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α-氯代醇对雄性高原鼠兔生殖功能的影响

作　者: 吴宥析
导　师: 钟妮娜；刘少英
学　校: 四川农业大学
专　业: 基础兽医学
关键词: α-氯代醇高原鼠兔 LD50 生殖毒性抗生育雄性不育
分类号: S442
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
下　载: 22次
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内容摘要

若尔盖湿地是青藏高原高寒湿地生态系统的典型代表,是我国特有生物多样性关键地区之一。但近年来,若尔盖草原生态系统的结构和功能遭到破坏,其中高原鼠兔(Ochotona curzoniae)种群数量反常升高就是重要原因之一,于是高原鼠兔成了草原生态系统中的主要害兽。本实验将1/2LD50、1/4 LD50和1/8LD50剂量的α-氯代醇(α-chlorohydrin, ACH)灌胃高原鼠兔后,采用精子计数、病理组织学观察、电镜观察、电化学发光免疫等方法研究ACH对高原鼠兔的毒性、生理生化、雄性生殖系统的结构与功能影响,以此来检测α-氯代醇对雄性高原鼠兔生殖功能的影响,以选择合适的剂量来控制高原鼠兔,保护草原生态。用改良寇氏法测定ACH对高原鼠兔的LDso。结果表明：ACH对高原鼠兔的急性口服半数致死量为103.16mg/kg。LDso的95%可信限为85.75-124.09mg/kg。LD50的平均可信限为103.16±19.17mg/kg。根据以上结果按《中华人民共和国农药登记毒理学试验方法GB15670-1995》农药的急性经口毒性分级标准评定,ACH对高原鼠兔为中毒。按药物对精子的致畸实验要求,将ACH根据LD5o的结果配置1/2LD50、1/4LD50和1/8LD5o浓度,经口灌胃给雄性性成熟高原鼠兔,常规饲养19天后处死,检测体重、睾丸和附睾重量、精子数量、活力和畸形率,血清中睾酮、乳酸脱氢酶-C4和总蛋白的含量,对睾丸和附睾进行了病理组织学和超微病理学观察。结果表明,ACH对高原鼠兔的体重、睾丸和附睾重量无显著影响。ACH能非常明显降低高原鼠兔精子的数量、活力和活率(P<0.01),显著增加精子畸形率(P<0.01),随着ACH剂量增加,精子无尾率会大幅增加(P<0.01)。试验证实,ACH对高原鼠兔血清的睾酮、乳酸脱氢酶-C4和总蛋白浓度都有非常显著的影响(P<0.01)。睾酮由1.38 ng/mL增加到4.40 ng/mL,乳酸脱氢酶-C4由2006.80 U/L下降到866.20U/L,总蛋白由74.37 g/L下降到49.40 g/L。表明ACH对精子生长发育有显著影响。从病理组织学和电镜观察表明,ACH能明显减少附睾管中精子数量,生精细胞的发育停滞在精母细胞阶段,次级精母细胞数量明显增多。曲精小管壁明显增厚,精母细胞中溶酶体数量增多。本实验通过ACH对高原鼠兔抗生育效果的结果表明,ACH能显著降低雌性高原鼠兔的活胎率,由每胎平均4.4只下降到1.05只。早期死亡胚胎数和晚期死亡胚胎数随着ACH剂量的增加而显著增加,分别由每胎平均0.15只和0.15只增加到2.55只和1.25只。本试验证实,60mg/kg体重的ACH可作为野外控制高原鼠兔种群数量的参考剂量。

全文目录

摘要  8-10
Abstract  10-12
1 前言  12-20
  1.1 国外对雄性不育剂的研究现状  12
  1.2 α-氯代醇毒性研究进展  12-15
    1.2.1 ACH的生殖毒性研究进展  13-14
    1.2.2 ACH其他毒性的研究进展  14-15
  1.3 国内鼠类雄性不育剂研究现状  15-16
  1.4 高原鼠兔的生物学特征和对草原的危害  16-19
  1.5 本研究的立题依据、目的和意义  19-20
2 材料  20-22
  2.1 实验动物  20
  2.2 试验仪器  20-21
  2.3 实验材料  21-22
    2.3.1 实验药物  21
    2.3.2 实验试剂  21-22
3 方法  22-26
  3.1 ACH对高原鼠兔的毒理学测定—LD_(50)  22-23
    3.1.1 动物分组  22
    3.1.2 探索剂量范围  22
    3.1.3 剂量设计  22
    3.1.4 统计处理  22-23
  3.2 ACH对附睾尾精子的影响  23-24
    3.2.1 动物分组  23
    3.2.2 睾丸、附睾重量测定  23
    3.2.3 精子活力和活率测定  23
    3.2.4 精子计数  23
    3.2.5 精子畸形率检测  23-24
  3.3 ACH对高原鼠兔抗生育作用机理研究  24
    3.3.1 动物分组  24
    3.3.2 睾酮、乳酸脱氢酶-C4和总蛋白分析  24
    3.3.3 组织病理学和超微病理学观察  24
  3.4 ACH对高原鼠兔抗生育效果观察  24-25
    3.4.1 动物分组  24
    3.4.2 灌胃给药  24-25
    3.4.3 检查计数  25
    3.4.4 胚胎鉴别  25
    3.4.5 统计分析  25
  3.5 统计处理  25-26
4 结果  26-41
  4.1 ACH对高原鼠兔的毒理学测定—LD_(50)  26
  4.2 ACH对附睾尾精子的影响  26-32
    4.2.1 睾丸、附睾重量测定  26-28
    4.2.2 精子活力和活率测定  28-30
    4.2.3 精子畸形率检测  30-32
  4.3 ACH对高原鼠兔抗生育作用机理研究  32-38
    4.3.1 ACH对高原鼠兔睾酮、乳酸脱氢酶-C4和总蛋白的影响  32-34
    4.3.2 组织病理学和超微病理学观察  34-38
  4.4 ACH对高原鼠兔抗生育效果观察  38-41
5 讨论  41-46
  5.1 ACH对高原鼠兔的急性毒性  41
  5.2 ACH对高原鼠兔组织器官的影响  41-42
  5.3 ACH对高原鼠兔生殖功能的影响  42-46
    5.3.1 ACH对精子的影响  42-43
    5.3.2 ACH对雄性高原鼠兔生殖细胞发育的影响  43-46
6 结论  46-47
参考文献  47-53
致谢  53-54
作者简介以及攻读硕士学位期间发表的学术论文  54

α-氯代醇对雄性高原鼠兔生殖功能的影响

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