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烟粉虱生物型鉴定、抗药性监测、杀虫剂的配方筛选及其增效生化机理研究

作　者: 陈冲
导　师: 李建洪
学　校: 华中农业大学
专　业: 农药学
关键词: 烟粉虱生物型抗药性抗性监测生物测定复配增效生化机理解毒酶
分类号: S433
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

烟粉虱Bemisa tabaci (Gennadius)是一种世界性农业害虫,给全球的农业生产造了严重的经济损失。近年来,由于盲目用药及不合理用药等原因,导致烟粉虱抗药性的产生和发展,在我国许多地区频繁爆发成灾,防治也十分困难。因此,开展烟粉虱的抗性治理和综合治理显得十分迫切而重要。本文明确了湖北省烟粉虱的生物型及其地理分布,开展了烟粉虱抗药性监测,室内筛选对烟粉虱高效的增效配方,并研究混配配方的增效生化机理,对烟粉虱抗性治理和综合治理具有重要意义。利用mtDNA COI基因片段作标记,通过序列分析对湖北省烟粉虱生物型进行了鉴定。结果表明当阳、仙桃、天门、监利、宜昌和武汉6个地区烟粉虱生物型属于Q型,枣阳地区烟粉虱属于B型。采用琼脂保湿浸叶法,监测了2008年和2009年武汉、仙桃、当阳和枣阳四个地区烟粉虱田间种群对九种杀虫剂的抗药性。结果表明烟粉虱田间种群对九种杀虫剂均产生了不同程度的抗性,总体呈下降趋势。对甲氨基阿维菌素苯甲酸盐和阿维菌素的抗性分别为14.3-35.5倍、9.8-16.9倍；对烟碱类杀虫剂吡虫啉、啶虫脒和烯啶虫胺分别产生了8.4-21.0、28.6-49.9、5.5-15.5倍的抗性；对氟虫腈、丁醚脲、丁硫克百威、乙酰甲胺磷的抗性倍数为3.0-7.6、7.7-14.4、2.6-7.9、37.5-93.3倍。采用交互测定法和共毒系数法,对九种杀虫剂进行增效配方和最佳配比的筛选。结果表明,吡虫啉与甲氨基阿维菌素苯甲酸盐以有效成分84：1混配时,共毒系数高达350.55,具有明显的增效作用。烯啶虫胺与丁醚脲、烯啶虫胺与阿维菌素和烯啶虫胺与氟虫腈的组合均具有一定的加成作用。田间药效试验结果表明,以上复配配方混配后防治效果均高于两单剂。以烟粉虱田间抗性和室内敏感品系成虫为材料,采用生化分析方法,研究增效配方甲氨基阿维菌素苯甲酸盐与吡虫啉对3种解毒酶活力的影响。结果表明：增效机理与多功能氧化酶活力有密切关系,与羧酸酯酶活力、谷胱甘肽-S-转移酶活力没有明显相关性；多功能氧化酶活力与烟粉虱抗性也有密切关系。

全文目录

摘要  8-10
Abstract  10-12
第一章文献综述  12-22
  1 烟粉虱概况  12-14
    1.1 烟粉虱的起源、分布与危害  12-14
      1.1.1 烟粉虱的起源  12
      1.1.2 烟粉虱的分布  12
      1.1.3 烟粉虱的危害  12-13
      1.1.4 烟粉虱生物型与抗药性的关系  13-14
  2 烟粉虱抗药性现状  14-17
    2.1 烟粉虱对有机氯类、有机磷类和氨基甲酸酯类杀虫剂的抗性  14-15
    2.2 烟粉虱对拟除虫菊酯类杀虫剂的抗性  15-16
    2.3 烟粉虱对烟碱类杀虫剂的抗性  16-17
    2.4 烟粉虱对昆虫生长调节剂的抗性  17
  3 烟粉虱抗性机理  17-19
    3.1 表皮穿透抗性  17-18
    3.2 代谢抗性  18-19
    3.3 靶标抗性  19
  4 烟粉虱抗药性综合治理  19-20
    4.1 农业防治  20
    4.2 物理防治  20
    4.3 化学防治  20
    4.4 生物防治  20
  5 本研究的目的与意义  20-22
第二章湖北省烟粉虱生物型鉴定  22-32
  1 材料与方法  22-26
    1.1 材料  22-24
      1.1.1 样品的采集和保存  22-23
      1.1.2 主要实验仪器和设备  23
      1.1.3 主要试剂  23-24
    1.2 方法  24-26
      1.2.1 溶液配制  24
      1.2.2 单头烟粉虱总DNA提取  24
      1.2.3 PCR引物设计  24-25
      1.2.4 PCR反应体系  25
      1.2.5 PCR反应条件  25
      1.2.6 PCR产物检测  25
      1.2.7 序列测序  25
      1.2.8 数据分析  25-26
  2 结果与分析  26-30
    2.1 mtDNA COI基因PCR产物扩增检测结果  26
    2.2 基于mtDNA COI基因序列分析湖北烟粉虱遗传距离  26-27
    2.3 构建烟粉虱系统聚类树  27-30
  3 小结与讨论  30-32
第三章湖北省烟粉虱抗药性监测  32-44
  1 材料与方法  32-34
    1.1 材料  32-33
      1.1.1 供试虫源  32
      1.1.2 供试药剂  32-33
      1.1.3 主要实验仪器  33
    1.2 方法  33-34
      1.2.1 药剂配制  33
      1.2.2 琼脂胶的配制  33
      1.2.3 生物测定方法  33-34
  2 结果与分析  34-42
    2.1 敏感基线的建立  34-35
    2.2 不同药剂对湖北地区烟粉虱田间种群的毒力  35-42
      2.2.1 甲氨基阿维菌素苯甲酸盐对湖北地区烟粉虱田间种群的毒力  35
      2.2.2 阿维菌素对湖北地区烟粉虱田间种群的毒力  35-36
      2.2.3 氟虫腈对湖北地区烟粉虱田间种群的毒力  36-37
      2.2.4 烯啶虫胺对湖北地区烟粉虱田间种群的毒力  37-38
      2.2.5 丁醚脲对湖北地区烟粉虱田间种群的毒力  38
      2.2.6 啶虫脒对湖北地区烟粉虱田间种群的毒力  38-39
      2.2.7 吡虫啉对湖北地区烟粉虱田间种群的毒力  39-40
      2.2.8 丁硫克百威对湖北地区烟粉虱田间种群的毒力  40-41
      2.2.9 乙酰甲胺磷对湖北地区烟粉虱田间种群的毒力  41-42
  3 小结与讨论  42-44
第四章防治烟粉虱杀虫剂复配配方筛选及田间试验  44-52
  1 材料与方法  44-46
    1.1 材料  44-45
      1.1.1 供试虫源  44
      1.1.2 供试药剂  44
      1.1.3 主要实验仪器  44-45
    1.2 方法  45-46
      1.2.1 室内生物测定及配方筛选  45-46
      1.2.2 田间药效试验  46
  2 结果与分析  46-51
    2.1 几种杀虫剂对烟粉虱的毒力及配方筛选  46-48
      2.1.1 几种杀虫剂对烟粉虱的毒力  46-47
      2.1.2 不同药剂复配对烟粉虱的联合毒力研究  47-48
    2.2 混配配方防治烟粉虱的田间药效试验  48-51
  3 小结与讨论  51-52
第五章增效配方对烟粉虱解毒酶的影响  52-64
  1 材料与方法  53-59
    1.1 材料  53-54
      1.1.1 供试虫源  53
      1.1.2 主要仪器和工具  53
      1.1.3 主要药剂和试剂  53-54
    1.2 方法  54-59
      1.2.1 蛋白质标准曲线的制备  54
      1.2.2 羧酸酯酶活力的测定方法  54-56
      1.2.3 谷胱甘肽-S-转移酶活力的测定方法  56-57
      1.2.4 多功能氧化酶活力的测定方法  57-59
  2 结果与分析  59-63
    2.1 标准曲线结果  59
      2.1.1 蛋白质标准曲线  59
      2.1.2 a-萘酚标准曲线  59
      2.1.3 对硝基苯酚标准曲线  59
    2.2 解毒酶活力测定结果  59-63
      2.2.1 羧酸酯酶活力测定结果  59-60
      2.2.2 谷胱甘肽-S-转移酶活力测定结果  60-61
      2.2.3 多功能氧化酶活力测定结果  61-63
  3 小结与讨论  63-64
第六章论文总结  64-66
  1 论文研究得主要结论  64
  2 论文的创新之处  64-65
  3 展望  65-66
参考文献  66-75
攻读硕士期间论文撰写与发表情况  75-76
致谢  76

烟粉虱生物型鉴定、抗药性监测、杀虫剂的配方筛选及其增效生化机理研究

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