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二氢睾酮对大鼠RGC-5细胞神经突起再生及RhoA和Neuritin表达的影响

作　者: 杨秀丽
导　师: 李平华
学　校: 重庆医科大学
专　业: 眼科学
关键词: RGC-5细胞神经突起再生二氢睾酮 RhoA Neuritin
分类号: R774.6
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要

背景：从解剖上看，视神经属于周围神经系统（PNS），但如果从其发育过程中所表现出来的特点，以及所具有的结构特征和功能特性来看，视神经与中枢神经系统（CNS）的神经更为相似，所以常被视作一种特殊分化的中枢神经。因此，与CNS的神经元类似，RGCs损伤后的再生也是极为困难的，这是眼科临床上外伤性视神经疾病和青光眼等引起不可逆盲的主要原因。近年来研究表明：CNS难以有效的再生，神经元自身的性质并不是最为主要的因素，损伤导致神经周围形成的具有强烈抑制作用的微环境是更为重要的原因。再生轴突往往由于这种微环境的存在，在出芽的初始阶段就发生了萎缩，最终导致了神经再生的失败。目前，微环境在神经再生研究领域的关注度正在快速增加。雄激素是近年来研究得较多的一种性激素。除了具有促进生殖系统发育和维持第二性征的作用外，还具有脑保护功能。然而，关于雄激素是否对视神经具有保护作用，以及是否通过调节神经再生微环境来发挥作用报道不多。目的：1.建立诱导分化后的大鼠RGC-5细胞神经突起损伤模型；2.观察二氢睾酮（DHT）对神经突起损伤后再生的作用；3.检测二氢睾酮（DHT）对损伤局部微环境中RhoA和Neuritin表达的影响。方法：1.用Na2S2O4制备大鼠RGC-5细胞神经突起氧糖剥夺/复氧损伤模型；2.用不同浓度的DHT（1、10和100nmol/L）对损伤模型进行干预，MTT法检测细胞存活率，光学显微镜下观察细胞神经突起数量和长度，RT-PCR反应和Western blot法检测细胞RhoA和NeuritinmRNA和蛋白的表达水平。结果：1.5mmol/L的Na2S2O4为制备RGC-5细胞神经突起氧糖剥夺/复氧损伤模型的最佳浓度。2.氧糖剥夺/复氧损伤后，模型组细胞存活率、神经突起数量和长度均较正常对照组减少（P＜0.05），DHT干预后，与模型组比较，10和100nmol/L组细胞存活率和神经突起数量增加（P＜0.05），而1nmol/L组细胞存活率和神经突起数量差异没有统计学意义（P>0.05），1、10和100nmol/L DHT组神经突起长度较模型组增加（P＜0.05）。3.氧糖剥夺/复氧损伤后，模型组RhoA mRNA和蛋白表达量均较正常对照组明显增加（P＜0.05），而Neuritin mRNA及蛋白表达量均较正常对照组明显减少（P＜0.05），DHT干预后，1、10和100nmol/L DHT组RhoA mRNA和蛋白表达量均较模型组减少（P＜0.05），而Neuritin mRNA及蛋白表达量均较模型组增加（P＜0.05）。结论：RhoA和Neuritin可能是氧糖剥夺/复氧损伤后影响大鼠RGC-5细胞神经突起再生的重要因子之一，DHT可能通过调节RhoA和Neuritin的表达，从而发挥神经保护作用。

全文目录

符号说明  5-7
摘要  7-9
ABSTRACT  9-12
前言  12-13
第一部分大鼠 RGC-5 细胞神经突起损伤模型的建立  13-21
  1 材料与方法  13-17
  2 结果  17-18
  3 讨论  18-21
第二部分二氢睾酮对大鼠RGC-5细胞神经突起再生及RhoA和 Neuritin表达的影响  21-34
  1 材料与方法  21-29
  2 结果  29-32
  3 讨论  32-34
全文结论  34-35
参考文献  35-39
附图  39-43
综述  43-53
  参考文献  47-53
致谢  53-54
攻读硕士期间发表的学术论文  54-55

二氢睾酮对大鼠RGC-5细胞神经突起再生及RhoA和Neuritin表达的影响

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