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白介素-6在人脂肪与肾上腺肿瘤组织中的表达

作　者: 李丽莎
导　师: 曾正陪
学　校: 北京协和医学院
专　业: 临床医学
关键词: 白介素-6 肾上腺肿瘤周围脂肪 皮下脂肪 肾上腺肿瘤 信使核糖核酸 反转录-聚合酶链式反应
分类号: R736.6
类　型: 博士论文
年　份: 2009年
下　载: 11次
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内容摘要


目的：检测白介素-6(IL-6) mRNA在原发性醛固酮增多症、库欣综合征及嗜铬细胞瘤的肾上腺肿瘤,肿瘤周围脂肪,及患者皮下脂肪中的表达水平,初步探讨脂肪组织分泌的IL-6与上述肾上腺肿瘤疾病的关系。方法：1.用TRIZOL试剂分别提取脂肪和肿瘤组织的总RNA,包括：1)脂肪组织：肾上腺皮质醛固酮分泌瘤周围脂肪(n=12)、库欣综合征肾上腺肿瘤周围脂肪(n=7)、嗜铬细胞瘤周围脂肪(n=7)、正常肾上腺周围脂肪(n=6)、醛固酮分泌瘤患者皮下脂肪(n=4)、非肾上腺疾病患者皮下脂肪(n=4)；2)肿瘤及肾上腺组织：醛固酮分泌瘤(n=7)、库欣综合征肾上腺肿瘤(n=5)、嗜铬细胞瘤(n=6)、正常肾上腺皮质(n=5)、正常肾上腺髓质(n=5)。2.逆转录后扩增IL-6和内参照基因GAPDH的cDNA,产物电泳后测量条带灰度,计算IL-6/GAPDH灰度比值代表IL-6mRNA的相对表达量；3.比较IL-6mRNA在不同肾上腺肿瘤周围脂肪之间及不同肾上腺肿瘤组织之间的表达差异；比较IL-6mRNA在同一患者皮下、肿瘤周围脂肪及肾上腺肿瘤中的表达差异；分析IL-6mRNA表达和肿瘤体积、肿瘤分泌激素水平、患者胰岛素抵抗指数等生化指标及临床表现的关系。结果：1.在肾上腺肿瘤、肿瘤周围脂肪和皮下脂肪组织中均存在不同程度的IL-6mRNA表达。2. IL-6mRNA在原醛症肾上腺肿瘤及脂肪组织中的表达：1)醛固酮分泌瘤周围脂肪的表达低于正常肾上腺周围脂肪(0.63±0.25vs0.82±0.07,P<0.05)；醛固酮瘤患者与正常肾上腺对照者皮下脂肪中的表达无统计学差异,但前者有偏高趋势(1.01±±0.12vs0.85±±0.09,P=-0.086)。2)醛固酮分泌瘤患者皮下脂肪的表达显著高于肿瘤周围脂肪(1.01±0.12vs0.544±0.24,P<0.01)；肿瘤周围脂肪高于肿瘤组织(0.51±0.20vs0.38±±0.17,P<0.05),均有统计学差异。3)醛固酮分泌瘤组织的表达低于嗜铬细胞瘤(0.38±±0.17vs0.65±0.22,P<0.05)；但与库欣综合征肾上腺瘤及正常肾上腺皮质无统计学差异(0.38±0.17vs0.42±±0.14,P=0.621;0.38±0.17vs0.37±±0.07,P=0.870)。4)醛固酮分泌瘤周围脂肪IL-6mRNA增高与HOMA-IR相关,在伴代谢综合征组较非代谢综合征组有增高的趋势(0.69±0.31vs0.46±0.13,P=0.163)。3. IL-6mRNA在库欣综合征肾上腺肿瘤及脂肪组织中的表达：1)库欣综合征肾上腺肿瘤周围脂肪的表达较正常肾上腺周围脂肪有偏低趋势(0.62±0.24vs0.82±0.07,P=-0.072)；且较肿瘤有增高趋势(0.67±0.20vs0.47±0.08,P=0.246)。2)库欣综合征肾上腺肿瘤中的表达较嗜铬细胞瘤有偏低趋势(0.42±0.13vs0.65±0.22,P=0.077)；与正常肾上腺皮质无显著差异(0.42±0.13vs0.37±0.07,P=0.408)。3)库欣综合征肾上腺肿瘤周围脂肪中IL-6的表达与患者24h尿游离皮质醇呈正相关(r=0.857,P<0.05)；肾上腺肿瘤中IL-6的表达与患者早晨八点血总皮质醇呈正相关(r=0.900,P<0.05)。4. IL-6mRNA在嗜铬细胞瘤及脂肪组织中的表达：1)嗜铬细胞瘤周围脂肪的表达与正常肾上腺周围脂肪无统计学差异(0.79±0.18vs0.82±0.07,P--0.670)；较醛固酮分泌瘤周围脂肪有偏高的趋势(0.79±0.18vs0.63±0.25,P=0.155)；较库欣综合征肾上腺肿瘤周围脂肪也有偏高的趋势(0.79±0.18vs0.62±0.24,P=0.155)。2)嗜铬细胞瘤周围脂肪的表达有高于嗜铬细胞瘤的趋势(0.81±0.19vs0.65±0.22,P=0.115)。3)嗜铬细胞瘤中的表达高于正常髓质(0.65±0.22vs0.31±0.16,P<0.05)5.正常肾上腺对照者皮下脂肪与肾上腺周围脂肪无统计学差异(0.85±0.09vs0.844±0.08,P--0.628)。正常肾上腺周围脂肪中的表达显著高于正常肾上腺皮质(0.82±0.07vs0.37±0.07,P<0.01),也显著高于正常肾上腺髓质(0.82±0.07vs0.31±16,P<0.01)。6.肾上腺肿瘤周围脂肪中IL-6mRNA水平与肿瘤体积呈正相关(r=0.419,P<0.05)；肾上腺肿瘤组织中IL-6的表达水平也与肿瘤体积呈正相关(r=0.542,P<0.05)；IL-6mRNA在肾上腺肿瘤周围脂肪中的表达水平与其相应肿瘤组织中的表达呈显著正相关(r=0.696,P<0.01)。结论：1.在原发性醛固酮增多症、库欣综合征及嗜铬细胞瘤的肾上腺肿瘤周围脂肪、皮下脂肪及肾上腺肿瘤组织中均存在不同程度的IL-6mRNA表达;IL-6mRNA在三种肾上腺肿瘤的周围脂肪与其相应肿瘤组织中的表达水平呈显著正相关(r=0.696,P<0.01)；肿瘤周围脂肪中的IL-6mRNA表达有高于肿瘤组织的趋势；肾上腺肿瘤患者脂肪组织分泌的IL-6,可能参与胰岛素抵抗；肾上腺肿瘤与肿瘤周围脂肪IL-6之间可能存在密切的相互作用。2.醛固酮瘤周围脂肪中IL-6mRNA表达显著低于其皮下脂肪及正常肾上腺周围脂肪,但高于醛固酮瘤,其临床及病理生理意义需进一步研究。3.肾上腺肿瘤周围脂肪及肿瘤组织中IL-6mRNA的水平与肿瘤体积呈显著正相关,IL-6mRNA在嗜铬细胞瘤中的表达显著高于正常肾上腺髓质,提示IL-6可能与肾上腺肿瘤的发病过程有关。4.库欣综合征肾上腺肿瘤周围脂肪、肾上腺肿瘤IL-6mRNA表达分别与患者24h尿游离皮质醇、8AM血总皮质醇呈正相关(P<0.05)。5.经MEDLINE检索,上述部分结果国内外文献未见报告。

全文目录


中文摘要  4-7
ABSTRACT  7-11
英文缩略词表  11-13
前言  13-15
材料与方法  15-24
  一、研究对象  15-16
  二、主要仪器、试剂  16-19
  三、实验方法  19-24
结果  24-43
  一、组织总RNA鉴定与定量  24-25
  二、PCR反应体系和条件的确定  25-28
  三、IL-6 mRNA在肾上腺肿瘤、肿瘤周围脂肪和皮下脂肪组织中的表达  28-43
讨论  43-48
  一、实验方法学  43-44
  二、IL-6在脂肪组织及肾上腺肿瘤中表达的意义  44-48
结论  48-49
实验的不足  49-50
参考文献  50-53
附录  53-54
论文综述  54-64
  参考文献  59-64
致谢  64

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 内分泌腺肿瘤 > 肾上腺肿瘤
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