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脊尾白虾感染白斑综合症病毒在江苏的流行病学调查及防控对策

作　者: 柏玲
导　师: 陆承平；万夕和
学　校: 南京农业大学
专　业: 兽医
关键词: 脊尾白虾 白斑综合征病毒 流行病学 细胞病理学 病毒可变区
分类号: S945
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要


白斑综合征病毒(White spot syndrome virus, WSSV)是上世纪九十年代以来感染中国对虾、斑节对虾、凡纳滨对虾等发生白斑综合征的一种DNA病毒,该病毒引起了虾类疾病全世界大流行,极大地危害全球虾类养殖业。近年来在江苏沿海地区暴发虾病,养殖的脊尾白虾大规模死亡,严重影响地区海水养殖产业的经济发展。对该地区养殖的脊尾白虾大规模暴发疫病进行了流行病学、细胞超微病理学的研究。从发病的脊尾白虾不同组织中可观察到WSSV病毒粒子的存在,尽管脊尾白虾病虾甲壳未显示明显的白斑症状,但人工感染试验表明,江苏沿海地区脊尾白虾的大规模死亡与WSSV感染有关。2010年8月份至2011年5月份期间,对江苏省沿海脊尾白虾养殖密集地区的21个站点进行了WSSV感染疾病的流行调查,采用PCR方法对所采集样品进行了WSSV检测。调查发现,21个站点中,80%的脊尾白虾可检测出WSSV,且发病虾塘出现大规模死虾现象,其中盐城市脊尾白虾发病情况比较严重,发病情况由重点区域向邻近区域扩散；2010年9月份和10月份脊尾白虾的发病率和死亡率高于其他月份。在虾蟹混养模式中,采集到的蟹类样品WSSV阳性检出率很高；江苏外海海域捕捞的虾类和蟹类样品可检测到WSSV。采用透射电镜观察了感染WSSV的脊尾白虾细胞超微结构。研究发现,感染WSSV的脊尾白虾的肠、肝胰腺、鳃、肌肉组织细胞有明显病变,主要表现为：细胞核膨大肿胀,染色质边聚,粗面内质网扩张,线粒体内嵴溶解,溶酶体增多；感染严重的细胞核破裂,病毒粒子释放到细胞质中。观察到的病毒粒子与已有报道的WSSV形态十分相似,但未见其尾状结构,只见乳头状突起。针对WSSV部分可变区设计了特异性引物3对,PCR扩增WSSV江苏脊尾白虾分离株DF1,与GenBank上已有的WSSV序列比对。结果发现,WSSV江苏脊尾白虾分离株DF1可变区与已报道的WSSV泰国株和中国株的序列有明显差异,与台湾株的进化关系较近。推测DF1株可能由与其他分离株共同的祖先通过序列的缺失、插入独立进化而来。通过对脊尾白虾的生长特性以及江苏沿海养殖环境的调查,综合考虑多方面因素,提出了系列防控措施,以期预防wssv在江苏脊尾白虾大规模暴发流行。

全文目录


摘要  8-10ABSTRACT  10-12第一篇 文献综述  12-46  第一章 脊尾白虾的研究概况  12-18    1 形态特征  12    2 生活习性  12-13    3 食性  13    4 繁殖习性  13    5 养殖技术  13-15      5.1 池塘的清整及注水  13-14      5.2 抱卵虾或虾苗的放养  14      5.3 养成管理  14-15        5.3.1 投饵管理  14        5.3.2 饲养管理  14-15      5.4 成虾捕捞  15    6 养殖模式  15    7 养殖病害  15-17      7.1 病毒性疾病  15-16      7.2 细菌性疾病  16      7.3 原生动物引起的疾病  16-17    参考文献  17-18  第二章 白斑综合征病毒(WSSV)的研究概况  18-46    1 病原学  18-23      1.1 WSSV的命名和分类地位  18-20      1.2 WSSV的形态结构  20-21      1.3 WSSV的基因组  21-23    2 流行病学  23-26      2.1 宿主范围  23-24      2.2 传播途径  24-26        2.2.1 水平传播  24        2.2.2 垂直传播  24-25        2.2.3 其他传播方式  25-26    3 WSSV感染虾类的病理学  26-28      3.1 临床症状  26      3.2 病理特征  26-27      3.3 WSSV感染虾类的致病机理  27      3.4 感染过程  27-28    4 WSSV的检测方法  28-31      4.1 形态学检测方法  28-29      4.2 免疫学检测方法  29      4.3 分子生物学检测方法  29-31        4.3.1 核酸探针技术  29-30        4.3.2 PCR检测方法  30        4.3.3 DNA微阵列  30-31    5 WSSV感染对虾的防治措施  31-34      5.1 消除WSSV传染源,切断WSSV传播途径  31        5.1.1 消除WSSV水平传播的传染源和传播途径  31        5.1.2 消除WSSV垂直传播的传染源和传播途径  31      5.2 增强对虾体质,提高对虾抗病能力  31-32      5.3 选育抗性品种  32-33      5.4 调整养殖模式  33      5.5 药物防治  33-34    6 本研究目的和意义  34-35    参考文献  35-46第二篇 研究内容  46-90  第一章 脊尾白虾感染白斑综合征病毒在江苏的流行病学调查  46-60    1 材料与方法  46-50      1.1 材料  46-48      1.2 方法  48-50        1.2.1 WSSV的检测  48-49        1.2.2 人工感染试验  49-50    2 结果  50-55      2.1 发病症状  50-51        2.1.1 群体发病症状  50        2.1.2 个体发病症状  50-51      2.2 发病区域  51-52      2.3 发病情况  52-54        2.3.1 不同月份的脊尾白虾携带WSSV情况调查  52-53        2.3.2 饵料及环境样品携带WSSV情况调查  53        2.3.3 海捕野生甲壳类样品携带WSSV情况调查  53-54      2.4 人工感染结果  54-55    3 讨论  55-58    参考文献  58-60  第二章 脊尾白虾感染白斑综合征病毒的细胞病理学研究  60-70    1 材料与方法  60      1.1 材料  60      1.2 方法  60    2 结果  60-65      2.1 病虾的剖检  60-61      2.2 超微结构的观察  61-65        2.2.1 疑病毒粒子的观察  61        2.2.2 病虾细胞的超微病理观察  61-65    3 讨论  65-68      3.1 病毒的结构特征  65-66      3.2 病虾的病理特征  66-68    参考文献  68-70  第三章 脊尾白虾白斑综合征病毒的部分基因分析  70-82    1 材料与方法  70-72      1.1 生物样品  70      1.2 方法  70-72        1.2.1 WSSV DNA的提取  70-71        1.2.2 PCR引物的设计与合成  71        1.2.3 PCR反应体系及程序  71-72        1.2.4 琼脂糖凝胶电泳  72        1.2.5 PCR产物纯化及测序  72        1.2.6 序列比对及构建进化树  72    2 结果  72-78      2.1 PCR结果  72-73      2.2 各可变区序列差异  73-78        2.2.1 ORF14/15  73-74        2.2.2 ORF75  74-75        2.2.3 ORF94  75-77        2.2.4 胸腺嘧啶合成酶基因(TS)  77-78    3 讨论  78-80      3.1 ORF14/15  78-79      3.2 ORF75、ORF94  79-80    参考文献  80-82  第四章 脊尾白虾白斑综合征的防控对策  82-90    1 影响发病的因素  82-83      1.1 种质因素  82      1.2 环境因素  82-83      1.3 饵料因素  83    2 防控措施  83-87      2.1 选育优质苗种提高自身体质  83-84      2.2 改善养殖环境切断传播途径  84-85      2.3 改进养殖模式调整养殖结构  85      2.4 加强饲喂管理增强免疫预防  85-87    参考文献  87-90全文总结  90-92附录  92-94致谢  94

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中图分类: > 农业科学 > 水产、渔业 > 水产保护学 > 甲壳类病虫害及其防治
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