学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

骨桥蛋白调节间质—上皮转化促进肝癌转移的研究

作　者: 梁英超
导　师: 郭亚军
学　校: 第二军医大学
专　业: 肿瘤学
关键词: 骨桥蛋白 肝癌细胞 肿瘤转移 间质上皮转化 微小RNA
分类号: R735.7
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
下　载: 25次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载
 

内容摘要


肝细胞性肝癌（Hepatocellular Carcinoma, HCC）是世界上最常见的恶性肿瘤之，在我国尤为严重。其具有进展速度快，恶性程度高，且易转移及复发等系列特点。肝癌的复发及转移是影响肝癌治疗效果的最主要障碍。骨桥蛋白（osteopontin,OPN）是种磷酸化糖蛋白，其表达与许多恶性肿瘤的发生和发展有着十分密切的联系。作为个和肿瘤转移密切相关的重要基因，OPN在肿瘤的治疗方面显示出广阔的前景。肿瘤的转移是个多步骤的复杂过程。间质-上皮转化（Mesenchymal-Epithelial Transition, MET）是肿瘤细胞在转移过程的后期，重塑上皮表型，表达粘附分子，从而与组织接触并整合进新器官形成转移灶的重要步骤。本课题着重探讨核型OPN调节MET促进肝癌转移的作用及其分子机理。这为将来开发抑制转移的新靶点和发展有效的治疗方案具有重要的理论指导意义。本课题利用靶向OPN的RNA干扰慢病毒和过表达OPN的慢病毒调控OPN的表达水平，研究OPN调节间质-上皮转化促肝癌细胞转移的作用。我们将肝癌细胞系用慢病毒分别下调和过表达OPN，从形态学观察，蛋白和mRNA水平检测以及免疫荧光定位等方法检测MET相关指标的变化。使用激光共聚焦技术检测各细胞系中OPN的表达定位。应用抗OPN抗体阻断细胞上清中的分泌型OPN，以及应用含有去除OPN的条件培养基培养细胞后，我们发现核型OPN诱导肝癌细胞发生MET。此外我们通过免疫共沉淀研究了OPN与HIF2a的相互作用，应用染色质免疫共沉淀探讨了HIF2a对AKT1启动子区的结合和调控，以及OPN与这种结合和调控之间的关系。此外通过小干扰RNA，微小RNA （microRNA） mimics和inhibitor转染技术，我们证明了AKT1/microRNA-429（miR-429）在核型OPN诱导的MET中发挥关键作用。裸鼠皮下移植瘤实验证明了转移过程中核型OPN的表达上调和MET的发生。尾静脉注射肿瘤转移模型证明了OPN下调对转移过程中MET的阻断。肝癌转移灶临床标本显示核型OPN表达增强，同时伴随E-钙粘素在细胞膜上的清晰表达。而在肝癌原发灶中OPN在胞浆中表达，无核型OPN表达，胞浆OPN表达水平与E-钙粘素胞膜表达成负相关。本课题的研究结果显示，核型OPN通过诱导MET促进HCC转移灶的形成。OPN可直接与HIF2a结合，阻断HIF2a对AKT1的表达抑制，促进AKT1的表达，进而使miR-429表达上调，以诱导细胞发生MET，促进远处转移的发生。本课题的意义在于我们首次发现了核型OPN在肝癌细胞中诱导MET的现象，证明了核型OPN可以通过诱导MET促进肝癌细胞转移灶的形成，为研究肝癌转移提供新的理论基础。

全文目录


相似论文

  1. 塞来昔布与β-榄香烯联合给药的抗肿瘤作用及其机制研究,R96
  2. 阿伐他汀对糖尿病大鼠肾脏骨桥蛋白表达的影响及其分子机制,R587.2
  3. MCFP对肝癌细胞生物行为学影响初步研究,R735.7
  4. 氢离子调节通道在肝癌细胞的表达及其功能作用,R735.7
  5. L-4-硝基苯丙氨酸等5种氨基酸衍生物的生物学作用研究,R96
  6. L-4-氟苯丙氨酸等6种氨基酸衍生物的生物学作用研究,R96
  7. 骨桥蛋白通过MAPK信号通路上调MMP9表达及与胚胎着床相关性分析,R321
  8. α1，3岩藻糖基转移酶Ⅳ（Fut4）表达上调增加鳞状癌细胞scc12转移潜能,R730.2
  9. CXCR1/CXR2受体拮抗剂对小鼠腹水型肝癌淋巴转移潜能的影响,R735.7
  10. RMP对肝癌细胞增殖的影响及其分子机制研究,R735.7
  11. 艾迪注射液对不同恶性肿瘤细胞放射增敏作用及机制研究,R285.5
  12. 慢性炎症应激因素对肝癌细胞株中microRNA-155表达及细胞增殖的影响,R735.7
  13. RMP的回复对人肝癌细胞SMMC-7721生物学特性的影响,R735.7
  14. 丹参酮ⅡA磺酸钠对SMMC-7721肝癌细胞生长的影响,R735.7
  15. 叶酸靶向纳米复合物的制备及体内外MR成像实验研究,R735.7
  16. 穿膜肽11R在携带P53基因的溶瘤腺病毒中抗肿瘤作用的研究,R735.7
  17. SiRNA阻抑Survivin基因表达对肝癌细胞细胞周期影响的研究,R735.7
  18. 海藻色素糖蛋白对小鼠肝癌的抑制作用研究,R735.7
  19. MicroRNA-21和-141在上皮性卵巢癌患者组织和血清中的表达及临床意义的探讨,R737.31
  20. 炎症介质白三烯D4在慢性乙型肝炎和原发性肝癌发生发展中的作用,R512.62
  21. 微小RNA-223及其标靶基因c-myc在肝癌发病中的作用,R735.7

中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 消化系肿瘤 > 肝肿瘤
© 2012 www.xueweilunwen.com