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原发性胆汁性肝硬化发病机制和生物标志物的研究

作　者: 张磊
导　师: 张奉春
学　校: 北京协和医学院
专　业: 临床医学
关键词: 原发性胆汁性肝硬化人类全基因组表达谱芯片(22K 约22000个基因) 发病机制生物标志物
分类号: R575.22
类　型: 博士论文
年　份: 2009年
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内容摘要

目的利用基因芯片技术找出原发性胆汁性肝硬化(primary biliary cirrhosis, PBC)患者中差异表达的基因,并进行生物学水平的验证,从而为疾病诊断、治疗以及明确病因提供帮助。方法收集PBC患者和健康对照09例,采集外周静脉血,提取外周血单个核细胞总RNA,进行人类全基因组表达谱芯片(22K,约22000个基因)检测,找出PBC中差异表达的基因。进一步用实时定量PCR技术并扩大样本量对筛选结果作生物学水平验证。结果基因芯片共筛选出65个在PBC中差异表达的基因,其中20个表达上调,45个表达下调。从筛选结果中选出位于NK细胞介导的细胞毒通路上的两个重要基因PRF1、TYROBP进行验证。发现PRF1在PBC早期或非活动期表达上调,TYROBP在PBC中表达下调。结论基因芯片为探索PBC的发病机制提供了方向,NK细胞对PBC的启动和维持可能发挥重要作用,PBMC中PRF1的表达水平可以成为判断疾病进展新的生物标志物。

全文目录

目录  3-4
英文缩略词表  4-5
中文摘要  5-6
Abstract  6-7
前言  7-8
实验目的  8
材料与方法  8-14
  一、研究对象及项目  8-9
  二、主要仪器和试剂  9-10
  三、实验方法  10-13
  四、统计学分析  13-14
结果  14-31
  一、提取PBMC总RNA结果  14
  二、全基因组表达谱芯片检测结果  14-20
  三、实时定量PCR  20-31
讨论  31-34
结论  34-35
参考文献  35-37
论文综述  37-45
  参考文献  41-45
致谢  45

原发性胆汁性肝硬化发病机制和生物标志物的研究

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