学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

TGEV-S基因在玉米植株中的表达

作　者: 曾作财
导　师: 李国平；王金洛；张晓东；杨兵
学　校: 福建农林大学
专　业: 预防兽医学
关键词: 猪传染性胃肠炎病毒(TGEV) S蛋白转基因玉米表达
分类号: S852.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
下　载: 18次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载

内容摘要

猪传染性胃肠炎病毒(Transmissible Gastroenteritis Virus of Swine,TGEV)是引起猪传染性胃肠炎(Transmissible Gastroenteritis of Swine,TGE)的病原,属于套式病毒目,冠状病毒科,冠状病毒属。TGEV有四种主要的结构蛋白:①纤突糖蛋白(S);②膜糖蛋白(M);③核衣壳磷蛋白(N);④小包膜蛋白(sM)。纤突糖蛋白(S蛋白)携带主要的B淋巴细胞抗原决定簇,是唯一能够诱导产生中和抗体和提供免疫保护的结构蛋白。本研究利用PCR方法和点突变技术,成功克隆了TGEV-S基因。随后构建了表达载体pBAC176,该表达载体以EPSP基因作为选择标记,其目的基因TGEV-S以增强型启动子E35S为驱动。为进一步提高目的基因表达量和筛选工作效率,构建了表达载体pBAC178,该表达载体以紫色编码基因(LC/PL)作为筛选标记,其目的基因TGEV-S以玉米胚乳特异性启动子(Zein)为驱动。利用基因枪介导基因转化技术,通过构建表达载体pBAC176和pBAC178,将TGEV-S基因导入玉米幼胚愈伤组织,分别获得当代转基因植株32棵和42棵。利用PCR和PCR-Southern检测表明,第一批转基因苗中有7株和第二批转基因苗中有2株的检测结果呈阳性。为进一步研究转基因玉米植株表达S蛋白免疫原性、免疫效力测定和动物口服免疫实验打下基础。

全文目录

摘要  5-6
Abstract  6-10
第一章引言  10-26
  1.1 猪传染性胃肠炎病毒概论  10-15
  1.2 转基因植物作为生物反应器生产畜禽疫苗的研究进展  15-24
  1.3 本实验的研究目的、意义和技术路线  24-26
第二章表达载体的构建  26-39
  2.1 材料  26-27
  2.2 方法  27-31
  2.3 结果与分析  31-36
  2.4 讨论  36-39
第三章转TGEV-S 基因玉米植株的获得  39-44
  3.1 材料  39
  3.2 方法  39-42
  3.3 结果与分析  42
  3.4 讨论  42-44
第四章转TGEV-S 基因玉米植株的分子生物学检测  44-51
  4.1 材料  44-45
  4.2 方法  45-48
  4.3 结果与分析  48-50
  4.4 讨论  50-51
第五章结论和下一步工作设想  51-52
  5.1 结论  51
  5.2 下一步工作设想  51-52
参考文献  52-60
附录  60-67
致谢  67

TGEV-S基因在玉米植株中的表达

内容摘要

全文目录

相似论文