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生育三烯酚对小鼠胆固醇代谢及其相关基因表达的研究

作　者: 何沙沙
导　师: 文利新
学　校: 湖南农业大学
专　业: 临床兽医学
关键词: 生育三烯酚 胆固醇代谢 PPARα CYP7A1 ABCA1
分类号: S865.13
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要


研究目的：探讨生育三烯酚对小鼠高脂模型胆固醇代谢的影响,对其作用机理进行初步探讨,为生产功能性动物饲料提供理论依据。研究方法：(1)选取体质健康的3周龄昆明系雄性小鼠60只,随机分为正常组和高脂组。其中,正常组包括生育三烯酚组和空白对照组,分别给予200mg/kg生育三烯酚和等剂量的生理盐水,饲喂基础日粮。高脂组分为4组,通过灌胃分别给予Omg/kg、50mg/kg、100mg/kg、200mg/kg的生育三烯酚,饲喂高脂饲料。预试期5d,试验期60d。每5天称一次体重。试验结束时对小鼠进行眼眶后静脉丛采血分离血清,采用生化分析方法测定TC(总胆固醇)、TG(甘油三酯)、HDL(高密度脂蛋白)、LDL(低密度脂蛋白)、ALT(谷丙转氨酶)以及AST(谷草转氨酶)的活性,采用酶法测FFA(游离脂肪酸酶)的活性。(2)处死后,收集肝脏：称量,分析脏器指数；检测肝脏组织中甘油三酯及总胆固醇的含量；制作肝脏病理切片,观察各组小鼠肝脏组织的病理变化；RT-PCR检测胆固醇代谢相关调控基因PPARα、ABCA1和CYP7A1mRNA的转录水平变化。研究结果：(1)对照组中,饲喂生育三烯酚组小鼠体重显著升高(P<0.05)。肝脏系数结果中,高脂组内,随着生育三烯酚剂量增加对肝脏系数有一定升高作用,但组间差异不显著(P>0.05)。(2)血清生化指标结果显示,生育三烯酚对ALT和AST活性有一定的抑制作用；正常组小鼠添加生育三烯酚后,TC、TG、LDL和FFA活性下降,HDL活性上升,组间差异不显著(P>0.05)；高脂组内,小鼠添加生育三烯酚后TC活性升高,TG、LDL和FFA活性下降,当生育三烯酚剂量为200mg/kg时小鼠HDL的活性反而降低,但组间差异都不显著(P>0.05)。(3)高脂组内肝脏中TC活性随生育三烯酚剂量升高而降低,组间差异不显著P>0.05)；TG活性随生育三烯酚剂量升高而升高,低、中剂量差异极显著(P<0.01)。(4)RT-PCR结果表明,正常组内,生育三烯酚组PPARα、CYP7A1和ABCAlmRNA值显著升高(P<0.05)。高脂组内,PPARa mRNA值在生育三烯酚剂量为100mg/kg时达到最高值；CYP7A1mRNA值随着生育三烯酚剂量升高而降低；ABCA1mRNA值随着生育三烯酚剂量升高而升高。研究结论：生育三烯酚可以改善小鼠肝组织损害及肝功能损伤,促进肝细胞胆固醇代谢能力。其对肝脏的保护作用是通过调节肝脏脂肪代谢PPARα、CYP7A1、ABCA1基因活性表达来实现的。

全文目录


摘要  4-6
Abstract  6-10
前言  10-17
  1 胆固醇代谢及其调控  10-14
    1.1 胆固醇的代谢过程  10-11
    1.2 肝脏胆固醇代谢的关键因子及其调控  11-14
  2 生育三烯酚的简介  14-16
    2.1 生育三烯酚结构和性质  14
    2.2 生育三烯酚的生理功能  14-16
  3 研究目的和意义  16-17
第一节 生育三烯酚对小鼠血清、肝脏胆固醇代谢相关生化指标的影响  17-29
  1 材料与方法  17-22
    1.1 实验材料  17-18
    1.2 溶剂配置  18
    1.3 实验方法与实验设计  18-19
    1.4 各项指标的测定  19-21
    1.5 组织切片的制作  21
    1.6 数据统计及分析  21-22
  2 结果与分析  22-27
    2.1 小鼠体重变化  22
    2.2 小鼠肝脏系数的变化  22-23
    2.3 肝脏的眼观变化  23-24
    2.4 肝脏病理组织变化  24-25
    2.5 小鼠血清AST、ALT检测结果  25
    2.6 小鼠血清TC、TG、HDL和LDL的检测  25-26
    2.7 对小鼠血清FFA的影响  26
    2.8 对小鼠肝脏总胆固醇的影响  26-27
    2.9 对小鼠肝脏甘油三酯的影响  27
  3 讨论  27-29
第二节 生育三烯酚对小鼠胆固醇代谢相关因子基因表达的影响  29-37
  1 材料与方法  29-33
    1.1 试验动物和样品采集  29
    1.2 试验仪器设备  29
    1.3 试剂及试剂盒  29-30
    1.4 溶剂配置  30
    1.5 RT-PCR法检测肝脏胆固醇代谢相关基因  30-33
  2 结果与分析  33-35
    2.1 胆固醇代谢相关基因的电泳图  33
    2.2 生育三烯酚对小鼠肝脏PPARα基因的影响  33-34
    2.3 生育三烯酚对小鼠肝脏ABCA1基因的影响  34
    2.4 生育三烯酚对小鼠肝脏CYP7A1基因的影响  34-35
  3 讨论  35-37
第三节 全文结论与创新点  37-38
参考文献  38-42
缩略词表  42-43
致谢  43-44
作者简介  44

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中图分类: > 农业科学 > 畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂 > 狩猎、野生动物驯养 > 各种野生动物驯养 > 实验用动物 > 小白鼠
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