固定化植酸酶及低磷酸肌醇的制备研究

作　者: 廖妙飞
导　师: 周小华
学　校: 重庆大学
专　业: 化学工程与技术
关键词: 交联壳聚糖-赖氨酸树脂植酸酶植酸低磷酸肌醇
分类号: TQ265.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
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内容摘要

以戊二醛为交联剂、碳酸钙为致孔剂,反相悬浮交联制备交联壳聚糖;以二环己基碳二亚胺缩合,制备出交联壳聚糖-赖氨酸树脂。以交联壳聚糖-赖氨酸树脂为载体制备固定化植酸酶的学位论文">植酸酶。在最优固定化条件为:戊二醛、载体游离氨基与植酸酶三者的摩尔比为:1.5﹕1﹕1.5×10-4,pH6.0,交联反应2.5h,常温下,制得固定化植酸酶活力为8030U/g、偶联率为39.6%,、活力回收为68.15%。固定化植酸酶的主要酶学性质:最适pH范围5.5~6.5,最适温度范围35~45℃,Km=1.44mmol/L,为游离酶的1.29倍;50℃半衰期为3.3h,室温(25℃)重复使用半衰期25次,4℃贮存半衰期114天。以固定化酶柱生物反应器水解植酸制备低磷酸肌醇,工艺条件:温度:37℃,pH6,底物与固定化植酸摩尔比:60﹕1,底物流速:1.5BV/h。对植酸进行连续循环水解,操作10h,植酸水解率为达77.8%,固定化植酸酶的残余活力为70%。以阴离子交换树脂交换水解生成的低磷酸肌醇,以0.05～0.7mol/L盐酸为洗脱剂对水解产物进行分离,控制流速2BV/h,获得两个洗脱物,经核磁共振分析确证,固定化植酸酶的水解物为四磷酸肌醇。

固定化植酸酶及低磷酸肌醇的制备研究

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