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银耳多糖的制备、化学结构及活性研究

作　者: 曹桂华
导　师: 高其品
学　校: 长春中医药大学
专　业: 药物化学
关键词: 银耳多糖理化性质 PMP衍生化甲基化 GC-MS HK-2 匀一性
分类号: R284.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要

目的：本实验通过分离，纯化制备银耳中具有生物活性的多糖部位，并对该活性多糖进行了理化性质和化学结构的分析研究，同时对TP-1样品的匀一性进行了研究。方法：采用酸水解法将银耳子实体制备成银耳多糖、寡糖成分，并通过苯酚-硫酸法、间羟基联苯法及BCA法对银耳多糖的中性糖、酸性糖及蛋白质等理化性质进行研究分析，采用PMP衍生化法制备了单糖的衍生物，并用HPLC法确定其单糖组成。采用甲基化方法分析了解其糖苷键的连接方式，并通过凝胶柱层析和键合相层析等方法对TP-1样品进行了多糖匀一性研究。结果：银耳多糖样品中含有大量的中性糖和酸性糖，其中还含有较少量的蛋白质，银耳多糖主要是由甘露糖组成，还含有少量的葡萄糖，葡萄糖醛酸及木糖，其结构主要由（1→3）连接的Man主链组成，主链Man上的分支点在其2位，连接着以1→6连接4位分支的甘露糖侧链。其还原末端是由Xyl、Glu和Man构成。TP-1样品具有较好的匀一性。通过药理学实验我们发现TP-1样品对于HK-2细胞具有明显的增殖活性。结论：通过对银耳的酸水解、分离，得到收率高、纯度高的银耳多糖，为其今后的开发应用奠定了一定的基础；并通过分析了解了银耳多糖的理化性质及化学结构,通过药理学实验发现该部分银耳多糖对于HK-2细胞增殖具有明显的促进作用，而且该部分样品具有较好的匀一性。

全文目录

中文摘要  7-8
ABSTRACT  8-9
英文缩略语  9-10
前言  10-11
文献综述  11-18
  第一部分多糖的研究进展  11-16
    1 多糖的分类及来源  11
    2 多糖的提取分离、纯化、纯度鉴定及其分子量的测定  11-13
    3 多糖的构效关系的研究  13-14
    4 多糖的生物活性及其药学领域的应用  14-16
  第二部分银耳多糖的研究进展  16-18
    1 银耳多糖的药理活性  16-17
    2 发展前景  17-18
实验研究  18-48
  第一章不同分子量银耳多糖的制备  18-20
    实验部分  18
    水解方法的考察  18-20
      1 碱水解方法  18
      2 酸水解方法  18-20
    结果与讨论  20
  第二章银耳多糖的理化性质、组成糖及结构研究  20-32
    第一节银耳多糖理化性质的研究  20-27
      1 材料与仪器  20
      2 实验方法  20-23
      结果与讨论  23-27
    第二节银耳多糖的组成糖研究  27-29
      材料与方法  27-28
        1 试剂与仪器  27
        2 多糖衍生物的制备  27-28
      结果与讨论  28-29
    第三节银耳多糖的糖苷键连接方式研究  29-32
      材料与方法  29-30
        1 材料  29
        2 实验方法  29-30
      结果与讨论  30-32
        讨论  31-32
  第三章银耳多糖的匀一性研究  32-48
    第一节 Sephadex G-100 凝胶柱层析分离纯化 TP-1 样品  32-34
      材料与方法  32-34
        1 试剂与仪器  32
        2 实验方法  32-34
      结果与讨论  34
    第二节 Sepharose CL-6B 分离纯化 TP-1 样品  34-35
      材料与方法  34-35
        1 试剂与仪器  34
        2 实验方法  34-35
      结果与讨论  35
    第三节 Sephadex G-25 凝胶柱层析分离纯化 TP-1 样品  35-36
      材料与方法  35-36
        1 试剂与仪器  35
        2 实验方法  35-36
      结果与讨论  36
    第四节生物胶 P-2 分离纯化 TP-1 样品  36-37
      材料与方法  36-37
        1 试剂与仪器  36
        2 实验方法  36-37
      结果与讨论  37
    第五节生物胶 P-6 分离纯化 TP-1 样品  37-38
      材料与方法  37-38
        1 试剂与仪器  37
        2 实验方法  37-38
      结果与讨论  38
    第六节 Con A- Sepharose 4B 键合相层析分离纯化 TP-1 样品  38-40
      材料与方法  38-39
        1 试剂与仪器  38
        2 实验方法  38-39
      结果与讨论  39-40
    第七节 Sephadex G-10 凝胶柱分离纯化 TP-3 部分  40-42
      1 试剂与仪器  40
      2 实验方法  40-42
      结果与讨论  42
    第八节透析袋分离纯化 TP-2 和 TP-336  42-48
      材料与方法  42-44
        1 试剂与仪器  42
        2 实验方法  42-44
      结果  44-47
      结果与讨论  47-48
讨论  48-49
结语  49-50
致谢  50-51
参考文献  51-54
附图  54-60

银耳多糖的制备、化学结构及活性研究

内容摘要

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