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蓖麻粕脱毒菌种筛选及发酵脱毒效果分析
作 者: 周馥卉
导 师: 兰时乐;罗胜
学 校: 湖南农业大学
专 业: 生物技术
关键词: 蓖麻饼粕 固体发酵 蓖麻碱 变应原 脱毒 根霉
分类号: S816
类 型: 硕士论文
年 份: 2013年
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内容摘要
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蓖麻籽榨油后的副产物——蓖麻饼粕蛋白质含量丰富,但由于饼粕中含有对动物有毒的蓖麻碱、变应原、蓖麻毒素和血球凝集素,限制了其在饲料工业中的应用,所以,蓖麻饼粕是一种尚待开发利用的资源。本文采用平板分离法从自然霉变的蓖麻饼粕中分离筛选能降解蓖麻碱和变应原的微生物,探讨了其固体发酵条件下对蓖麻碱、变应原降解率和营养物质变化规律的影响因素,如发酵培养基组成和发酵条件等,并采用正交试验法优化了发酵条件。主要结果如下:1、从自然霉变的蓖麻饼粕中分离出对蓖麻碱和变应原具有较好脱毒效果的霉菌,命名为MJ-7,通过对分离菌株MJ-7进行显微形态、特殊结构的观察,结果表明,该菌具有典型的假根、匍匐枝特殊结构和典型的孢子囊,初步鉴定该菌为根霉属。2、采用单因素试验法,研究了根霉发酵蓖麻饼粕脱毒的碳源、氮源、无机盐、固水比、发酵温度、初始pH值、接种量、发酵时间等因素对蓖麻碱和变应原去除率、粗蛋白和总游离氨基酸提高率的影响。结果表明,适宜的发酵条件为:蓖麻饼粕与麦麸的比例为95:5,葡萄糖1.5%,KH2PO40.25%, CaCO30.4%,固水比1:0.8,发酵温度28℃,初始pH值6.5,接种量12%,发酵时间6d.在此条件下,蓖麻碱和变应原去除率分别为87.79%和95.15%,粗蛋白和总游离氨基酸提高率分别为5.94%和7.32%。3、采用正交试验法,对菌株MJ-7固体发酵蓖麻饼粕的条件进行了优化。结果表明,优化的发酵条件为:固水比1:0.8、发酵温度28℃、初始pH值7.0、接种量10%,蓖麻碱和变应原的降解率分别达到89.56%和96.79%。该研究为蓖麻饼粕的微生物脱毒提供了参考依据。
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全文目录
摘要 4-5 Abstract 5-10 第一章 文献综述 10-24 1 蓖麻饼粕的研究概况 10-24 1.1 蓖麻及其应用 10-12 1.1.1 蓖麻简介 10 1.1.2 蓖麻的应用 10-12 1.2 蓖麻饼粕的营养价值 12-13 1.2.1 蓖麻籽的营养价值 12 1.2.2 蓖麻饼粕的成分及营养价值 12-13 1.3 蓖麻饼粕中的有毒成分及应用 13-17 1.3.1 蓖麻碱(Ricinine) 13-16 1.3.2 蓖麻毒蛋白(Ricin) 16 1.3.3 变应原(Allergen) 16-17 1.3.4 血球凝集素(Hemagglutinins) 17 1.4 蓖麻饼粕脱毒的研究进展 17-22 1.4.1 蓖麻饼粕脱毒的方法 17-20 1.4.2 脱毒蓖麻饼粕的应用 20-22 1.5 本论文研究的目的、意义 22 1.6 研究内容 22-24 第二章 蓖麻饼粕脱毒微生物的筛选及初步鉴定 24-31 1 材料与方法 24-27 1.1 材料 24-25 1.1.1 分离样品来源 24 1.1.2 主要试剂 24-25 1.1.3 主要仪器设备 25 1.1.4 培养基 25 1.2 方法 25-27 1.2.1 蓖麻饼粕脱毒菌种的筛选 25-26 1.2.2 脱毒菌种的初步鉴定 26 1.2.3 培养 26 1.2.4 蓖麻碱和变应原含量测定 26-27 2 结果与讨论 27-30 2.1 标准曲线 27-28 2.1.1 蓖麻碱标准曲线 27 2.1.2 变应原标准曲线 27-28 2.2 脱毒菌种初筛结果 28 2.3 脱毒菌种复筛结果 28-29 2.4 菌株初步鉴定 29-30 3 结论 30-31 第三章 蓖麻饼粕脱毒条件的研究 31-50 1 材料与方法 31-36 1.1 试验材料 31-32 1.1.1 脱毒菌种MJ-7 31 1.1.2 主要试剂 31 1.1.3 主要仪器设备 31-32 1.1.4 培养基 32 1.2 方法 32-36 1.2.1 试剂配制 32-33 1.2.2 培养方法 33 1.2.3 发酵培养基的筛选 33 1.2.4 发酵条件的筛选 33-34 1.2.5 发酵条件的优化 34 1.2.6 测定 34-36 2 结果与分析 36-49 2.1 蛋白质标准曲线 36 2.2 发酵培养基筛选 36-41 2.2.1 蓖麻饼粕与麦麸比例对菌种MJ-7固体发酵的影响 36-38 2.2.2 葡萄糖添加量对菌种MJ-7固体发酵的影响 38-39 2.2.3 KH_2PO_4添加量对菌种MJ-7固体发酵的影响 39-41 2.3 发酵条件研究 41-48 2.3.1 固水比对菌种MJ-7固体发酵的影响 41-42 2.3.2 发酵温度对菌种MJ-7固体发酵的影响 42-43 2.3.3 初始pH值对菌种MJ-7固体发酵的影响 43-45 2.3.4 接种量对菌种MJ-7固体发酵的影响 45-46 2.3.5 发酵时间对菌种MJ-7固体发酵的影响 46-48 2.4 发酵条件的优化 48-49 3 结论 49-50 第四章 结论与展望 50-52 1 结论 50-51 2 展望 51 3 下一步工作 51 4 创新点 51-52 参考文献 52-60 在读期间发表的学术论文 60-61 致谢 61-62 作者简介 62
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中图分类: > 农业科学 > 畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂 > 普通畜牧学 > 饲料
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