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紫甘薯叶活性物质提取及黄酮护肝作用研究

作　者: 陶东川
导　师: 吕晓玲
学　校: 天津科技大学
专　业: 食品科学
关键词: 紫甘薯叶 蛋白质 黄酮 多糖 提取 大孔吸附树脂 慢性肝损伤
分类号: R284.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 22次
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内容摘要


紫甘薯是旋花科草本植物,因富含花青素、薯肉紫红而闻名,含有多种具有生物活性的化学物质,紫甘薯叶中蛋白质、黄酮、多糖含量较高,活性多样,具有良好的应用前景。(1)进行系统组分预实验,测定样品中主要营养素的含量,确定提取路线：首先热水浸提蛋白质,过滤得滤渣;其次用乙醇溶液提取滤渣中的黄酮,过滤得滤渣；最后用水提取滤渣中的多糖。(2)通过单因素实验和中心组合实验得出蛋白质提取的最佳条件：液固比70mL/g,超声功率390W,时间21min,温度20℃,提取1次,得率为3.97%。(3)通过单因素实验和中心组合实验得出黄酮提取的最佳条件：乙醇浓度85%,液固比51mL/g,超声功率410W,时间20min,温度33℃,提取1次,得率为3.19%。采用AB-8大孔树脂纯化黄酮的最优工艺条件为：原液浓度0.9mg/mL,原液流速2BV/h,原液pH=4.0,淋洗剂为pH4.0的蒸馏水,洗脱剂为70%乙醇,洗脱流速为1BV/h,洗脱剂用量为3BV,纯化后黄酮的纯度可达72.3%。通过HPLC-MS和HPLC分析,判断紫甘薯叶黄酮水解样中可能含有芦丁、槲皮素、山奈酚、木犀草索和异鼠李素这五种黄酮类物质。(4)通过单因素实验和中心组合实验得出多糖提取的最佳条件：液固比80mL/g,功率395W,时间30min,温度69℃,提取1次,得率为3.66%。比较了活性炭和大孔吸附树脂脱色的效果,得到脱色的最佳工艺条件：OU-1树脂脱色,溶液pH=4.0,常温。(5)通过动物实验可知,紫甘薯叶总黄酮能够降低CCl4致慢性肝损伤小鼠的肝脏指数;降低小鼠血清中谷丙转氨酶和谷草转氨酶的活性,升高血清中白蛋白和总蛋白的含量；升高小鼠肝匀浆中超氧化物歧化酶的活性,降低肝匀浆中丙二醛的含量。每日摄入50mg/mL的黄酮溶液即能显著保护慢性肝损伤小鼠的肝脏。

全文目录


摘要  4-5
ABSTRACT  5-12
1 前言  12-22
  1.1 紫甘薯简介  12
  1.2 甘薯叶活性物质的化学成分  12-13
    1.2.1 蛋白质  12
    1.2.2 多糖类化合物  12
    1.2.3 黄酮类化合物  12
    1.2.4 维生素和矿物质  12
    1.2.5 类胡萝卜素  12-13
    1.2.6 其它物质  13
  1.3 植物类化合物主要提取方法  13
    1.3.1 热水浸提法  13
    1.3.2 碱提酸沉法  13
    1.3.3 有机溶剂法  13
    1.3.4 酶法  13
    1.3.5 超声波辅助法  13
    1.3.6 微波辅助法  13
  1.4 蛋白质的沉淀及含量测定  13-14
    1.4.1 蛋白质的沉淀  13-14
    1.4.2 蛋白质的含量测定  14
  1.5 黄酮类化合物的研究概况  14-18
    1.5.1 黄酮类化合物的结构和分类  14-15
    1.5.2 黄酮类化合物的生物活性  15-16
    1.5.3 黄酮类化合物的分离纯化  16-17
    1.5.4 黄酮类化合物的分析检测  17-18
  1.6 多糖的研究概况  18-20
    1.6.1 多糖的生物活性  18-19
    1.6.2 多糖的分离纯化  19-20
    1.6.3 多糖的含量测定  20
  1.7 本实验的研究目的、意义及主要内容  20-22
    1.7.1 研究的目的及意义  20-21
    1.7.2 研究的主要内容  21-22
2 材料与方法  22-39
  2.1 实验材料  22
  2.2 主要仪器  22
  2.3 主要试剂  22-23
  2.4 样品预处理  23
  2.5 系统组分预实验  23-25
    2.5.1 样品提取液的制备  24-25
    2.5.2 各种成分的定性检测  25
    2.5.3 营养素的测定  25
  2.6 实验工艺流程图  25-26
  2.7 PrPSPL的提取工艺研究  26-28
    2.7.1 定量分析方法  26
    2.7.2 绘制标准曲线  26-27
    2.7.3 样品PrPSPL含量的测定  27
    2.7.4 PrPSPL提取的单因素实验  27
    2.7.5 响应面分析实验优化PrPSPL提取工艺  27
    2.7.6 重现性实验  27-28
    2.7.7 稳定性实验  28
    2.7.8 精密度实验  28
    2.7.9 加标回收实验  28
  2.8 PrPSPL的沉淀方法及纯度  28-29
    2.8.1 IE 法  28
    2.8.2 盐析法  28-29
    2.8.3 IE 法沉淀PrPSPL后,溶液中FPSPL和PPSPL的分离  29
    2.8.4 PrPSPL的纯度  29
  2.9 FPSPL 的提取工艺研究  29-31
    2.9.1 定量分析方法  29
    2.9.2 绘制标准曲线  29
    2.9.3 样品FPSPL含量的测定  29-30
    2.9.4 FPSPL提取的单因素实验  30
    2.9.5 响应面分析实验优化FPSPL提取工艺  30
    2.9.6 重现性实验  30
    2.9.7 稳定性实验  30
    2.9.8 精密度实验  30-31
    2.9.9 加标回收实验  31
  2.10 FPSPL化合物的纯化工艺及构成研究  31-33
    2.10.1 大孔吸附树脂的静态筛选  31-32
    2.10.2 AB-8大孔吸附树脂对FPSPL的动态吸附实验  32
    2.10.3 AB-8大孔吸附树脂对FPSPL的动态洗脱实验  32
    2.10.4 AB-8大孔吸附树脂的预处理与再生  32
    2.10.5 FPSPL的纯度  32
    2.10.6 FPSPL的构成研究  32-33
  2.11 PPSPL的提取工艺研究  33-35
    2.11.1 定量分析方法  33
    2.11.2 绘制标准曲线  33-34
    2.11.3 样品PPSPL含量的测定  34
    2.11.4 PPSPL提取的单因素实验  34
    2.11.5 响应面分析实验优化PPSPL的提取工艺  34-35
    2.11.6 重现性实验  35
    2.11.7 稳定性实验  35
    2.11.8 精密度实验  35
    2.11.9 加标回收实验  35
  2.12 PPSPL化合物的分离纯化  35-37
    2.12.1 分离纯化工艺流程  35
    2.12.2 PPSPL的除蛋白质  35
    2.12.3 PPSPL的脱色  35-37
    2.12.4 PPSPL的沉淀  37
    2.12.5 PPSPL的除小分子杂质  37
    2.12.6 PPSPL的纯度  37
  2.13 FPSPL对CCl_4致小鼠慢性肝损伤的保护作用  37-39
    2.13.1 药物配制  37
    2.13.2 实验动物分组与建模  37-38
    2.13.3 药物处理  38
    2.13.4 饮食  38
    2.13.5 体重  38
    2.13.6 指标采集与检测  38
    2.13.7 数据处理及分析  38-39
3 结果与讨论  39-91
  3.1 系统组分预实验  39-40
    3.1.1 各种成分的定性检测  39-40
    3.1.2 营养素的测定  40
  3.2 PrPSPL的提取工艺研究  40-48
    3.2.1 绘制蛋白质标准曲线  40-41
    3.2.2 PrPSPL提取的单因素实验  41-43
    3.2.3 响应面分析实验优化PrPSPL提取工艺  43-46
    3.2.4 重现性实验  46-47
    3.2.5 稳定性实验  47
    3.2.6 精密度实验  47
    3.2.7 加标回收实验  47-48
  3.3 PrPSPL的沉淀方法及纯度  48-49
    3.3.1 IE 法  48
    3.3.2 盐析法  48
    3.3.3 IE法沉淀PrPSPL后,溶液中FPSPL和PPSPL的分离  48-49
    3.3.4 PrPSPL的纯度  49
  3.4 FPSPL的提取工艺研究  49-59
    3.4.1 绘制芦丁标准曲线  49-50
    3.4.2 FPSPL提取的单因素实验  50-54
    3.4.3 响应面分析实验优化FPSPL提取工艺  54-57
    3.4.4 重现性实验  57-58
    3.4.5 稳定性实验  58
    3.4.6 精密度实验  58
    3.4.7 加标回收实验  58-59
  3.5 FPSPL化合物的纯化工艺及构成研究  59-71
    3.5.1 大孔吸附树脂的选择  59-60
    3.5.2 AB-8大孔吸附树脂对FPSPL的动态吸附实验  60-62
    3.5.3 AB-8大孔吸附树脂对FPSPL的动态洗脱实验  62-63
    3.5.4 FPSPL的纯度  63
    3.5.5 FPSPL的构成研究  63-71
  3.6 PPSPL的提取工艺研究  71-80
    3.6.1 绘制葡萄糖标准曲线  71-72
    3.6.2 PPSPL提取的单因素实验  72-76
    3.6.3 响应面分析实验优化PPSPL提取工艺  76-78
    3.6.4 重现性实验  78-79
    3.6.5 稳定性实验  79
    3.6.6 精密度实验  79
    3.6.7 加标回收实验  79-80
  3.7 PPSPL的纯化  80-84
    3.7.1 PPSPL的除蛋白质  80
    3.7.2 PPSPL的脱色  80-84
    3.7.3 PPSPL的沉淀  84
    3.7.4 PPSPL的透析  84
    3.7.5 PPSPL的纯度  84
  3.8 FPSPL对CCl_4致小鼠慢性肝损伤的保护作用  84-91
    3.8.1 实验小鼠生长状况  84-85
    3.8.2 FPSPL对小鼠肝脏指数的影响  85
    3.8.3 FPSPL对小鼠血清ALT与AST活性的影响  85-87
    3.8.4 FPSPL对小鼠血清ALB与TP含量的影响  87-88
    3.8.5 FPSPL对小鼠肝组织匀浆SOD活性和MDA含量的影响  88-90
    3.8.6 讨论  90-91
4 结论  91-92
5 展望  92-93
6 参考文献  93-100
7 攻读硕士期间论文发表情况  100-101
8 致谢  101

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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药化学 > 有效成分的分离与提取
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