstV-1型为主。

全文目录


中文摘要  4-6
Abstract  6-10
缩略语  10-11
前言  11-14
  研究现状、成果  11-13
  研究目的、方法  13-14
一、天津地区住院腹泻儿童轮状病毒的感染情况及其型别分析  14-29
  1.1 对象和方法  14-19
    1.1.1 研究对象  14-15
    1.1.2 方法  15-19
  1.2 结果  19-26
    1.2.1 轮状病毒腹泻的流行病学分布特征  19-22
    1.2.2 轮状病毒腹泻的临床特征  22-23
    1.2.3 轮状病毒的细胞培养  23-24
    1.2.4 RT-PCR结果  24
    1.2.5 VP7基因核苷酸序列测定和比对  24
    1.2.6 核苷酸序列同源性及遗传进化树分析  24-26
  1.3 讨论  26-27
    1.3.1 天津地区轮状病毒腹泻的流行病学特点  26
    1.3.2 天津地区轮状病毒腹泻的临床特征  26
    1.3.3 天津地区轮状病毒的基因分型  26-27
    1.3.4 轮状病毒的核苷酸同源性及序列分析  27
    1.3.5 本次研究的意义  27
  1.4 小结  27-29
二、天津地区住院腹泻儿童星状病毒的感染情况及其型别分析  29-39
  2.1 对象和方法  29-32
    2.1.1 研究对象  29-30
    2.1.2 方法  30-32
  2.2 结果  32-37
    2.2.1 星状病毒腹泻的流行病学分布特征  32-34
    2.2.2 星状病毒腹泻的临床特征及肠道外损伤  34-35
    2.2.3 星状病毒的细胞培养  35-36
    2.2.4 RT-PCR结果  36
    2.2.5 序列测定和比对  36
    2.2.6 核甘酸序列同缘性及遗传进化树分析  36-37
  2.3 讨论  37-38
    2.3.1 天津地区星状病毒感染的一般状况  37
    2.3.2 天津地区星状病毒腹泻的流行病学特点及其临床特征  37-38
    2.3.3 星状病毒的基因分型及其核苷酸同源性分析  38
    2.3.4 未来发展  38
  2.4 小结  38-39
结论  39-40
参考文献  40-44
发表论文和参加科研情况说明  44-45
综述1  45-53
  轮状病毒腹泻的流行病学及相关研究进展  45-50
  综述1 参考文献  50-53
综述2  53-63
  儿童星状病毒感染的研究现状及其检测技术的发展  53-60
  综述2 参考文献  60-63
致谢  63-64

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中图分类: > 医药、卫生 > 儿科学 > 小儿内科学 > 小儿传染病
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